骆玮
- 作品数：4 被引量：22H指数：3
- 供职机构：大连医科大学更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 体外转染P27抑癌基因抑制人眼球筋膜囊成纤维细胞增生的研究被引量：3
- 2010年
- 目的探讨阳离子脂质体介导的P27抑癌基因对体外培养的人眼球筋膜囊成纤维细胞增生的抑制作用。方法收集斜视患者矫正手术过程中获取的球筋膜囊组织制备成组织块,采用贴壁法在DMEM+质量分数10%胎牛血清培养液中进行培养和传代。采用脂质体介导的方法,将构建的增强型绿色荧光蛋白(pEGFP)-N1P27真核表达质粒转染体外培养的人眼球筋膜囊成纤维细胞为pEGFP-N1P27转染组,同时以重组质粒pEGFP-N1的空质粒转染组为空载体组,另设部分未转染的成纤维细胞为未转染组。Westernblot法检测P27蛋白在人眼球筋膜囊成纤维细胞中的表达,用流式细胞技术进行细胞周期分析,MTT法检测P27基因对培养的人眼球筋膜囊成纤维细胞活性的影响,检测值以细胞的吸光度(A490)值表示。结果荧光倒置显微镜下见转染成功的成纤维细胞呈绿色荧光。Westernblot检测显示,pEGFP-N1P27转染组中可见宽大的蛋白条带,证实人眼球筋膜囊成纤维细胞在蛋白水平表达P27基因。细胞周期分析结果表明,pEGFP-N1P27转染组73.16%的人眼球筋膜囊成纤维细胞处于G0-G1期,26.84%处于S期,而空载体组的人眼球筋膜囊成纤维细胞在G0-G1期、S期者分别为63.29%和58.16%,未转染组分别为36.71%和41.84%。MTT法检测表明,pEGFP-N1P27转染组人眼球筋膜囊成纤维细胞的A490值为0.079±0.054,明显低于空载体组的0.127±0.106和未转染组的0.180±0.007,差异均有统计学意义(P=0.000,P=0.011)。结论转染的P27基因对体外培养的人眼球筋膜囊成纤维细胞的增生具有抑制作用,并能够抑制成纤维细胞的活性。
- 孙璐骆玮李静敏
- 关键词：抑癌基因P27
- 青光眼滤过泡瘢痕化临床药物治疗的基础研究被引量：14
- 2010年
- 青光眼滤过手术是目前治疗青光眼的主要方式之一,而青光眼滤过泡术后瘢痕化是术后眼压失控、手术失败的主要原因。近年来,随着生物化学、分子生物学等学科的发展,青光眼术后抗瘢痕化的方法有了很大的进展,由以往单纯的药物治疗、细胞因子治疗发展为多种治疗方法方式相结合,为抗青光眼术后瘢痕化提供了更广阔的空间及前景。
- 骆玮李静敏
- 关键词：青光眼滤过手术滤过泡RNA干扰技术
- 特异性转化生长因子-β_2 shRNA对人眼Tenon囊成纤维细胞的抑制作用被引量：5
- 2010年
- 目的观察转化生长因子-β2(TGF-β2)特异性短发夹RNA(shRNA)对人眼Tenon囊成纤维细胞(TCFs)TGF-β2表达的影响及对人TCFs增生的抑制作用。方法根据小干扰RNA(siRNA)的设计原则,针对TGF-β2基因序列特征构建特异性shRNA载体,转染培养的人TCFs。MTT比色法检测细胞的增生情况;ELISA法检测shRNA对TGF-β2蛋白表达的抑制作用。结果 TGF-β2shRNA转染组的细胞增生及TGF-β2蛋白的表达均受到抑制。转染24、48、72h后MTT比色法检测显示,TGF-β2shRNA转染组培养的Tenon囊的成纤维细胞的增生值分别为0.5426±0.05、0.5210±0.03、0.4055±0.04,明显低于阴性对照组的0.5655±0.03、0.5378±0.03、0.5268±0.04,3个组和各时间点的总体差异均有统计学意义(F组=54.691,P=0.000;Ftime=66.888,P=0.000)。ELISA法检测显示,TGF-β2shRNA转染组TGF-β2蛋白的表达水平下降,24、48、72hTGF-β2蛋白的表达量分别为(543.58±25.32)、(400.26±30.74)、(202.72±23.24)ng/L,明显低于阴性对照组的(659.78±20.95)、(547.45±24.65)、(442.87±17.43)ng/L及空白组的(721.75±30.19)、(756.61±30.19)、(787.60±18.37)ng/L,3个组和各时间点的总体差异均有统计学意义(F组=163.082,P=0.000;F时间=31.498,P=0.000)。结论 TGF-β2特异性shRNA能显著抑制人TCFsTGF-β2的表达,载体介导的TGF-β2特异性shRNA对眼前节术后的抗瘢痕化治疗具有潜在的可能性。
- 骆玮孙璐李静敏
- 关键词：RNA干扰技术TENON囊成纤维细胞转化生长因子-Β2
- RNA干扰对人眼成纤维细胞抑制作用的研究
- 目的：青光眼是世界第二位的致盲眼病,其致盲过程具有不可逆的特点,目前临床采用的主要治疗方法是用药物或手术方法降低眼内压（intraocular pressure,IOP）以减轻视功能的进一步损害。目前青光眼手术的主要手段...
- 骆玮
- 关键词：转化生长因子Β2青光眼RNA干扰技术成纤维细胞瘢痕形成
- 文献传递
