高群杰
- 作品数：12 被引量：21H指数：3
- 供职机构：中国医学科学院北京协和医学院医药生物技术研究所卫生部抗生素基因工程重点实验室更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家重点基础研究发展计划基础研究重大项目前期研究专项更多>>
- 相关领域：生物学医药卫生轻工技术与工程化学工程更多>>
- 格尔德霉素基因工程高产菌株的构建
- 本发明涉及格尔德霉素基因工程高产菌株的构建，具体而言，就是根据在吸水链霉菌17997中发现的两组AHBA合酶基因簇，采用基因阻断技术，破坏可能参与萘醌型安莎类化合物生物合成的AHBA-shn基因，以便通过阻断或减少通往合...
- 王以光赫卫清高群杰
- 文献传递
- 格尔德霉素基因工程高产菌株的构建
- 本发明涉及格尔德霉素基因工程高产菌株的构建，具体而言，就是根据在吸水链霉菌17997中发现的两组AHBA合酶基因簇，采用基因阻断技术，破坏可能参与萘醌型安莎类化合物生物合成的AHBA－shn基因，以便通过阻断或减少通往合...
- 王以光赫卫清高群杰
- 文献传递
- 利用3－氨基－5－羟基苯甲酸(AHBA)合酶基因保守序列筛选安莎类化合物的方法
- 本发明涉及一种利用参与微生物产物生物合成酶编码基因保守序列从微生物中鉴定寻找新的活性物质的方法，具体来讲，就是利用分子生物学手段，根据安莎类化合物特异结构的AHBA生物合成基因保守序列，克隆相关基因，并以此为探针，获得安...
- 王以光高群杰
- 文献传递
- Geldanamycin产生菌生物合成相关基因的克隆与分析被引量：8
- 2002年
- 目的 从 geldanamycin产生菌吸水链霉菌 (S.hygroscopicus)中克隆生物合成基因 ,为阐明生物合成机制及改造其结构奠定基础。方法 以链霉菌 /大肠埃希氏菌穿梭 cosmids p KC5 0 5为载体构建了插入片段为 2 0～ 30 kb的 S.hygroscopicus总 DNA文库。以利福霉素中与 3-氨基 - 5 -羟基苯甲酸 (AHBA)合成相关基因为探针 ,经菌落杂交 ,Southern杂交筛选同源基因片段。测序结果与 Genbank进行同源性比较分析 ,并以attp- 噬菌体载体 KC5 15利用基因阻断实验对克隆的基因片段进行功能鉴定。结果 构建的基因文库含重组基因比率高、基因组覆盖率高 ,稳定性好。经同源基因探针杂交 ,从文库中筛选出 9个阳性 cosmids克隆p CGB2 0、p CGB2 6、p CGB2 8、p CGB2 9、p CGB36、p CGB45、p CGB49、p CGB6 3、p CGB75。测序分析表明 ,cosmidp CGB2 0中 Bam HI- Bam HI 8kb片段两端的不完整 ORF编码蛋白与竹桃霉素 (oleandomycin) PKS Module 5、Module 6 (一致性为 79% )和红霉内酯合成酶 ORF2 (一致性为 75 % )、ORF1(一致性为 73% )、ORF3(一致性为 70 % )高度同源 ;Bam HI- Bam HI3kb片段一端与编码类结核分枝杆菌的磷酸吡哆醛依赖的氨基转移酶家族中半胱氨酸脱硫酶的 DNA有同源性 ,该家族与 AHBA合成酶关系密切。
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- 关键词：GELDANAMYCIN生物合成基因基因文库基因阻断
- 吸水链霉菌Streptomyces hygroscopicus 17997中噬菌体基因转移系统的建立及其应用被引量：5
- 2003年
- 由吸水链霉菌Streptomyceshygroscopicus 17997产生的格尔德霉素geldanamycin(GA)属安莎类抗生素 ,具有良好的抗肿瘤和抗病毒活性。本文应用链霉菌温和噬菌体C3 1衍生的KC5 15载体 ,在吸水链霉菌S .hygroscopicus17997中建立并优化了S .hygroscopicus 17997的基因转染体系。利用所建立的基因转染体系 ,以基因阻断技术从S .hygroscopicus 17997基因文库含有多组PKS基因柯斯质粒中 ,鉴定了与GAPKS生物合成相关基因的柯斯质粒 。
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- 关键词：吸水链霉菌基因阻断格尔德霉素生物合成基因
- 吸水链霉菌17997基因阻断变株发酵产物的HPLC型分析
- 以吸水链霉菌17997为出发菌株,分别阻断其基因簇中与格尔德霉素(GA)起始单位生物合成相关的3-氨基5-羟基苯甲酸(AHBA)合酶基因及与之相连的PKS,并阻断含GA聚酮体后修饰基因-氨甲酰基转移酶基因的PKS基因,分...
- 李京艳赫卫清杜煜武临专高群杰孙桂芝王以光
- 关键词：药物学吸水链霉菌基因阻断
- 文献传递
- 格尔德霉素基因工程高产菌株的构建和培养被引量：6
- 2008年
- 在格尔德霉素产生菌吸水链霉菌17997(Streptomyces hygroscopicus 17997)中存在两种3-氨基-5-羟基苯甲酸(3-amino-5-hydroxybenzoic acid,AHBA)的生物合成基因簇,根据同源性可分为苯醌类和萘醌类。已证明其中苯醌类的AHBA生物合成基因簇负责格尔德霉素(geldanamycin,Gdm)起始单位的合成,而萘醌类的AHBA基因簇可能参与未知安莎化合物的生物合成。为提高吸水链霉菌17997菌种的Gdm发酵产量,并研究高产菌种在固体培养基上孢子的生长周期。采用基因阻断技术,将吸水链霉菌17997中的萘醌类AHBA生物合成基因簇(shnSOP)进行破坏,以获得ΔSOP菌株,从而减少对合成所需共同底物AHBA的争夺。HPLC分析结果表明ΔSOP菌株Gdm的发酵产量比原株提高185%。同时,通过孢子计数发现该菌株在固体培养基上的孢子生长经历2个周期,第2代孢子菌种的Gdm产量较高。
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- 关键词：格尔德霉素基因阻断
- 具有产生安莎类抗生素潜能的放线菌的分子筛选(英文)被引量：3
- 2008年
- 目的建立一种高通量筛选具有产生安莎类抗生素潜能的放线菌的分子筛选方法。原理3-氨基-5-羟基-苯甲酸(AHBA)是安莎类抗生素生物合成的前体。在通过氨基莽草酸途径生物合成AHBA的过程中,AHBA合酶是催化5-氨基-3-脱氢-5-脱氧莽草酸形成AHBA的一个特异性关键酶。AHBA合酶基因的存在可以作为放线菌菌株具有合成安莎类抗生素能力的一个必要而非充分的条件。AHBA合酶基因高度保守,通过PCR方法可以建立一种针对AHBA合酶基因存在与否的、具有安莎类抗生素产生潜能的放线菌菌株高通量筛选方法。方法根据已知AHBA合酶序列的相似性,设计了针对AHBA合酶基因中高度保守的一段755bp片段大小的PCR筛选寡核苷酸引物,用于从土壤中分离的未知放线菌高通量筛选。结论从1900株土壤分离的未知放线菌中筛选获得33株AHBA合酶基因阳性菌株,即具有安莎类抗生素产生潜能的放线菌菌株。
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- 关键词：聚合酶链反应放线菌
- 吸水链霉菌17997生物合成格尔德霉素的基因簇
- 本发明涉及从抗生素产生菌中克隆并获得抗生素生物合成基因簇,具体是以安莎类化合物生物合成基因保守序列(AHBA)基因克隆相关基因,以此为探针,克隆并获得格尔德霉素生物合成基因簇,从而为提高格尔德霉素发酵产量和优化改造其结构...
- 王以光高群杰
- 文献传递
- 利用3-氨基-5-羟基苯甲酸(AHBA)合酶基因保守序列发现潜在的生物合成基因簇
- 本研究应用3-氨基-5-羟基苯甲酸(AHBA)基因保守序列在克隆苯醌类安莎霉素-格尔德霉素(geldanamycin)生物合成基因时，从该产生菌(Streptormyces hygroscopicus 17997)中，发...
- 王以光高群杰韩锋杜煜尚广东
- 关键词：基因保守序列生物合成基因簇
- 文献传递
