龙仙萍
- 作品数：80 被引量：160H指数：6
- 供职机构：遵义医学院附属医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金贵州省国际科技合作计划贵州省科学技术基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学农业科学更多>>
- 腺病毒载体介导hRAMP1调节兔颈动脉球囊损伤后炎症细胞因子表达对增生内膜的影响
- 龙仙萍石蓓
- 酒精性心肌病模型大鼠缝隙连接蛋白异常表达的机制被引量：1
- 2017年
- 目的探讨缝隙连接蛋白(Cx)异常表达在酒精性心肌病大鼠发病中的作用。方法 50只清洁级SD大鼠随机分为对照组、模型组、U0126低剂量、中剂量和高剂量组(n=10)。采用4.0%乙醇(1次/d,持续12 w)复制酒精性心肌病模型,分析U0126治疗后各组大鼠心功能变化及Cx的表达变化。结果酒精性心肌病大鼠心功能及左心室指数和心脏指数存在明显异常,且U0126能够有效改善大鼠心功能和异常的心脏指数(P<0.05);血清Cx40、Cx43和Cx45蛋白表达明显降低(P<0.01),而Ras、Raf、MEK、ERK1/2、基质金属蛋白酶(MMP)2、MMP9和MMP10的表达明显升高,U0126能有效恢复上述蛋白的异常表达(P<0.05)。结论大鼠酒精性心肌病的发病过程与Cx及MMPs异常表达有关,且可能是药物治疗的靶点。
- 王冬梅赵然尊石蓓徐娟龙仙萍
- 关键词：酒精性心肌病缝隙连接蛋白基质金属蛋白酶
- 降钙素基因相关肽对血管平滑肌细胞心肌素表达及细胞表型改变的作用被引量：2
- 2015年
- 目的:研究降钙素基因相关肽(CGRP)对血管平滑肌细胞(VSMCs)心肌素表达的影响及对细胞表型改变的调节作用。方法:取大鼠胸主动脉,以组织块贴壁培养法获得VSMCs,分为对照组、血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)组(加入AngⅡ处理)、CGRP组(加入AngⅡ和CGRP处理)和CGRP8-37组(在AngⅡ和CGRP基础上加入CGRP8-37)。Western blot法检测VSMCs中心肌素及细胞表型标志蛋白α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)和骨桥蛋白(OPN)表达情况。结果:在VSMCs培养中,细胞心肌素表达水平随着培养时间延长逐渐降低,细胞培养48 h和72h时心肌素表达水平较基线水平显著降低(P<0.05);而加入CGRP处理后,心肌素表达水平逐渐增加,与基线水平比较,加入CGRP培养后48 h和72 h时细胞心肌素水平显著增加(P<0.05)。同时,在VSMCs培养48 h时,AngⅡ组细胞心肌素水平较对照组下降(P<0.05),且α-SMA表达亦相应下降(P<0.05),而OPN表达水平显著增加(P<0.05);CGRP组VSMCs心肌素水平较AngⅡ组增加,伴随着α-SMA表达水平增加(P<0.05),相反地OPN表达水平下降(P<0.05);CGRP8-37组心肌素和α-SMA表达水平较CGRP+AngⅡ组降低(P<0.05),而OPN表达较CGRP组增加(P<0.05)。结论:CGRP通过促进VSMCs心肌素的表达而抑制细胞表型转换,使细胞维持收缩表型,且这一作用是CGRP通过与其受体结合后实现的。
- 龙仙萍邓文文汪松王冬梅盛瑾石蓓赵然尊
- 关键词：血管平滑肌细胞降钙素基因相关肽心肌素表型改变
- 成年小鼠心脏干细胞的体外分离及表型鉴定
- 2013年
- 目的建立稳定的小鼠心脏干细胞(cardiac stem cells,CSCs)分离方法,并对体外培养的CSCs进行生物学特性鉴定。方法选用健康成年CD1小鼠,在无菌条件下取心脏并剪碎,并用II型胶原酶和胰蛋白酶反复消化,采用差速离心法去除混合细胞悬液中的心肌细胞,结合免疫磁珠分选法纯化c-kit+CSCs后,进行流式细胞仪表面标记鉴定。结果酶消化法和磁珠分选法结合成功分离并纯化了成年小鼠c-kit+CSCs。磁珠分选前,流式细胞仪表面标记鉴定c-kit+CD34-CSCs为4.62%;经磁珠分选后c-kit+CD34-CSCs可达70.23%。结论酶消化法结合磁珠分选法能成功分离纯化成年小鼠c-kit+CSCs,且能用于后续体外培养。体外培养时c-kit+CSCs相对于其它表型标记的心脏干细胞更加稳定,具有较强的扩增能力。相对于心脏组织块培养法,酶消化法可在短期内获得高纯度的c-kit+CSCs,更有助于心脏干细胞相关信号通道的体外实验研究。
- 邓文文赵然尊龙仙萍石蓓
- 关键词：心脏干细胞细胞分离酶消化法小鼠
- 腺病毒载体介导hRAMP1调节兔颈动脉球囊损伤后炎症细胞因子表达对增生内膜的影响
- 2012年
- 目的探讨腺病毒载体介导人受体活性修饰蛋白-1(receptor activity modifying protein-1,hRAMP1)基因对兔颈动脉粥样硬化并球囊成形术后炎性细胞因子表达的影响。方法建立兔动脉粥样硬化狭窄模型并行球囊损伤血管(简称血管成形术),随机抽样分为RAMP1组(n=18)和对照组(n=18),经球囊局部注射携带hRAMP1基因腺病毒载体(pAd2-GFP-RAMP1)或PBS,于注射后7、14 d和28 d,应用ELISA法检测肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和C-反应蛋白(CRP)表达水平;Western blot检测局部hRAMP1目的基因表达;免疫组织化学染色测定血管局部TNF-α表达,HE染色检测血管形态学。结果血管成形术后不同时间点TNF-α表达增加[7 d:(74.13±4.99),14 d:(93.40±6.69),28 d:(67.46±6.57)],外源hRAMP1注射后TNF-α表达下降[7 d:(64.95±6.77),14 d:(75.29±4.73),28 d:(45.08±5.00),P<0.05],病毒注射后7 d和14 d RAMP1组CRP水平[7 d:(29.27±1.57),14 d:(9.68±1.60)]与对照组比较[7 d:(43.96±7.88),14 d:(13.51±1.68)]显著下降(P<0.05),28 d 2组间无差异性;腺病毒注射后28 d损伤血管局部仍检测到hRAMP1蛋白表达,同时RAMP1组局部TNF-α表达与对照组比较明显下降,HE染色显示:RAMP1组新生内膜面积[7 d:(0.07±0.18),14 d:(0.15±0.05),28 d:(0.35±0.05)]与对照组[7 d:(0.14±0.02),14 d:(0.39±0.09),28 d:(0.56±0.05]比较明显降低(P<0.05)。结论外源hRAMP1基因调节兔动脉粥样硬化并血管成形术后CRP和TNF-α的表达,抑制血管成形术后再狭窄。
- 龙仙萍石蓓赵然尊许官学崔璨喻田
- 关键词：炎症细胞因子血管成形术
- 心外膜脂肪体积及血清基质金属蛋白酶-2与冠状动脉粥样硬化斑块稳定性的关系被引量：5
- 2018年
- 目的探讨心外膜脂肪体积(EATV)及血清基质金属蛋白酶-2(MMP-2)与冠状动脉粥样硬化斑块稳定的相关性。方法选择冠心病126例(冠心病组),根据疾病类型分为稳定型心绞痛(SA)46例、不稳定型心绞痛(UA)49例和急性心肌梗死(AMI)31例;按照斑块稳定类型分为稳定型46例和不稳定型80例;根据斑块成分分为软斑块40例、混合斑块39例和钙化斑块47例。另外选择同期性别、年龄匹配无器质性心脏病的室上性心动过速患者72例作为对照组。检测各类患者EATV和血清MMP-2水平,分析冠心病患者EATV和MMP-2的相关性。结果与对照组比较,冠心病组EATV增大,血清MMP-2水平升高(P均<0.05)。与稳定型斑块患者相比,不稳定型斑块患者EATV增大,血清MMP-2水平升高(P均<0.05)。SA、UA、AMI患者EATV逐渐增大,血清MMP-2水平逐渐升高,软斑块,混合斑块、钙化斑块患者逐渐EATV增大,血清MMP-2水平逐渐升高,差异均有统计学意义(P均<0.05)。Pearson相关性分析显示,冠心病患者EATV大小与血清MMP-2水平呈正相关(r=0.752,P=0.019)。结论冠心病患者EATV增大,血清MMP-2水平升高,且EATV增大及血清MMP-2水平升高程度与冠心病的类型、斑块稳定性及斑块成分密切相关。
- 郝星龙仙萍王正龙刘西平石蓓陈文明
- 关键词：冠状动脉疾病基质金属蛋白酶-2冠状动脉粥样硬化斑块
- 吴茱萸次碱对氧化应激诱导血管平滑肌细胞增殖和一氧化氮合酶的影响被引量：5
- 2016年
- 目的观察氧化应激对吴茱萸次碱作用血管平滑肌细胞增殖和一氧化氮合酶(NOS)的影响。方法血管平滑肌细胞分空白组、二甲基亚砜组、药物A组(吴茱萸次碱0.4μmol/L)、药物B组(吴茱萸次碱1μmol/L)、药物C组(吴茱萸次碱4μmol/L),后4组药物刺激2h后,加入过氧化氢诱导氧化应激损伤,24h后检测细胞增殖率、活性氧、丙二醛、超氧化物歧化酶(SOD)、内皮型NOS(eNOS)、诱导型NOS(iNOS)mRNA和蛋白表达。结果与空白组比较,二甲基亚砜组细胞增殖率明显升高[(104.48±4.89)%vs(94.58±1.87)%,P<0.05],活性氧和丙二醛明显升高,SOD明显下降[(82.55±17.31)U/mg vs(111.76±18.25)U/mg,P<0.05]。与二甲基亚砜组比较,药物A组、药物B组、药物C组细胞增殖率、活性氧和丙二醛明显下降,药物B组、药物C组SOD明显升高(P<0.05);药物A组、药物B组、药物C组iNOS mRNA和蛋白表达明显下降,eNOS mRNA和蛋白表达明显升高(P<0.05)。结论吴茱萸次碱在氧化应激状态下能抑制平滑肌细胞增殖、抗氧化、维持NOS相对稳定。
- 马懿石蓓龙仙萍龚勋莫颖莉夏皓黄兆辉吴赛珠
- 关键词：吴茱萸碱氧化性应激
- 降钙素基因相关肽抑制动脉损伤后NF-κB表达及其对新生内膜增殖的作用被引量：2
- 2014年
- 目的通过降钙素基因相关肽(calcitonin gene related peptide,CGRP)处理血管平滑肌细胞(vascular smooth muscle cells,VSMCs)和颈动脉损伤大鼠模型,探讨NF-κB在CGRP调节VSMCs表型改变和动脉损伤后新生内膜增殖中的作用。方法建立颈动脉损伤大鼠模型,并分为对照组和CGRP组(n=24),通过HE染色观察新生内膜形成情况,并Western blot检测两组动物损伤动脉中NF-κB p65蛋白表达情况。以组织块贴壁培养法获得VSMCs,并分为对照组、IL-1β组(给予IL-1β处理)、CGRP组(给予IL-1β+CGRP处理)和CGRP8-37组(在IL-1β+CGRP基础上,加CGRP8-37)(n=24),Western blot法检测细胞内NF-κB p65蛋白和细胞表型标志蛋白表达变化,MTT法检测细胞增殖能力。结果①对照组大鼠的颈动脉损伤后7 d时新生内膜明显增加,至28 d时基本稳定,而CGRP组7 d和28 d时新生内膜面积较对照组同时间点显著降低[7d:(2.09±0.26)vs(3.76±0.33);14 d:(3.52±0.41)vs(6.38±0.61),P<0.05];且与对照组比较,CGRP组1周时NF-κB p65蛋白表达水平明显降低(P<0.05),而28 d时两组NF-κB p65表达水平无差异(P>0.05)。②在体外培养VSMCs中,IL-1β处理显著激活细胞NF-κB p65蛋白表达(P<0.05),伴随着VSMCs收缩表现标志蛋白SMα-actin表达减少和OPN表达增加(P<0.05);同时再给予CGRP处理后,则显著减弱IL-1β诱导的NF-κB p65蛋白表达(P<0.05),且使VSMCs合成表现标志蛋白OPN表达减少。RT-PCR分析获得相一致的结果。同时,CGRP显著抑制IL-1β引起的VSMCs增殖。③CGRP受体阻断剂CGRP8-37可以阻断CGRP减弱IL-1β诱导的NF-κB p65蛋白表达作用,并抑制CGRP对VSMC表达蛋白调节作用。结论 CGRP与受体结合后抑制NF-κB激活,促进VSMCs分化标志基因表达,从而抑制细胞增殖,降低动脉损伤后新生内膜增殖,这对于防治动脉粥样硬化和血管成形术后再狭窄可能具有重要应用价值。
- 赵然尊龙仙萍刘志江盛瑾王冬梅石蓓
- 关键词：表型改变降钙素基因相关肽核因子-ΚB
- 军团菌肺炎并发尿崩症1例
- 2014年
- 军团菌广泛存在于自然界水源中,感染后主要引起肺炎和肺外器官损害,临床表现各异,目前世界多个国家和地区均有军团菌病的报道,但军团菌肺炎并发尿崩症目前国内外文献尚少见报道。本院收治1例,现报告如下。
- 汪松雷乾兰龙仙萍段海真喻安永肖雪
- 关键词：军团菌肺炎尿崩症
- 院内急危重症转运途中意外死亡研究被引量：23
- 2011年
- 院内转运各类急危重患者是急诊工作重要的组成部分，如何避免转运及不合理的治疗给患者带来伤害，减少不良事件的发生，值得广大医务人员重视。现就遵义医学院附属医院院内转运过程中出现心搏呼吸骤停抢救无效死亡的63例患者情况总结分析如下。
- 汪松肖雪龙仙萍喻安永蒋德玉
- 关键词：转运途中急危重症急危重患者心搏呼吸骤停急诊工作院内转运
