高咏梅
- 作品数：9 被引量：59H指数：5
- 供职机构：中国医学科学院北京协和医学院基础医学院基础医学研究所更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 丹参提取物单体对肿瘤坏死因子诱导内皮细胞组织因子表达的干预作用被引量：11
- 2003年
- 研究丹参提取物单体 (76 4 3)对肿瘤坏死因子 α(tumornecrosisfactor α ,TNF α)诱导人血管内皮细胞 (humanvascularendothelialcell,HUVEC)组织因子 (tissuefactor,TF)基因表达的干预作用 ,及其对单个内皮细胞胞内游离钙([Ca2 + ]i)水平的影响 ,以探讨 76 4 3对心血管血栓栓塞性疾病防治的可能机制。进行人脐静脉原代内皮细胞、ECV30 4细胞株的培养。采用限制性内切酶法 ,构建含有人TF基因不同上游调控序列的荧光素酶报告基因质粒 ,经脂质体法转染内皮细胞 ,用TNF α及 76 4 3处理内皮细胞 ,测定细胞裂解物荧光素酶及 β半乳糖苷酶活性。以Fluo 3/AM为荧光指示剂 ,用激光扫描共聚焦显像系统观测 [Ca2 + ]i的改变。结果发现在TF基因上游序列 - 2 4 4 / +12 1bp存在下 ,TNFα可使转染内皮细胞荧光素酶表达量比对照组明显增加 ,76 4 3使这种增加有所降低。而 - 111/+12 1bp存在时 ,TNF α组与对照组荧光素酶表达量无明显差异 ,均比 - 2 4 4 / +12 1bp存在时明显降低 ,此时 ,76 4 3并未引起荧光素酶表达量明显改变。激光扫描共聚焦显像显示 ,TNF α可引起人内皮细胞 [Ca2 + ]i持续缓慢升高 ,加入 76 4 3后 [Ca2 + ]i迅速大幅度降低 ,逐渐恢复到基线水平。提示 76 4 3可抑制TNF
- 孙瑛高咏梅朱广瑾
- 关键词：肿瘤坏死因子内皮细胞肿瘤坏死因子-Α
- 丹参对血管紧张素Ⅱ诱导内皮细胞组织因子基因表达的作用被引量：6
- 2004年
- 目的 探讨丹参有效单体764-3(764-3)对心血管血栓栓塞性疾病防治的可能机制。方法 体外培养人脐静脉内皮细胞(HUVEC)、内皮细胞株(ECV304)。采用限制性内切酶法,构建含有人血管内皮细胞组织因子基因不同上游调控序列的荧光素酶报告基因质粒,经脂质体法转染内皮细胞,用血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)及764-3处理内皮细胞,测定细胞裂解物荧光素酶及β半乳糖苷酶活性。用激光共聚焦扫描显像系统观测单个内皮细胞胞内游离钙浓度([Ca2+]i)水平的改变。结果 在TF基因上游序列-244/+121bp存在下,AngⅡ可使转染内皮细胞荧光素酶表达量明显高于对照组,764-3抑制这种增加。AngⅡ可引起人内皮细胞[Ca2+]i缓慢升高,加入764-3可迅速大幅度降低[Ca2+]i,使接近基线水平。结论764-3可抑制AngⅡ诱导的人内皮细胞TF基因表达增强,这种作用依赖于该基因上游序列-244/+121bp的存在。
- 祖淑玉高咏梅朱广瑾
- 关键词：纤维蛋白溶解药内皮生长因子脐静脉基因表达
- 丹参提取物7643对TNFα所致人组织因子表达增强的干预作用
- ＜正＞组织因子（凝血因子Ⅲ,TF）起始凝血级联反应,是止血和血栓形成的重要调节因子。正常情况下,内皮细胞不表达TF,但在多种刺激物包括生理性、病理性因素都可以影响体外培养细胞TF的合成。在动脉粥样硬化（AS）斑块中存在肿...
- 高咏梅朱广瑾
- 文献传递
- 组织因子及其与心血管疾病的关系被引量：5
- 1999年
- 对组织因子的认识已有百余年，尤其近20年来，它在动静脉血栓形成中的作用日益受到重视，对其复杂的生物学特性的了解也逐渐增多。组织因子（TissueFactor，TF）即第三凝血因子，又称组织凝血活酶，它既是凝血因子Ⅶ（FⅦ）的细胞表血受体，又是FⅦ或FⅦa的辅因子，它与F...
- 高咏梅朱广瑾
- 关键词：心血管疾病生物学特性
- 核转录因子NF-κB在血管内皮细胞组织因子表达中的作用被引量：19
- 2001年
- 目的 探讨核转录因子NF-κB在肿瘤坏死因子α（TNF-α）、血管紧张素Ⅱ（AngⅡ）诱导血管内皮细胞组织因子（TF）表达中的作用。方法用发色底物法测定血管内皮细胞表面TF活性。分别采用凝胶电泳迁移率改变法(EMSA)和Western印迹法检测血管内皮细胞核转录因子NF-κB的DNA结合活性和含量。结果100 U/ml TNF-α、10-6 mol/l AngⅡ作用下，内皮细胞表面TF 活性明显增高，分别较对照增高1.65 倍和1.61 倍。TNF-α、AngⅡ作用组核抽提物与NF-κB特异DNA序列结合活性分别为正常对照组的2.07倍和3.89倍。TNF-α、AngⅡ处理后细胞核内NF-κB含量明显增加，分别为正常对照组的1.77倍和1.52倍。结论TNF-α、AngⅡ可增强内皮细胞TF活性，这可能与其促进内皮细胞核转录因子NF-κB的核转位和DNA结合活性有关，进一步证实NF-κB在内皮细胞TF诱导表达中的重要作用。
- 高咏梅朱广瑾
- 关键词：内皮细胞核转录因子ΚB肿瘤坏死因子Α
- 肿瘤坏死因子α和血管紧张素Ⅱ诱导血管内皮细胞组织因子基因表达及其机制的研究被引量：5
- 2002年
- 目的 :研究肿瘤坏死因子α(TNFα)、血管紧张素Ⅱ (AngⅡ )对内皮细胞组织因子 (TF)表达的影响 ,并探讨TF基因 5’上游序列在TNFα、AngⅡ诱导内皮细胞该基因转录中的调控作用。方法 :应用细胞原位杂交技术检测TFmRNA水平。采用基因重组技术构建含有人TF基因不同上游序列荧光素酶报告基因质粒 ,经脂质体法转染内皮细胞 ,检测及分析报告基因活性。结果 :TNFα和AngⅡ均可以诱导内皮细胞TFmRNA表达增强。在TF基因上游序列 - 2 44 /+12 1bp存在时 ,TNFα、AngⅡ均可使转染内皮细胞荧光素酶表达量明显增加 ,而在 - 111/+12 1bp存在时TNFα、AngⅡ组与对照组荧光素酶表达量均无明显差异 ,而且较 - 2 44 /+12 1bp存在时荧光素酶表达量明显降低。结论 :TF基因上游 - 2 44 /- 112bp序列的存在对TNFα、AngⅡ诱导内皮细胞TF基因表达起重要的调节作用。
- 高咏梅朱广瑾
- 关键词：基因表达凝血致活酶血管内皮细胞肿瘤坏死因子血管紧张素
- 肿瘤坏死因子α和血管紧张素Ⅱ对人血管内皮细胞组织因子表达的影响被引量：13
- 2000年
- 已知组织因子异常表达可启动血液凝固机制。用细胞发色底物法、ＲＴ－ＰＣＲ等方法分别从蛋白活性、基因表 达水平研究与动脉粥样硬化及高血压发病相关的肿瘤坏死因子、血管紧张素Ⅱ对血管内皮细胞组织因子表达的影响。 结果表明：肿瘤坏死因子α和血管紧张素Ⅱ均诱导血管内皮细胞组织因子的表达，并使其ｍＲＮＡ表达增加。此项研 究为进一步探讨动脉粥样硬化和高血压的共同发病机制打下基础。
- 高咏梅朱广瑾
- 关键词：TNF-Α血管内皮
- 肿瘤坏死因子对内皮细胞组织因子表达及转录调控的影响
- 2001年
- 目的:研究肿瘤坏死因子(TNFa)对内皮细胞组织因子(TF)表达的影响,并探讨TF基因5’上游序列以及核转录因子NF_(-k)B在该基因转录中的调控作用。方法:进行人脐静脉内皮细胞株(EVC304)及原代内皮细胞的培养。用发色底物显色法、RT-PCR和细胞原位杂交分别检测内皮细胞TF活性和mRNA水平。采用基因重组技术构建含有人TF基因不同上游序列荧光素酶报告基因质粒,经脂质体法转染内皮细胞,检测及分析报告基因活性。凝胶电泳迁移率改变法和western印迹法检测内皮细胞NF_(-k)B与DNA结合活性和含量。结果:100 u/ml TNFa。诱导内皮细胞TF活性和mRNA表达量明显增高;在TF基因上游序列-244/+121 bp存在时,TNFa可使转染内皮细胞荧光素酶表达量明显增加,-111/+121 bp存在时表达量无明显差异,而且比存在-244/+121 bp时的表达量明显降低;同样浓度TNFa作用下,内皮细胞核抽提物与NF_(-k)B探针的结合活性高于正常对照组,核内NF_(-k)B含量明显增加。结论:TNFa可以增强内皮细胞TF活性及基因表达,其中TF基因上游-244/-112 bp序列的存在起着重要的调节作用。此外,TNFa也能促进内皮细胞NF_(-k)B的转位和与DNA结合活性增高。
- 朱广瑾高咏梅吴其夏
- 关键词：内皮细胞基因表达肿瘤坏死因子
- 丹参提取物单体对肿瘤坏死因子诱导内皮细胞组织因子表达的干预作用(英文)被引量：7
- 2005年
- 背景:目前认为肿瘤坏死因子-α(TNF-α)可诱导人内皮细胞(HUVECs)组织因子基因的表达,而丹参提取物单体(764-3)对其干预作用如何?其机制有待于进一步探讨。目的:研究764-3对TNF-α诱导HUVECs组织因子基因表达的干预作用,及单个内皮细胞内游离钙(犤Ca2+犦i)水平的影响,以探讨764-3对防止心血管血栓栓塞性疾病的可能机制。设计:随机对照的实验研究。单位:协和医科大学基础医学研究所病理生理学系的实验室。材料:实验于1998-05/1999-09在中国医学科学院,中国协和医科大学基础医学研究所病理生理学系实验室完成。脐带取自北京妇产医院。干预:进行体外培养ECV304细胞株和人脐静脉内皮细胞,采用限制性内切酶法构建含有人TF基因不同上游调控序列的荧光素酶报告基因质粒,经脂质体法转染内皮细胞,用TNF-α(100U/mL)及764-3(30mg/L)处理细胞。主要观察指标:测定细胞裂解物中荧光素酶及β半乳糖苷酶的活性。以Fluo-3/AM为荧光指示剂,用激光共聚焦显像系统观测犤Ca2+犦i的改变。结果:在TF基因上游序列-244/+121bp存在下,TNF-α可使转染内皮细胞荧光素酶表达量较对照组明显增加,764-3使这种增加有所降低(P<0.05)。而-111/+121bp存在时,TNF-α组较对照组荧光素酶表达量无明显差异,均比-244/+121bp存在时明显降低,此时,
- 孙瑛朱自强高咏梅朱广瑾
- 关键词：凝血致活酶肿瘤坏死因子钙
