乐云仙
- 作品数：10 被引量：73H指数：4
- 供职机构：复旦大学生命科学学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家教育部博士点基金更多>>
- 相关领域：农业科学生物学更多>>
- 用单克隆抗体结合酶联免疫吸附试验检测棉铃虫幼虫体内的核多角体病毒被引量：2
- 1995年
- 在常规ＥＬＩＳＡ间接法的基础上，应用单克隆抗体检测感染棉铃虫核型多角体病毒的棉铃虫幼虫体内病毒粒子。３龄幼虫饲喂表层涂有ＨａＮＰＶ人工饲料后９小时，即可在幼虫抽提液中检出病毒粒子抗原，而典型病虫显症需５～６天后才出现。因此本法是一种灵敏、快速、特异性强的检测昆虫杆状病毒的方法。利用单克隆抗体结合ＥＬＩＳＡ试验分别检测来自江苏和山东不同地区棉田自然死亡的棉铃虫幼虫，表明在江苏和山东不同棉区均可检测到ＨａＮＰＶ病毒粒子。
- 陆自强胡广淦陈丽芳杨峰杭三保乐云仙苏德明
- 关键词：棉铃虫核型多角体病毒
- 棉铃虫质型多角体病毒 A B 两种类型体外复制特性的比较研究
- 1997年
- 分析比较了棉铃虫质型多角体病毒江苏株Ａ、Ｂ两种类型的离体复制特性。ＨａＣＰＶ－Ａ型（ＣＰＶ１４型）病毒可在多种昆虫细胞系中复制，而Ｂ型病毒只能在同源细胞系中增殖；Ａ型病毒的感染率和细胞内游离病毒粒子的滴度均高于Ｂ型病毒；感染细胞持续传代表明，ＨａＣＰＶ－Ａ型病毒感染的ＨＡ－８３１细胞在连续传代７次后，感染率从最初的１０．６％上升到８０％以上，反之，Ｂ型病毒感染的细胞，传代９次后已不能形成典型的多角体。同时，我们还率先成功地建立了ＣＰＶ的空斑测定技术，并初步尝试了混合型ＨａＣＰＶ的分离纯化。
- 沈中建王久存乐云仙苏德明
- 关键词：昆虫病毒棉铃虫质型多角体病毒
- 棉铃虫单粒包埋型核型多角体病毒(HaSNPV)复制的研究——Ⅰ.细胞病理学和病毒复制的一些特性被引量：4
- 1993年
- 本文报道了棉铃虫单粒包埋型核型多角体病毒(Heliothis armigera single nucleocapsid nuclear polyhedrosis virus, HaSNPV)在棉铃虫及棉铃虫蛹卵巢细胞系SFE-HA-8212中的复制。HaSNPV的复制和其他的核型多角体病毒大体相符,复制过程也可分为形成出芽型病毒与形成包埋型病毒这两个时相。研究了影响病毒在细胞中复制的诸因素,包括病毒感染复数、细胞接种密度和细胞生长阶段等。在适宜的条件下平均每细胞可生产出芽型病毒14PFU,多角体24个。生成的病毒具有感染力。这些表明SFE-HA-8212细胞可供HaSNPV有效复制。同时,作为细胞群体该细胞系对HaSNPV感染的反应并非均一,其中有89.65±21.4％的感染细胞释放病毒,但仅有37.85±6.7％的细胞形成多角体。表明HaSNPV的感染并不一定导致形成多角体,在大部分感染细胞中病毒复制进行到产生病毒粒子就停止了。初步讨论了这种不均一性的原因。
- 钟江乐云仙苏德明
- 关键词：棉铃虫核多角体病毒
- 重组家蚕核多角体病毒（rBmNPV）的复制及所载HuIFN－α基因的表达被引量：4
- 1995年
- 报道了重组家蚕核多角体病毒（ＢｏｍｂｙｘｍｏｒｉｎｕｃｌｅａｒＰｏｌｙｈｅｄｒｏｓｉｓＶｉｒｕｓＢｍＮＰＶ）在家蚕细胞ＢｍＮ中复制的细胞病理学变化，除了不形成多角体以外，与野生型病毒相同．研究了病毒感染复数、细胞接种密度和细胞生长阶段对重组病毒复制和α－干扰素（ＩＦＮ－α）表达量的影响．在一定低感染复数时，α－干扰素的产量较高．对于重组病毒的复制，最适的细胞接种密度为３．６～７．０×１０５细胞／瓶．在细胞指数生长前期（４８～６０ｈ）接种重组病毒，对于获得较高的重组病毒复制效价和α－干扰素的产量都是有利的．
- 邓小昭张林元于明明李光富刁振宇钟江乐云仙陈宜峰
- 关键词：家蚕核型多角体病毒基因表达
- 中国对虾一种杆状病毒的ELISA检测方法被引量：51
- 1995年
- 从患暴发性传染病的中国对虾组织中分离了一种病毒，经差速离心、密度梯度离心及Ｓｈｅｐｈａｒｏｓｅ２Ｂ柱层析纯化了一种形状为杆状的病毒。提纯病毒核酸电泳为一条带，分子量为２０ｋｂ。将提纯病毒免疫新西兰兔获得较高效价的抗血清并初步建立了酶联免疫吸附测定（ＥＬＩＳＡ）检测方法。可在六小时内完成对样品的检测，检测灵敏度达６０纳克（ｎｇ）。
- 涂小林钟江高双诚王颖乐云仙朱学宝
- 关键词：对虾杆状病毒酶联免疫吸附ELISA
- 油桐尺蠖核型和木(木尞)尺蠖核型多角体病毒的限制性内切酶分析
- 1990年
- 油桐尺蠖核型多角体病毒(BsNPV)、木(木尞)尺蠖核型多角体病毒(CpNPV)和用CpNPV感染油桐尺蠖幼虫面得到的病毒CpNPV-Bs,三者经HaeⅢ酶解后的电泳图谱均一致,经HindⅢ酶解后,均获得11条片段。各病毒DNA的总分子量约为57.5×10~6D。本文初步认为BsNPV和CpNPV为同一种病毒。
- 吕招来胡萃钟江乐云仙
- 关键词：尺蠖DNA内切酶病毒
- 马尾松毛虫质型多角体病毒在昆虫细胞系中的离体增殖研究被引量：8
- 1994年
- 本文报道了马尾松毛虫质型多角体病毒（简称ＤｐＣＰＶ）在５株昆虫细胞系，即棉铃虫卵巢细胞系ＳＦＥ－ＨＡ－８３１与ＳＦＥ－ＨＡ－８２１２、家蚕细胞系Ｂｍ－Ｎ、粉纹夜蛾细胞系ＴＮ－３６８和草地贪夜蛾细胞系Ｓｆ－２１中的增殖。证明ＤｐＣＰＶ可在ＳＦＥ－ＨＡ－８３１、ＳＦＥ－ＨＡ－８２１２、ＴＮ－３６８和Ｓｆ－２１４株细胞系中增殖。其中ＳＦＦ－ＨＡ－８３１细胞能同时复制几种型混合的ＤｐＣＰＶ；细胞的感染率在２０％－３５％左右，每个感染细胞约可产生５０－１００个多角体；感染细胞己传代２０次以上；离体和活体增殖的病毒的形态、感染力和核酸带谱等特征均保持稳定。
- 沈中建乐云仙陈梅琴苏德明
- 关键词：马尾松毛虫多角体病毒增殖
- 棉铃虫单粒包埋核型多角体病毒在细胞系中持续感染的建立和特性被引量：1
- 2000年
- 棉铃虫单粒包埋核型多角体病毒 (Helicoverpaarmigerasinglenucleocapsidnucleopolyhedrovirus,HaSNPV)能够在棉铃虫蛹卵巢细胞素SFE -HA - 82 12中有效复制 ,引起细胞解体死亡。通过培养HaSNPV感染后残存的细胞 ,建立了一株持续感染的细胞。该细胞在传代培养的 6个月时间内 (约 2 5次传代 ) ,持续地释放有感染力的病毒粒子 ,培养液中病毒的效价多在 10 4 TCID50 /ml上下 ,同时有一小部分细胞 (1%左右 )中形成多角体 ,释放病毒的细胞占总细胞数的 1 0 %～ 3 8%。持续感染细胞的生长特性与原细胞系相比有一定的变化 ,对HaSNPV感染的敏感性有所降低。另一方面 ,持续感染细胞所释放的病毒对SFE -HA - 82 12及棉铃虫幼虫的感染力也有所降低。讨论了持续感染的可能机制。
- 钟江乐云仙苏德明
- 关键词：核型多角体病毒细胞培养杆状病毒
- 单克隆抗体技术在昆虫病毒研究中的应用被引量：4
- 1993年
- 本文论述了国内外昆虫病毒单克隆抗体方面的研究进展。着重介绍了单克隆抗体技术在昆虫病毒抗原结构分析、昆虫病毒的鉴定和分类、检测,病毒感染昆虫细胞机理,及昆虫病毒分子生物学研究方面的应用情况。
- 胡广淦陆自强杭三保张凌乐云仙
- 关键词：昆虫病毒单克隆抗体
- 棉铃虫单粒包埋核型多角体病毒粒子单克隆抗体及抗原特性分析
- 1993年
- 经多角体碱溶超离心和柱层析纯化的棉铃虫单粒包埋核型多角体病毒(HaSNPV)粒子作为抗原,通过细胞融合,得到3株分泌抗HaSNPV单克隆抗体的杂交瘤细胞D_2、B_8和D_7,相应抗体的效价MAD_2为10,MAB_8为50,MAD_7为1000。其中MAB_8为构象决定簇抗体,MAD_2和MAD_7为顺序决定簇抗体。用SDS-PAGE,Western-blot和ELISA方法确定MAD_2对应的抗原决定簇多肽大小为56kd和96kd,MAD_7对应56kd多肽。在不同病毒株系鉴别中发现MAD_2,MAD_8为HaSNPV特异,而MAD_7则对大袋蛾单粒包埋核型多角体病毒(CvNPV)发生交叉反应。另外用ELISA法检测了HaSNPV在体外细胞系统中的增殖动态。
- 姜成张菁钟江乐云仙陆自强胡广淦杭三保
- 关键词：棉铃虫单克隆抗体多角体病毒
