高正伦 作品数:14 被引量:24 H指数:3 供职机构: 北京民海生物科技有限公司 更多>> 发文基金: 吉林省科技发展计划基金 更多>> 相关领域: 医药卫生 生物学 化学工程 更多>>
人二倍体狂犬病疫苗病毒液的灭活方法 本发明提供一种人二倍体狂犬病疫苗病毒液的灭活方法,该方法包括以下步骤,即浓缩病毒液、添加灭活剂、病毒灭活液的转移、水解去除灭活剂。本发明的灭活方法对人二倍体狂犬病疫苗病毒液的灭活效果好,加入灭活剂后10小时即可完全灭活,... 左静 高正伦 刘海文 方群 季振涛 郑森远 张骞 刘勇 张芮铭 代凡 吴淞 张雪 戴会忠 刘雅静 王云达 樊鹏人二倍体细胞狂犬病疫苗病毒液制备方法 本发明提供了一种人二倍体细胞狂犬病疫苗病毒液制备方法,涉及生物技术领域,是利用狂犬病毒固定毒PM-1503-3M株接种于MRC-5细胞,生产人二倍体细胞狂犬病疫苗病毒液。本发明方法工艺简单,节约成本,制得的病毒液抗原含量... 左静 高正伦 刘海文 方群 季振涛 郑森远 张骞 刘勇 张芮铭 代凡 吴淞 张雪 戴会忠 刘雅静 王云达 樊鹏乙型肝炎病毒表面抗原基因在人参细胞中的高效表达 被引量:2 2008年 目的提高乙型肝炎病毒表面抗原(HBsAg)在人参愈伤组织细胞中的表达。方法构建一种植物细胞表达载体pBIBeo,该载体携带CaMV 35S双增强启动子和TMV(U1株)翻译增强子。用pBIBeo转化的农杆菌LBA4404与人参愈伤组织细胞共培养,经G418筛选获得新生抗性细胞团PBIBeo,连续继代培养选育出用于植物源口服乙肝疫苗生产的高产细胞株。提取基因组DNA和mRNA,进行PCR和RT-PCR鉴定,Western blot鉴定HBsAg的特异性,电镜下观察纯化抗原颗粒大小,并以ELISA检测HBsAg的表达水平。结果转化的人参细胞基因组DNA进行PCR反应,得到约700 bp的启动子基因片段。提取mRNA进行RT-PCR反应,得到约700 bp的HBsAg基因片段。Western blot分析可见相对分子质量为24 000的特异性条带。亲和层析纯化细胞表达的HBsAg抗原,电镜观察可见平均直径为32 nm的颗粒。ELISA检测结果表明pBIBeo转化细胞株HBsAg表达量比pBIBSa转化细胞株提高1~2倍。结论人参细胞基因组已经整合了目的基因并稳定高效表达。 高正伦 盛军 刘丹 刘晓宇 李娟 郝淑美 吉海滨 刘建华关键词:乙型肝炎病毒表面抗原 狂犬病病毒PM株在人二倍体MRC-5细胞中的感染特性 被引量:4 2013年 目的 观察狂犬病病毒PM株在人二倍体MRC-5细胞中的感染特性。方法 分别将0.05、0.06、0.07、0.08、0.09、0.10MOI的PM株狂犬病病毒接种至MRC-5细胞中,显微镜观察感染细胞的状态;间接免疫荧光法检测病毒收获液的滴度;小鼠NIH法测定病毒灭活液的效价。结果 MOI为0.06~0.07时,病毒收获前细胞出现聚集现象,液体中基本无死细胞;病毒收获液的滴度和病毒灭活液的效价较高。结论 观察了狂犬病病毒PM株在人二倍体MRC-5细胞中的感染特性,为疫苗生产工艺的优化提供了实验依据。 张芮铭 高正伦 方群 左静 刘海文 郑学学 刘翠 郑森元关键词:滴度 效价 乙肝病毒表面抗原基因在人参细胞中的高效表达 高正伦关键词:乙肝病毒表面抗原 文献传递 林蛙皮生物抗菌剂的中试及其应用研究 李青山 孟庆繁 杨秀燕 周杰 王彦忠 腾利荣 李向晖 丁天兵 邱芳萍 苟小军 杨谊 史学惠 杨陆一 李招发 高正伦 长白山林蛙是主要保健品的资源,具有重要的药用价值,其中林蛙深加工中的蛙皮具有广谱的抗菌物质。该项研究以林蛙皮为原料制备广谱抗菌的生物抗菌剂。对抗菌剂进行了十种菌的抗菌活性实验,表明该抗菌剂对革兰氏阳性菌和阴性菌均具有一定...关键词:关键词:抗菌 人二倍体狂犬病疫苗病毒液的灭活方法 本发明提供一种人二倍体狂犬病疫苗病毒液的灭活方法,该方法包括以下步骤,即浓缩病毒液、添加灭活剂、病毒灭活液的转移、水解去除灭活剂。本发明的灭活方法对人二倍体狂犬病疫苗病毒液的灭活效果好,加入灭活剂后10小时即可完全灭活,... 左静 高正伦 刘海文 方群 季振涛 郑森远 张骞 刘勇 张芮铭 代凡 吴淞 张雪 戴会忠 刘雅静 王云达 樊鹏文献传递 人二倍体细胞狂犬病疫苗病毒液制备方法 本发明提供了一种人二倍体细胞狂犬病疫苗病毒液制备方法,涉及生物技术领域,是利用狂犬病毒固定毒PM-1503-3M株接种于MRC-5细胞,生产人二倍体细胞狂犬病疫苗病毒液。本发明方法工艺简单,节约成本,制得的病毒液抗原含量... 左静 高正伦 刘海文 方群 季振涛 郑森远 张骞 刘勇 张芮铭 代凡 吴淞 张雪 戴会忠 刘雅静 王云达 樊鹏文献传递 b型流感嗜血杆菌及其疫苗 2014年 b型流感嗜血杆菌(Haemo philus in fluenzae typeb,Hib)是导致婴幼儿严重细菌性感染的主要致病菌之一。Hib疫苗的研发和使用大大降低了Hib疾病的发病率。研究显示,Hib结合疫苗可有效预防婴幼儿侵袭性Hib疾病,且具有良好的安全性。此文就Hib的病原学、流行病学及疫苗研究进行综述。 尹珊珊 高正伦 刘建凯 郑海发关键词:嗜血菌 流感 疫苗 流行病学 在无血清无蛋白培养基中培养Vero细胞 2007年 目的开发在无血清无蛋白培养基(PF)中培养Vero细胞的技术。方法在DMEM/F12培养基中添加酵母提取物和大豆水解物,配制成无血清无蛋白培养基。使用配制好的无血清无蛋白培养基,分别在玻璃、聚乙烯醇缩丁醛(PVB)和聚苯乙烯(PS-TC)培养面上培养Vero细胞,观察细胞生长情况,并绘制细胞生长曲线,以含血清培养基BM为对照。结果与BM培养基比较,在玻璃培养面上,PF培养基不支持Vero细胞生长和分裂;在PVB培养面上,PF培养基支持Vero细胞生长,但不支持分裂;在PS-TC培养面上,PF培养基支持Vero细胞的生长和分裂。结论在PS-TC培养面上,PF培养基适合培养Vero细胞。 高正伦 张宪平 盛军 郝淑美关键词:VERO细胞