魏中南
- 作品数：21 被引量：45H指数：4
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- 乙型肝炎病毒前S2基因克隆及真核表达载体的构建
- 目的克隆乙型肝炎病毒前S2基因,构建其真核表达质粒。方法采用PCR技术,从乙型肝炎患者血清中抽提HBV DNA为模板,设计引物扩增全长前S2基因,再将目的基因插入到真核载体pcDNA3.1(+)中,再经PCR、酶切和DN...
- 魏中南夏剑波
- 文献传递
- 新生儿晚期黄疸人巨细胞病毒gB基因分型研究被引量：1
- 2011年
- 目的了解引起新生儿晚期黄疸患者人巨细胞病毒(HCMV)gB基因型的分布,探讨HCMVgB基因多态性与黄疸之间的关系。结论采用荧光定量PCR法检测本院新生儿科98例晚期黄疸新生儿标本HCMV-DNA含量,巢式聚合酶链反应扩增阳性标本HCMVgB基因,并进行DNA测序,绘制种系进化树。利用HinfⅠ和RsaⅠ对gB基因进行限制性片段长度多态性(RFLP)分析。结果 30例晚期黄疸新生儿HCMV荧光定量PCR检测阳性,阳性率为30.6%。种系进化树分析结果显示gB基因分为4个基因型,gB1型15株(50%),gB2型5株(16.7%),gB3型9株(30.0%),gB1/3混合型1株(3.3%)。以HCMV实验室标准株AD169作为参考,将序列进行同源性比较,gB1型同源性为94.7%～95.0%,gB2型同源性93.1%～93.4%,gB3型同源性94.7%,gB1/3型同源性93.7%。RFLP分析将gB基因分为4个基因型,分型结果与种系进化树分型一致。结论 HCMV感染是导致新生儿晚期黄疸的原因之一;gB基因的DNA序列比较保守,但仍存在一定的多态性,晚期黄疸新生儿中HCMV感染以gB1、gB3型为主。
- 王维鹏胡洪波魏中南彭巧英胡兴文
- 关键词：巨细胞病毒GB基因黄疸
- 乙型肝炎病毒前S2基因克隆及真核表达载体的构建
- 2011年
- 目的:克隆乙型肝炎病毒前S2基因,构建其真核表达质粒。方法:以乙型肝炎患者血清HBV DNA为模板,设计引物扩增全长前S2基因,再将目的基因插入到真核载体pcDNA3.1(+)中,经PCR、酶切和DNA测序确认。结果:从患者血清抽提的DNA中扩增得到约860bp大小的目的片段,经回收、纯化、酶切后转化大肠杆菌DH5α,阳性重组质粒经PCR扩增得到约860bp产物;重组质粒经BamHⅠ和EcoRⅤ双酶切得到5.4kb和860bp两个片段,与预期一致;经DNA测序与已知序列比对确认前S2基因片段正确插入pcD-NA3.1(+)载体。结论:成功构建了含前S2基因的真核载体,为进一步研究HBV前S2蛋白的生物学功能及其实验诊断意义提供了条件。
- 魏中南夏剑波
- 关键词：乙型肝炎病毒克隆真核表达
- HBV-PreS1 Ag、HBV传统血清标志物及HBV-DNA检测意义的探讨被引量：2
- 2009年
- 目的:分析HBV前S1抗原和血清标志物之间的关系,探讨前S1抗原检测在临床上的应用价值。方法:收集382例乙型肝炎血清标本,采用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测HBV血清标志物和PreS1抗原,用聚合酶链反应(PCR)检测HBV-DNA,对检测结果进行比较。结果:382例乙型肝炎患者PreS1抗原和HBV-DNA的检出率分别为33.8%和40.8%;其中HBeAg阳性144例中,PreS1抗原阳性112例,HBV-DNA阳性134例,阳性率分别为77.8%和93.1%;HBeAg阴性238例中,PreS1抗原阳性17例,HBV-DNA阳性22例,阳性率分别为7.1%和9.2%。HBV-DNA检出率稍高于PreS1Ag的检出率,但两者的检出率差异均无统计学意义(P>0.05)。结论:HBV前S1蛋白可反映HBV复制状况,与HBV-DNA结果的一致性较好,可作为临床上HBV感染诊断和监测的一项指标。
- 王槐堂魏中南
- 关键词：HBV前S1抗原HBEAGHBV-DNA
- 10769例孕妇不规则抗体筛查分析被引量：5
- 2011年
- 目的:对孕妇进行血型不规则抗体筛查,降低和避免溶血性输血反应的发生。方法:用微柱凝胶技术筛检孕妇不规则抗体,对阳性标本进一步做抗体特异性鉴定。结果:10769例孕妇的血浆或血清中共检出不规则抗体阳性35例(阳性率为0.325%),其中抗-D2例,抗-E13例,抗cE7例,抗Ce3例,抗c4例,抗-M4例,抗-Lea1例,抗-s1例。结论:输血前对孕妇进行常规的抗体筛检试验,对预防溶血性输血反应,提高临床用血的安全性和有效性具有重要意义。
- 张仲新魏中南
- 关键词：孕妇不规则抗体输血安全
- 中性杆状核粒细胞分类计数检测对新生儿败血症的临床诊断价值被引量：3
- 2011年
- 目的探讨中性杆状核粒细胞分类计数在新生儿败血症的诊断价值。方法用法国生物梅里埃公司BacT/Alert 240血培养仪对100例新生儿败血症患儿(观察组)及100例非败血症感染组(对照组)进行中性杆状核粒细胞分类计数,将以上两种方法做统计学比较,以中性杆状核粒细胞大于10%为阳性,小于10%为阴性。结果 100例观察组患儿中,中性杆状核粒细胞分类计数阳性47例,阳性率47%,100例对照组的中性杆状核粒细胞的分类计数阳性11例,阳性率11%,观察组的中性杆状核粒细胞的检测值均显著高于对照组(P<0.001)。结论中性杆状核粒细胞检测对新生儿败血症疾病的诊断和治疗有一定的临床应用价值,可以作为诊断新生儿败血症的早期敏感指标。
- 陆丹魏中南
- 关键词：新生儿败血症
- 人巨细胞病毒UL144基因序列分析及T细胞CTL表位预测
- 2011年
- 目的了解引起新生儿晚期黄疸的人巨细胞病毒（HCMV）UL144基因多态性,预测UL144基因各型编码蛋白的T细胞CTL表位。方法应用荧光定量PCR法检测晚期黄疸新生儿标本HCMV-DNA含量,采用巢式聚合酶链反应扩增阳性标本HCMV UL144基因开放读码框（ORF）,结果进行双向DNA测序,绘制种系进化树对HCMV感染患儿UL144基因进行分型。应用SYFPEITHI和NetCTL方案预测HCMV UL144基因编码蛋白各临床株T细胞CTL表位。结果①30例晚期黄疸新生儿荧光定量PCR检测阳性,其中28例UL144基因扩增阳性。②28株UL144基因与Toledo株进行同源性比较,核苷酸水平为80.4%~99.2%,氨基酸水平为78.9%~98.8%。种系进化树分析显示感染患儿标本UL144基因可分为3个基因型,G1型7株（25%）,其中G1a3株,G1b3株,G1c1株,G2型7株（25%）,G3型14株（50%）。③初步筛选出UL144基因各型T细胞CTL表位：G1a：YTYFSTPGV或HTYFSTPGV;G1b：HTYFSTPGV;G1c：YTSFSISGV;G2：TLCPNGTYL或TLCPNGTYL和HTLFSTPGV;G3：TLCPNGTYV。结论①HCMV UL144基因的DNA序列具有高度多态性,晚期黄疸新生儿中HCMV感染以G3型为主。②各型编码蛋白的T细胞CTL表位存在差异。
- 魏中南王维鹏胡洪波彭巧英胡兴文
- 关键词：人巨细胞病毒CTL表位
- 人巨细胞病毒UL144基因序列分析及B细胞表位预测
- 2010年
- 目的了解引起新生儿晚期黄疸的人巨细胞病毒（HCMV）UL144基因多态性,预测UL144基因各型编码蛋白的B细胞优势表位。方法应用荧光定量PCR法检测晚期黄疸新生儿标本HCMV-DNA含量,采用巢式聚合酶链反应扩增阳性标本HCMV UL144基因开放读码框（ORF）,结果进行双向DNA测序,绘制种系进化树对HCMV感染患儿UL144基因进行分型。结合亲水性参数、可及性参数、抗原性参数、柔韧性参数及二级结构方案对HCMV UL144基因编码各型蛋白的B细胞表位进行预测,参照已建立的预测方法综合评价B细胞优势表位。结果①30例晚期黄疸新生儿荧光定量PCR检测阳性,其中28例UL144基因扩增阳性。②28株UL144基因与Toledo株进行同源性比较,核苷酸水平为80.4%-99.2%,氨基酸水平为78.9%-98.8%。种系进化树分析显示感染患儿标本UL144基因可分为3个基因型,G1型7株（25%）,G2型7株（25%）,G3型14株（50%）。③HCMV UL144基因G1型和G2型B细胞表位均位于编码蛋白N段109-119位,G3型于氨基酸116位缺失一个谷氨酰胺,B细胞表位位于编码蛋白N段109-118位。结论①HCMV UL144基因的DNA序列呈高度多态性,但B细胞表位预测高度保守;②UL144 G3型氨基酸N段116位（Q）位点缺失可能改变该抗原表位的抗原性。
- 胡洪波王维鹏魏中南彭巧英胡兴文
- 关键词：人巨细胞病毒B细胞表位
- HBVPreS1Ag与HBV传统血清标志物及HBV-DNA检测意义的探讨
- 王槐堂魏中南
- 儿童血液感染病原菌的研究
- 目的了解我院儿科2年来血培养中分离菌株的构成比及耐药情况。方法患者血培养标本经BacT/Alerti120血培养仪培养,分离所得菌株用法国梅里埃API系统进行鉴定和K-B法做药敏。结果在3076份标本中,分离菌株459株...
- 曾明魏中南
- 关键词：血培养病原菌细菌耐药
- 文献传递
