付霞霏
- 作品数：75 被引量：352H指数：11
- 供职机构：南方医科大学珠江医院更多>>
- 发文基金：广东省科技计划工业攻关项目国家自然科学基金广东省自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生文化科学生物学更多>>
- 人骨髓间充质干细胞来源外泌体分离、鉴定及卵巢摄取
- 2023年
- 目的提取及鉴定人骨髓间充质干细胞(hBMSC)来源外泌体,探讨颗粒细胞及自身免疫性早发性卵巢功能不全(POI)小鼠卵巢摄取外泌体的情况。方法取P3至P9代hBMSC培养上清液,倒置显微镜下观察P4代hBMSC细胞形态,超高速离心法提取外泌体;纳米流式仪测外泌体粒径;透射电镜观察外泌体形态;Western blot检测外泌体标志蛋白CD63、CD9、肿瘤易感基因(TSG)101表达。外泌体采用DiR进行荧光标记;共聚焦显微镜观察人卵巢颗粒细胞(KGN)共孵育24 h和48 h摄取外泌体的情况;用ZP3蛋白多肽构建自身免疫性POI小鼠模型,在建模成功后的第1、7天腹腔注射150µg DiR标记的外泌体。在第2次注射外泌体后的第14天通过活体成像仪监测小鼠卵巢摄取情况。结果hBMSC呈纺锤状,大小均一,提取出的外泌体平均直径为(81.12±17.23)nm。透射电镜显示外泌体结构为双层膜状;外泌体表面相关特异性蛋白CD63、CD9和TSG101呈阳性。共聚焦显微镜下观察到KGN细胞能够摄取外泌体,并与共孵育24 h比,48 h摄取的外泌体量更多。在自身免疫性POI小鼠模型中观察到小鼠卵巢部位有发光信号。结论本研究成功提取出hBMSC来源外泌体,并观察到KGN细胞及自身免疫性POI小鼠卵巢组织摄取外泌体。
- 杨雨涛王袁谢嘉欣付霞霏
- 关键词：间质干细胞外泌体超速离心法颗粒细胞
- 微RNA-21和Peli1在自身免疫性早发性卵巢功能不全小鼠体内的表达及意义
- 2022年
- 目的探讨miRNA-21和其靶基因Pellino-1(Peli1)在自身免疫性早发性卵巢功能不全(POI)模型小鼠体内的表达和意义。方法将24只雌性BALB/c小鼠随机均分为POI组和对照组(每组12只),分别予皮下注射透明带3(ZP3)多肽和生理盐水。通过卵泡计数、观察发情周期和检测血清雌二醇、卵泡刺激素(FSH)、抗米勒管激素(AMH)水平评估小鼠卵巢功能。采用ELISA测定血清炎症因子γ-干扰素、IL-10水平,流式细胞术分析脾脏调节性T细胞(Treg)比例,生物信息学预测miRNA-21的靶基因,qPCR检测外周血单个核细胞(PBMC)、卵巢组织中miRNA-21表达和PBMC、脾脏Treg中Peli1的mRNA表达。结果二次免疫6周后,POI组小鼠基本无发情期,而对照组小鼠发情周期均正常。POI组小鼠卵巢中各级卵泡的数量,血清雌二醇、AMH、IL-10水平,脾脏Treg比例,以及PBMC、卵巢组织中miRNA-21表达均低于对照组(P均<0.05),而血清FSH、γ-干扰素水平均高于对照组(P均<0.01)。生物信息学预测显示Peli1为miRNA-21的靶基因。POI组小鼠PBMC、脾脏Treg中Peli1的mRNA表达均低于对照组(P均<0.05)。结论miRNA-21和其靶基因Peli1在自身免疫性POI模型小鼠中的表达均降低,提示miRNA-21和Peli1可能参与自身免疫性POI的发病。
- 杨雨涛李欣然谢嘉欣王袁马闻擎付霞霏
- 关键词：自身免疫性
- 化疗性卵巢早衰动物模型及患者血清miR-21的水平变化
- 目的：通过检测化疗性卵巢早衰(chemotherapy-induced premature ovarian failure,CIPOF)大鼠动物模型及患者血清microRNA-21(miR-21)的水平,探讨miR-21...
- 付霞霏何援利王雪峰陈小莹李欣然王清
- 关键词：卵巢早衰化疗MIR-21
- 自身免疫性早发性卵巢功能不全患者血清免疫指标分析被引量：2
- 2022年
- 目的分析自身免疫性早发性卵巢功能不全(POI)患者血清免疫指标水平,筛选出较为特异的免疫性指标。方法选取46例自身免疫性POI患者(POI组)和46例健康女性(正常组),比较两组体液免疫指标、自身免疫指标、抗心磷脂综合征指标、甲状腺功能指标水平。结果与正常组比较,POI组孕产次、经期及月经周期减少,卵泡刺激素、黄体生成素升高,雌二醇、抗苗勒氏管激素降低;体液免疫指标κ轻链、λ轻链、免疫球蛋白G、免疫球蛋白M、免疫球蛋白E升高,补体4降低;抗心磷脂综合征指标抗心磷脂IgA抗体(ACA-IgA)、ACA-IgG、抗β2糖蛋白1 IgM抗体升高;甲状腺功能指标游离三碘甲状腺原氨酸、游离甲状腺素、促甲状腺素受体抗体、甲状腺过氧化物酶抗体升高(P<0.05),上述指标阳性率两组间比较差异有显著性(P<0.05)。POI组内与自身免疫指标阳性率比较,体液免疫指标阳性率和甲状腺功能指标阳性率差异均有显著性。结论自身免疫性POI患者血清体液免疫指标和甲状腺功能指标更容易发生异常。
- 陈依柔王袁谢嘉欣杨雨涛付霞霏
- 关键词：自身免疫自身抗体抗心磷脂抗体甲状腺功能
- 卵巢早衰及卵巢功能减退患者血清IL-21的水平变化被引量：13
- 2015年
- 目的探讨人外周血白细胞介素21(interleukin-21,IL-21)与卵巢早衰(premature ovarian failure,POF)及卵巢功能减退(decreased ovarian reserve,DOR)的发病是否相关。方法收集POF患者25例、DOR患者14例以及健康体检的育龄女性18例作为对照,采用放射免疫法检测血清IL-21水平,并与其他实验室指标进行相关性分析。结果 POF组和DOR组患者的血清IL-21水平较对照组明显升高,差异有统计学意义(F=4.971,P=0.010),POF组和DOR组患者的血清IL-21水平近似,差异无统计学意义(P>0.05)。IL-21分别与促卵泡激素(follicle stimulating hormone,FSH)、抗苗勒管激素(anti-miillerian hormone,AMH)呈正相关(r=0.389,P=0.003;r=0.275,P=0.040),IL-21分别与雌二醇(estradiol,E2)、平均卵巢体积(mena ovarian volume,MOV)呈负相关(r=-0.377,P=0.004;r=-0.271,P=0.042)。结论血清IL-21在POF患者中升高,而且在DOR患者中明显升高,并与卵巢储备功能相关,提示IL-21可能参与早期POF的发病过程,可望成为防治POF的新途径。
- 蔡慧华何援利付霞霏任旭雯
- 关键词：IL-21卵巢储备功能卵巢早衰
- 化疗性卵巢功能早衰动物模型及患者血清miR-21水平的变化被引量：4
- 2016年
- 目的检测化疗性卵巢功能早衰(CIPOF)大鼠动物模型及患者血清micro RNA-21(mi R-21)的水平,探讨mi R-21与CIPOF的发生是否存在相关性。方法采用腹腔注射环磷酰胺建立CIPOF动物模型,在建模后第1、15天尾静脉采血,QT-PCR法检测血清mi R-21水平,同时检测雌二醇(E2)及卵泡刺激素(FSH)水平、卵巢结构,并行相关性分析。收集2014年1月-2015年6月就诊的CIPOF患者30例,以及健康体检的育龄女性30例作为对照,检测血清mi R-21水平,同时与其他检测指标[黄体生成素(LH)、E2、FSH、泌乳素(PRL)]进行相关性分析。结果 CIPOF动物模型及患者血清mi R-21水平分别较对照组明显降低,差异有统计学意义(t=15.467,P=0.000;t=10.197,P=0.000)。动物模型中mi R-21分别与E2,始基、初级、次级及窦状卵泡数目呈正相关(r=0.750,P=0.000;r=0.403,P=0.006;r=0.704,P=0.000;r=0.783,P=0.000;r=0.849,P=0.000),与FSH呈负相关(r=–0.801,P=0.000)。临床患者中mi R-21与E2呈正相关(r=0.817,P=0.000),与FSH、LH呈负相关(r=–0.771,P=0.000;r=–0.784,P=0.000),与PRL无相关性(r=0.204,P=0.207)。结论在CIPOF动物模型及患者血清中mi R-21水平降低,与卵巢功能下降呈正相关,提示mi R-21可能参与CIPOF的发病过程,有望成为防治CIPOF的新靶点。
- 付霞霏何援利王雪峰陈小莹李欣然王清
- 关键词：微RNAS疾病模型
- 基于文献计量学分析炎症小体在妇科内分泌相关疾病中的研究现状
- 2024年
- 运用文献计量学和可视化技术分析炎症小体在妇科激素内分泌相关疾病中的研究现状和发展趋势。方法在Web of Science核心合集数据库中,检索2000年1月1日至2022年12月1日关于炎症小体作用于妇科激素内分泌相关疾病的英文文献。利用Excel、VOS-viewer、CiteSpace、bibliometric提取和分析年份、期刊、作者、机构、国家及关键词等信息。统计所收集文献的计量学特点,并且对这些文献做可视化分析。结果 共609篇文章发在341种不同的期刊上,首篇文献在2006年发表,2017-2021年为发表文章高峰期。来自49个国家中926个机构的3432位作者参与了文献的发表,其中中国(249篇)、美国(141篇)、德国(36篇)、日本(30篇)发文较多。迈阿密大学(30篇)是发文最多的机构。参与发文最多的3位作者分别是Zhang Y(19篇)、Beyer C(13篇)、Fan WT(8篇)。这些国家、机构、作者之间合作欠佳。2006年到2022年爆发出来的关键词是protein、beta、cytokine。结论:炎症小体在妇科激素内分泌相关疾病中的研究文献总体呈递增趋势。参与研究的国家、机构、作者众多,但各个国家、机构、作者之间的合作仍不够紧密,仍需进一步增强合作。
- 黄吾佳卓爱萍汤丽超谢嘉欣付霞霏
- 关键词：文献计量学可视化技术
- 过表达miR-21的骨髓间充质干细胞对化疗性卵巢早衰的修复作用被引量：8
- 2019年
- 目的探讨过表达miR-21的骨髓间充质干细胞(BMSCs)对化疗性卵巢早衰大鼠模型的修复作用。方法构建miR-21慢病毒表达载体(LV-miR-21),转染BMSCs构建miR-21-BMSCs。实验分为5组:正常组、模型组、miR-21组、BMSCs组、miR-21-BMSCs组,每组20只大鼠。大鼠腹腔内注射环磷酰胺(CTX)构建化疗性卵巢早衰大鼠模型。正常组及模型组大鼠双侧卵巢注射生理盐水,其余3组分别注射LV-miR-21、BMSCs、miR-21-BMSCs。检测各组大鼠动情周期、雌二醇(E_2)及卵泡刺激素(FSH)水平、卵巢重量及各级卵泡计数、卵巢颗粒细胞凋亡率。结果正常组大鼠动情周期不变,其余4组注射CTX后均出现动情周期紊乱,其中miR-21-BMSCs组恢复动情周期的大鼠数量明显多于其余3组。在注射CTX后30、45、60d,miR-21-BMSCs组卵巢重量及各级卵泡计数明显高于模型组、miR-21及BMSCs组(P<0.05);各组大鼠基础E_2、FSH水平差异无统计学意义,正常组大鼠E_2、FSH在实验期间无明显改变,其余4组大鼠E_2浓度下降、FSH浓度升高,miR-21-BMSCs组激素水平与miR-21组及BMSCs组相比差异均有统计学意义[E_2:F_(30d)=43.10,F_(45d)=43.57,F_(60d)=44.98,P<0.05;FSH:F_(30d)=14.71,F_(45d)=13.16,F_(60d)=15.20,P<0.05)];与模型组、miR-21组、BMSCs组相比,miR-21-BMSCs组颗粒细胞凋亡率明显下降(F_(15d)=27.20,F_(30d)=23.60,F_(45d)=21.80,F_(60d)=21.20,P<0.05)。结论 miR-21能增强BMSCs对化疗性卵巢早衰的治疗作用,显著减轻卵巢结构及功能损伤。
- 汪庆如陈小莹李欣然王清付霞霏
- 关键词：MIR-21骨髓间充质干细胞卵巢早衰卵巢颗粒细胞
- 骨髓间充质干细胞对磷酰胺氮芥诱导卵巢颗粒细胞凋亡的保护作用被引量：2
- 2009年
- 目的探讨骨髓间充质干细胞(MSCs)对磷酰胺氮芥诱导卵巢颗粒细胞凋亡的保护作用及可能机制。方法分离培养雌性Wistar大鼠卵巢颗粒细胞,加入磷酰胺氮芥(30μmol/L)至培养的颗粒细胞中,再与MSCs以不同比例共培养72h。实验分为4组:①颗粒细胞单独培养组(对照组);②共培养组1,MSCs∶颗粒细胞=1∶1;③共培养组2,MSCs∶颗粒细胞=1∶5;④共培养组3,MSCs∶颗粒细胞=1∶10。采用AnnexinⅤ检测凋亡率;采用蛋白质免疫印迹法检测凋亡相关蛋白Bcl-2和Bax的变化,ELISA法检测MSCs培养基中血管内皮生长因子(VEGF)、肝细胞生长因子(HGF)、胰岛素样生长因子-1(IGF-1)的浓度。结果对照组化疗药物引起的卵巢颗粒细胞凋亡率为35.04%±5.75%,而共培养组1、2、3的凋亡率分别为12.80%±2.42%,13.94%±3.86%,22.31%±5.67%,与对照组比较差异均有统计学意义(P<0.05)。蛋白质免疫印迹显示与MSCs共培养后,颗粒细胞Bcl-2表达水平明显增高(P<0.05),Bax表达水平无明显变化(P>0.05)。MSCs能分泌VEGF、HGF和IGF-1。结论MSCs对体外化疗药物诱导的卵巢颗粒细胞的凋亡有保护作用,其作用机制可能是其分泌的细胞因子通过旁分泌途径发挥作用,以及Bcl-2在颗粒细胞中表达上调有关。
- 付霞霏何援利
- 关键词：间质干细胞粒层细胞药物疗法细胞凋亡
- 单纯激素替代治疗卵巢早衰成功自然妊娠1例被引量：1
- 2016年
- 患者,女,27岁,因月经周期缩短3月余,于2014年9月13日在本院门诊就诊。患者既往月经规律,初潮13岁,3~4 d/28~30 d,经量中等。2014年6月无明显诱因出现月经周期缩短,缩短至15 d,月经量无明显改变,无痛经,无明显潮热、烦躁、失眠等不适。患者既往无腮腺炎病史,无手术、放疗、化疗史,家族史无特殊。
- 陈小莹付霞霏何援利
- 关键词：激素替代治疗自然妊娠卵巢早衰经量环丙孕酮
