魏昭荣
- 作品数：7 被引量：7H指数：2
- 供职机构：中国农业科学院生物技术研究所更多>>
- 发文基金：国家高技术研究发展计划更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 乙肝病毒包膜小蛋白及中蛋白基因在苜蓿中的诱导性表达
- 本发明涉及乙型肝炎病毒包膜小蛋白及中蛋白基因在转基因苜蓿中同时进行诱导性表达的方法及其应用。上述两个抗原蛋白基因被分别置于苜蓿亚硝酸还原酶基因启动子操控之下，在正常生长条件下，这两个外源蛋白基因处于沉默状态，无任何目标蛋...
- 刘德虎李刚强徐妙云魏昭荣王跃驹
- 文献传递
- 大肠杆菌定居因子抗原蛋白转基因植物的生产方法及产品
- 本发明涉及表达毒素源性大肠杆菌定居因子抗原蛋白及其衍生物转基因植物的生产方法，并进而通过直接食用或肠道给药的方式利用这些含有大肠杆菌定居因子抗原蛋白的转基因植物及其衍生物从而引起人或哺乳动物对该抗原蛋白的免疫应答反应。
- 刘德虎李刚强徐妙云魏昭荣王跃驹
- 文献传递
- 白藜芦醇合酶基因的克隆及丹参的转化被引量：4
- 2007年
- 目的为探索利用分子生物学技术培育新型药用植物的新途径,将外源的白藜芦醇合酶(RS)基因导入到丹参中表达,以改善或增加丹参的效用。方法根据已公布的核苷酸序列,利用引物悬挂延伸法,经过3次扩增,最终从葡萄基因组DNA中获得完整的RScDNA基因序列;以质粒pBin438为基础,构建含有RS目的基因的组成型植物表达载体。在根癌农杆菌介导下,利用叶盘法转化丹参,进而通过PCR、PCR-Southern杂交对不同的转基因植株进行筛选与检测。结果总共得到了45棵卡那霉素抗性植株,经PCR和PCR-Southern杂交检测,确定葡萄RS基因已整合到部分转基因丹参苗的基因组中。结论成功建立了白藜芦醇合酶基因转化丹参的体系,并获得了转基因植株。
- 陈海敏徐妙云李刚强郝雯静魏昭荣艾铁民刘德虎
- 关键词：丹参根癌农杆菌白藜芦醇
- 以油体蛋白作载体在转基因大豆中生产重组水蛭素的方法
- 本发明涉及以油体蛋白作载体在转基因大豆中生产重组水蛭素的方法。将人工合成的、按照植物所偏爱的密码子优化后的水蛭素基因及蛋白酶切割识别信号与油体蛋白基因进行体外拼接，然后通过转基因途径以融合蛋白的方式在大豆中表达并定位在大...
- 刘德虎徐妙云李刚强魏昭荣
- 文献传递
- 乙肝病毒包膜小蛋白及中蛋白基因在苜蓿中的诱导性表达
- 本发明涉及乙型肝炎病毒包膜小蛋白及中蛋白基因在转基因苜蓿中同时进行诱导性表达的方法及其应用。上述两个抗原蛋白基因被分别置于苜蓿亚硝酸还原酶基因启动子操控之下，在正常生长条件下，这两个外源蛋白基因处于沉默状态，无任何目标蛋...
- 刘德虎李刚强徐妙云魏昭荣王跃驹
- 文献传递
- 吸血蝙蝠纤溶酶原激活剂α2的原核表达及抗体制备
- 2008年
- 利用人工合成的吸血蝙蝠唾液纤溶酶原激活剂α2(DSPAa2)基因,研究了其在细菌中的表达及表达产物的纯化和抗体制备。首先人工合成 DSPAa2基因,并构建原核表达载体转化大肠杆菌。经 IPTG 诱导后,DSPAa2在细菌中得到了高效表达。SDS-PAGE 结果显示,以包涵体的形式存在的 DSPAce2重组蛋白占到细菌总蛋白的32%。包涵体裂解后经亲合层析柱纯化,100mL 菌液中能得到2.2mg 纯的重组蛋白。用纯化的 DSPAa2分别免疫大鼠和小鼠,经 ELISA 检测,获得了效价达到1:12800以上的高质量的抗血清。West-ern blot 结果显示抗体能与 DSPAα2特异性地结合。
- 魏昭荣李刚强李校堃刘德虎
- 关键词：吸血蝙蝠重组蛋白基因表达免疫应答
- T4溶菌酶在毕赤酵母中的诱导表达及抑菌活性测定(英文)被引量：3
- 2007年
- 目的利用毕赤酵母诱导表达T4溶菌酶蛋白并测定其抗菌活性。方法T4溶菌酶(T4lysozyme)基因以N端融合的方式被准确插入到质粒pPIC9K的EcoR I-Not I位点内,得到分泌型重组表达载体 pPIC9K-T4L。该载体首先经限制性内切酶Sal I酶切,进而采用电击方法将线性化的重组质粒DNA导入到毕赤酵母中。经过梯度筛选得到多个单拷贝和多拷贝转化重组子。随机挑取部分重组子PCR扩增阳性克隆,经菌体培养和甲醇诱导后获得了分泌表达,表达产物存在于培养上清液中。结果表达蛋白经琼脂孔扩散抗菌实验显示抑菌圈明显;重组蛋白对金黄色葡萄球菌与肺炎链球菌均具有显著抑制作用;多拷贝与单拷贝重组表达子没有抗菌活性差异与蛋白表达量的差异;加热煮沸对于T4溶菌酶蛋白的抗菌活性无明显影响。结论T4溶菌酶在毕赤酵母中得以成功诱导与表达;表达产物不受拷贝数影响并具热稳定性。
- 郝雯静李刚强徐妙云魏昭荣陈海敏刘德虎艾铁民
- 关键词：T4溶菌酶毕赤酵母电击转化抗菌活性
