目的探讨人源D-酪氨酰tRNA脱酰基酶(h-DTD)对人神经母细胞瘤细胞SH-SY5Y的非选择性阳离子通道通透性的影响。方法利用毛细管电泳法检测原核表达纯化的h-DTD的体外脱酰酶活性;用W estern b lot法分析h-DTD在各组织和细胞中的表达谱;用膜片钳技术检测SH-SY5Y细胞全细胞电位。结果h-DTD具有体外脱酰酶活性,并在脑组织中高表达。在h-DTD蛋白存在的情况下,游离的D-氨基酸及L谷-氨酸能激活谷氨酸敏感的非选择性阳离子通道,导致细胞膜通透性增加。结论在神经系统,h-DTD蛋白可能通过维持游离D-氨基酸的浓度来影响非选择性阳离子通道的功能。
目的腹部血流在维持消化系统和循环系统的稳态中发挥重要作用,其中肠系膜动脉阻力血管起关键作用。我们应用膜片箝技术,研究Wistar大鼠肠系膜动脉阻力血管平滑肌钙离子单通道特性及硝普钠对其影响。方法从Wistar大鼠肠系膜动脉分支阻力血管分离新鲜平滑肌细胞。以100mmol·LBa~为载流子应用细胞贴附式(cell attached)膜片箝方法,记录细胞膜钙离子单通道电流(I_(Ca))。箝制电压为-70mV,检测电压分别为10mV和+20mV。结果此(I_(Ca))的平均电流幅值(A)开放时和开放概率(Po)分别为(平均数标准差10):在检测电压10mV时;A(1.16±0.28)pA,(1.7±0.82)ms和Po(0.16±0.09);检测电压+20mV时:A(1.14±0.34)pA,(1.5+0.76)ms和Po(0.20±0.10)。Bay K 8644(L型钙通道的激动剂)可激活I_(Ca)将一氧化氮(NO)供体硝普钠(10~9mol·L^1)加入细胞浴液,数秒之内I_(Ca)活动即被灭活或抑制,并于数分钟内恢复,有时在对I_(Ca)的抑制作用之后可记录到兴奋作用,此时如再次应用同样剂量的硝普钠I_(Ca)活动可再被抑制。结论 NO可灭活肠系膜动脉A_4A_5段阻力血管平滑肌细胞膜I_(Ca)随后所产生的兴奋作用,可能由NO的代谢产物所致,这是首次在同一膜片记录到NO双向和的报道。
