乔生军
- 作品数:4 被引量:28H指数:3
- 供职机构:上海市肿瘤研究所更多>>
- 发文基金:上海市科学技术发展基金上海市科学技术委员会资助项目更多>>
- 相关领域:医药卫生更多>>
- 蓖麻毒素A链蛋白的表达、活性及其对人肺腺癌细胞SPC的毒性作用被引量:7
- 2000年
- 目的 :研究构建重组单链免疫毒素 ,对人体肿瘤进行导向治疗。方法 :采用PCR方法从克隆化载体中拉出蓖麻毒素A链 (ricinA)基因 ,装入经过改建的pTSA 18F表达载体 ,进行目的基因DNA序列分析后导入E .coliBL2 1(DE3)中进行表达 ,表达产物进行SDS PAGE和Westernblot检查 ,表达产物的生物活性通过RNAN 糖苷酶活性检查、无细胞体系中对蛋白质生物合成的抑制以及对肿瘤细胞的毒性作用来分析。结果 :SDS PAGE检查表明 ,转化子E .coliBL2 1(DE3) (pTSRA)中出现 1条Mr约 30× 10 3 大小、较空载体对照E .coliBL2 1(DE3) (pTS)明显浓黑的条带 ;Westernblot检查表明 ,转化子E .coliBL2 1(DE3) (pTSRA)中有杂交条带出现 ,而E .coliBL2 1(DE3) (pTS)中没有 ;表达蓖麻毒素A链蛋白能够特异地作用于大鼠肝 2 8S核糖体RNA ,使其产生约 45 0nt大小的核酸片段 ;对无细胞体系中蛋白质生物合成的IC50 为 3 7× 10 -9mol/L ,略高于天然蓖麻毒蛋白 ;具有与天然蓖麻毒蛋白相近的肿瘤细胞毒性。结论 :蓖麻毒素A链基因在转化子E .coliBL2 1(DE3) (pTSRA)中获得表达 ,表达产物具有与天然蓖麻毒蛋白相近的RNAN 糖苷酶活性 ,在无细胞体系中对蛋白质生物合成具有抑制作用 。
- 乔生军莫忠根林琳
- 关键词:蓖麻毒素A链肺腺癌SPC基因表达
- 天花粉(TCS)-5A_((10)2)免疫毒素裸鼠体内的导向抑瘤作用被引量:2
- 1999年
- 乔生军莫忠根李斯德
- 关键词:裸鼠
- 天花粉-5A(10)2免疫毒素的形成及其对人肺腺癌细胞SPC体外导向杀伤作用的研究被引量:6
- 1998年
- 目的通过化学交联形成天花粉┐5A(10)2免疫毒素,对人肺腺癌细胞SPC进行导向杀伤作用的研究。方法天花粉毒蛋白与2┐IT(iminothiolane,2┐亚氨基四氢噻吩)作用、抗人肺腺癌单抗5A(10)2与SPDP(N┐succinimidyl┐3┐[2┐pyridyldithio]propionate,N┐琥铂酰亚胺┐3┐[2┐吡啶二硫]┐丙酸酯)作用,分别导入巯基(┐SH)和2┐吡啶二硫丙酰(PDP,2┐[pyridyldithio]propionate)基,通过天花粉分子中引入的┐SH与5A(10)2分子中引入的PDP作用将天花粉与5A(10)2单抗连接在一起,形成免疫毒素分子。结果体外细胞毒实验表明,天花粉┐5A(10)2免疫毒素对SPC的杀伤作用比游离天花粉至少高6~7倍,而对肝癌细胞7721的杀伤作用与游离天花粉相近。结论证明天花粉┐5A(10)2免疫毒素在体外对靶细胞SPC具有导向杀伤作用。
- 乔生军莫忠根沈翠英李斯德
- 关键词:免疫毒素腺癌天花粉
- 外周血循环中肺癌细胞的流式细胞仪定量分析被引量:14
- 2000年
- 目的 运用流式细胞仪定量分析外周血循环中肺癌细胞。方法 外周血经Ficoll梯度离心分离单核细胞组分,后者用CD45、细胞角蛋白(CK)及肺癌特异性单抗(2F7/S5A)染色后,应用流式细胞仪检测CD45- CK+ 2F7/S5A+ 细胞。然后计算每升血中上述细胞含量。结果 (1)外周血单核细胞的表型为CD45+ CK- 2F7/S5A- ,而小细胞和非小细胞肺癌细胞系均为CD45- CK+ 2F7/S5A+ 。因此,应用此方法能从106 白细胞中检测到1个肺癌细胞,敏感性达到每毫升血中检测到5 个肺癌细胞;(2)15 例正常人及7 例肺部良性疾患外周血中CD45- CK+ 2F7/S5A+ 细胞均为阴性,而40例肺癌患者外周血14 例发现阳性细胞,阳性率达35 % ,阳性细胞含量平均为1×105 /L。结论 本方法具有较好的敏感性和特异性。
- 董强刚江晓丰沙慧芳李鲁萍乔生军许凯黎
- 关键词:肺癌外周血流式细胞仪