黄清
- 作品数:8 被引量:5H指数:2
- 供职机构:河南省动物疫病预防控制中心更多>>
- 发文基金:河南省科技攻关计划更多>>
- 相关领域:农业科学生物学更多>>
- 高致病性猪蓝耳病发病新特征、疫苗免疫及综合防控措施探讨
- 高致病性猪蓝耳病是由猪繁殖与呼吸综合征病毒变异株引起的一种急性高致死性猪的传染性疫病。仔猪发病率可达100%、死亡率可达50%以上,母猪流产率可达30%以上,育肥猪也可发病死亡是其特征。2006年6月首先在我国的南方部分...
- 闫若潜吴志明张志凌张健刘梅芬黄清
- 文献传递
- 猪白细胞介素-2的原核表达及其生物学活性研究被引量:2
- 2009年
- 本研究采用RT-PCR方法自刀豆素(Con A)刺激的猪外周血淋巴细胞总RNA中扩增克隆了猪白细胞介素-2(por-cine interleutin-2,PoIL-2)成熟肽基因,并亚克隆入pQE30载体进行原核表达,对表达的融合重组猪白细胞介素-2(rPoIL-2)蛋白通过尿素变性、低浓度复性液复性、PBS溶液透析等步骤进行纯化,采用MTT法测定rPoIL-2蛋白促小鼠细胞毒性淋巴样系CTLL-2株细胞增殖活性以评价rPoIL-2的活性。结果表明,成功克隆了rPoIL-2的成熟肽基因,基因全长405 bp,编码134个氨基酸;表达的rPoIFN-α蛋白分子质量大小约为16.5 ku,与预期大小相一致;经纯化后的蛋白质纯度在96%以上;纯化的rPoIL-2蛋白促小鼠CTLL-2株细胞增殖活性最高值是对照细胞的3倍。本研究成功表达了具有生物学活性的PoIL-2蛋白,为新型基因工程抗病毒制剂和免疫增强剂的开发奠定了基础。
- 吴志明闫若潜谢彩华刘梅芬刘光辉黄清
- 关键词:猪白细胞介素2原核表达纯化活性
- 猪圆环病毒2型ORF2/猪白介素2嵌合基因真核表达载体的构建、表达及在动物体内免疫效果研究
- 为了研究猪圆环病毒2型(PCV2)核酸疫苗,本研究采用重叠延伸PCR(splicing by overlap extension-PCR,SOE -PCR)方法通过一基因柔性接头(linker)将PCV2的ORF2全长基...
- 吴志明闫若潜贾松涛张志凌张健黄清
- 关键词:猪圆环病毒2型嵌合基因核酸疫苗
- 文献传递
- 高致病性猪蓝耳病发病新特征、疫苗免疫及综合防控措施探讨
- 高致病性猪蓝耳病是由猪繁殖与呼吸综合征病毒变异株引起的一种急性高致死性猪的传染性疫病。仔猪发病率可达100%、死亡率可达50%以上,母猪流产率可达30%以上,育肥猪也可发病死亡是其特征。本文就该病的最新发病特点、综合防控...
- 闫若潜吴志明张志凌张健刘梅芬黄清
- 关键词:猪蓝耳病发病机制疫苗免疫
- 文献传递
- 鸡α干扰素基因的原核表达及其抗病毒活性研究
- 前言鸡的病毒性疾病对养鸡业危害巨大,当前缺乏高效广谱的抗病毒药物可用;α干扰素(IFN-α)具有广谱的抗病毒、抗肿瘤和免疫调节活性。为了研制高效、广谱、无残留、不产生耐药性的基因工程抗病毒药物,本研究进行了鸡α干扰素基因...
- 张志凌闫若潜刘光辉刘梅芬黄清
- 关键词:Α干扰素原核表达抗病毒活性病毒性疾病生物学活性
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- 高致病性猪蓝耳病发病新特征、疫苗免疫及综合防控措施探讨
- 高致病性猪蓝耳病是由猪繁殖与呼吸综合征病毒变异株引起的一种急性高致死性猪的传染性疫病。仔猪发病率可达100%、死亡率可达50%以上,母猪流产率可达30%以上,育肥猪也可发病死亡是其特征。2006年6月首先在我国的南方部分...
- 闫若潜吴志明张志凌张健刘梅芬黄清
- 关键词:高致病性猪蓝耳病细菌性疾病疫苗免疫猪蓝耳病病毒综合防控措施
- 文献传递
- 高致病性猪蓝耳病发病新特征、疫苗免疫及综合防控措施探讨
- 高致病性猪蓝耳病是由猪繁殖与呼吸综合征病毒变异株引起的一种急性高致死性猪的传染性疫病。本文介绍了高致病性猪蓝耳病的发病新特征,探讨了疫苗免疫的功能,提出高致病性猪蓝耳病综合防控措施。
- 闫若潜吴志明张志凌张健刘梅芬黄清
- 关键词:猪蓝耳病疫苗免疫防控措施
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- 猪白细胞介素2/6嵌合基因的融合表达及活性被引量:4
- 2012年
- 采用重叠延伸PCR(SOE-PCR)方法通过一基因柔性接头(linker)将猪白介素2(PoIL-2)、6(PoIL-6)基因构建成PoIL-2-linker-PoIL-6嵌合基因并克隆入pQE-30原核表达载体中进行融合表达;对表达的重组融合蛋白(rPoIL-2-linker-PoIL-6)进行纯化。分别检测rPoIL-2-linker-PoIL-6蛋白与抗PoIL-2、PoIL-6单抗发生特异性免疫反应及促猪外周血淋巴细胞和猪脾脏细胞的增殖活性。结果显示:成功构建了PoIL-2-linker-PoIL-6嵌合基因及其重组原核表达质粒(rpQE-30/PoIL-2-linker-PoIL-6)。表达的rPoIL-2-linker-PoIL-6蛋白相对分子质量约28 000,蛋白经纯化后纯度在96%以上。rPoIL-2-linker-PoIL-6蛋白分别具有与单一重组PoIL-2、PoIL-6蛋白(rPoIL-2、rPoIL-6)对照相近的生物学活性,可与抗PoIL-2、PoIL-6单抗发生特异性免疫反应,并可显著促进猪外周血淋巴细胞和猪脾脏细胞的增殖。结果表明,rPoIL-2-linker-PoIL-6蛋白在体外具有单一rPoIL-2和rPoIL-6蛋白的双重生物学活性,这为下一步进行rPoIL-2-linker-PoIL-6蛋白在动物体内活性研究奠定了基础。
- 闫若潜马文涛吴志明王东方李桂喜刘梅芬张盼盼黄清
- 关键词:猪白细胞介素2嵌合基因活性