何晓霞
- 作品数：4 被引量：2H指数：1
- 供职机构：广西大学动物科学技术学院更多>>
- 发文基金：广西壮族自治区自然科学基金国家自然科学基金广西壮族自治区科学研究与技术开发计划更多>>
- 相关领域：农业科学更多>>
- 广西流行狂犬病毒糖蛋白基因的遗传性分析被引量：1
- 2012年
- 【目的】通过测定广西流行狂犬病毒糖蛋白(G)基因的全序列,了解广西狂犬病的流行趋势和遗传变异规律,为制定广西狂犬病的防控策略提供科学依据。【方法】2000年10月～2007年10月,从广西14个市采集1569份动物脑组织,经RT-PCR检测及小白鼠脑内接种试验分离狂犬病毒,然后对狂犬病毒G基因进行测序分析。【结果】从广西各地共分离获得26株狂犬病毒野毒株,其中犬23份,牛、猪、猫各1份。狂犬病毒G基因核苷酸全长2067bp,开放阅读框1575bp,编码524个氨基酸。根据G基因核苷酸同源性及遗传进化树分析结果,可将广西流行的狂犬病毒株分成3个群,Ⅰ群15株,其核苷酸同源性为97.7%～99.9%;Ⅱ群10株,其核苷酸同源性为98.0%～99.9%;Ⅲ群只有1株。通过氨基酸变异分析,了解了26株野毒株G基因编码蛋白的氨基酸突变位点。【结论】广西存在3个群的狂犬病毒野毒株,且以Ⅰ群和Ⅱ群流行为主,3个群的氨基酸变异均呈现明显的特异性。
- 杨健张红普章民李晓宁何晓霞谢琳娟陆专灵韦显凯唐海波罗廷荣
- 关键词：狂犬病毒G基因
- 狂犬病病毒SYBR-GreenⅠ实时荧光定量PCR检测方法的建立
- 2012年
- 狂犬病病毒为不分节段单链负股的RNA病毒,属弹状病毒科狂犬病病毒属。世界上几乎所有国家都有狂犬病发生,狂犬病病毒能够使所有温血动物发病致死,死亡率高达100%。本研究根据GenBank中的狂犬病病毒M基因序列,选择保守区域设计引物,通过对SYBR-GreenⅠ实时荧光PCR反应条件进行优化,建立了用于检测狂犬病病毒的SYBR-GreenⅠ实时荧光PCR方法。结果显示,建立的狂犬病病毒实时荧光定量PCR方法,具有特异性强、灵敏度高、重复性好的优点,是开展狂犬病的临床检测的有力工具。
- 陆专灵何晓霞谢琳娟梁湘唐海波罗扬罗廷荣
- 关键词：狂犬病病毒
- 2011-2012年广西犬脑组织狂犬病病毒检测及其全基因组序列分析
- 本实验对来自广西部分地区共443份犬脑组织病料进行RT-PCR检测,经诊断其中共有6份为狂犬病病毒(rabies virus, RV)阳性。用小鼠进行脑内接种并成功分离出6株狂犬病病毒株,分别命名为GXHCHJ、GXLZ...
- 何晓霞
- 关键词：狂犬病病毒
- 文献传递
- 猪STAT-1α基因的原核表达及其多克隆抗体制备被引量：1
- 2014年
- 【目的】通过制备STAT-1α多克隆抗体,为进一步研究STAT-1α蛋白的功能特性及探索STAT-1α与猪瘟病毒间的相互作用机制奠定基础。【方法】利用RT-PCR从猪肾PK-15细胞中克隆出STAT-1α基因保守片段,与pET-32a(+)构建原核表达重组质粒,转化原核宿主菌(Rosetta),进行IPTG诱导表达,表达的重组蛋白经纯化和复性浓缩后,免疫小鼠制备STAT-1α多克隆抗体。【结果】STAT-1α基因能与原核表达载体pET-32a(+)构建原核表达重组质粒pET-STAT-1α,转化大肠杆菌Rosetta后的最佳体外诱导条件是IPTG 0.5 mmol/L、诱导时间6 h,其重组蛋白主要以包涵体的形式表达。STAT-1α多克隆抗体具有高效特异性,与真核细胞PK-15细胞作用后,在PK-15细胞内能检测到STAT-1α蛋白表达,可观察到大部分细胞胞浆内有绿色荧光,但胞核内几乎无荧光,即STAT-1α主要定位在正常PK-15细胞的细胞浆内表达。【结论】制备获得的猪STAT-1α多克隆抗体特异性好,既能与原核细胞大肠杆菌(Rosetta)表达的STAT-1α反应,又能与真核细胞PK-15的STAT-1α发生反应。
- 李延生刘诚张珂李晓宁李晓泉尹珊谢琳娟何晓霞罗扬钟桃珍罗廷荣
- 关键词：原核表达多克隆抗体
