马锐
- 作品数：26 被引量：55H指数：5
- 供职机构：遵义医学院更多>>
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- 基于荧光定量PCRDNA熔解曲线技术分析浸润性导管乳腺癌患者外周血和肿瘤组织TCR beta链CDR3谱系（英文）被引量：4
- 2016年
- 目的采用TCR beta链CDR3谱系荧光定量PCR的DNA熔解曲线技术,探讨浸润性导管乳腺癌患者外周血T细胞和肿瘤组织T细胞之间TRBV基因表达情况。方法从遵义医学院附属医院甲乳外科采集乳腺癌志愿患者的乳腺肿瘤组织和外周血样本,选取病理诊断为浸润性导管癌的志愿患者23例,免疫组织化学检测ER、PR、PS2、C-erb B-2、nm23、P53和Ki-67的表达。分离每位志愿患者外周血单个核细胞(PBMCs),提取PBMCs和肿瘤部位组织总RNA,逆转录为c DNA,荧光定量PCR技术扩增各c DNA样本的TCR beta链CDR3区,DNA熔解曲线法对比分析各样本TRBV基因家族的表达情况。结果 23例浸润性导管乳腺癌志愿患者,外周血样本中TRBV6、TRBV8、TRBV12、TRBV14和TRBV24表达超过50%,肿瘤组织样本中TRBV6、TRBV12、TRBV14和TRBV24表达超过50%。选取的23例样本中的20例,其外周血和肿瘤组织均过表达相同的TRBV基因家族,但总TRBV基因家族的表达与ER、PR、PS2、C-erb B-2、nm2、P53和Ki-67的阳性或阴性没有明显的相关性。结论浸润性导管乳腺癌患者的外周血和肿瘤组织之间TRBV基因表达出现一致性,但表现出复杂多样性,与乳腺肿瘤相关抗原无明显相关,其机制可能与乳腺癌个体化的全身和局部免疫应答相关,对乳腺癌外周血和肿瘤组织部位特异T细胞TRBV基因表达探讨可为乳腺癌的免疫机制和个体化治疗提供理论基础。
- 贺晓燕孙素红杨伟明唐文台马锐张天姚新生
- 关键词：TCR
- 特异性转移因子免疫活性检测被引量：2
- 2009年
- 目的检测及探讨特异性转移因子的免疫活性。方法免疫保护性试验检测甲型副伤寒特异性转移因子对甲型副伤寒沙门菌、伤寒沙门菌、福氏志贺菌、金黄色葡萄球菌攻击小鼠的不同保护作用,计算存活率。结果甲型副伤寒特异性转移因子对甲型副伤寒沙门菌攻击的小鼠的保护作用明显高于其它细菌攻击的小鼠,差异有统计学意义(P<0.05)。结论特异性转移因子的免疫活性既具有区别于非特异性转移因子的相对特异性,又具有针对特定抗原的绝对特异性。
- 周建伟孔翠罗军敏徐林马锐
- 关键词：特异性转移因子免疫活性免疫保护性试验
- 1、3、5月龄BALB/c小鼠的外周血与脾脏BCR H-CDR3组库的构成
- 2017年
- B细胞是机体适应性免疫的主要成分,是介导特异性体液免疫应答的主要细胞群,主要依靠B细胞受体(B cell receptor,BCR)与抗原发生应答反应。BCR的可变区为互补决定区(complementarity determining region,CDR)包括CDR1、CDR2、CDR3,其中CDR3具有最丰富的多样性。该文通过高通量测序并分析1、3、5月龄小鼠BCR重链(heavy chain,H)-CDR3组库的多样性、CDR3区的基因/氨基酸的组成特性和各亚家族的偏向取用等,结果发现,小鼠在发育过程中,其外周免疫器官(脾脏)和外周血BCR H-CDR3组库存在相应的动态变化。该研究探索了机体在发育过程中,BCR H-CDR3组库的构成变化,为病理条件下BCR H-CDR3组库的研究提供基础数据。
- 李月红潘雨蓉孙素红马龙石彬马锐姚新生
- 关键词：BALB/C小鼠
- “荧光定量PCR溶解曲线法”监测人TCRβ链CDR3谱系漂移技术的建立被引量：10
- 2009年
- 目的建立"荧光定量PCR溶解曲线分析技术"监测人外周血T细胞TCRβ链CDR3谱系漂移(单/寡/多克隆增生)。方法提取4例正常人、9例大肠癌患者外周血单个核细胞(peripheral blood mononuclear cell-PBMC)中的总RNA,逆转录成cDNA,以26个人TRBV基因家族设计上游引物,共同的TRBC基因设计下游引物,荧光定量PCR(FQ-PCR)扩增26个TRBV基因各家族CDR3谱系,溶解曲线法分析各家族CDR3谱系的单/寡/多克隆增生。结果正常人外周血T细胞TCRβ链26个家族CDR3表达频率不一致,各家族PCR产物的"溶解曲线谱型图"(melting curve spectratyping)呈现溶点不同的CDR3多态性,为多克隆增生的高斯分布;9例大肠癌患者的外周血TCRβ链CDR3谱系的26个家族CDR3表达频率不一致,有的患者部分家族呈缺失状态,患者各家族PCR产物的"溶解曲线谱型图"上,多数家族为多克隆增生的高斯分布,但每个患者均出现数量不等的单克隆和寡克隆增生家族。结论"荧光定量PCR溶解曲线分析TCR CDR3谱系漂移技术",方法稳定简便,能较好的监测正常人和临床样本外周血T细胞TCRβ链CDR3谱系漂移(单/寡/多克隆增生)。
- 马锐罗荣孙万邦姚新生
- 关键词：T淋巴细胞受体互补决定区3荧光定量PCR
- 甲型副伤寒特异性转移因子的制备和检定被引量：1
- 2010年
- 目的初步制备甲型副伤寒特异性转移因子(PA-STF),为临床提供紧急预防或辅助治疗甲型副伤寒的新型生物制剂。方法体内免疫法制备PA-STF,采用紫外分光光度计对PA-STF进行多波长扫描,以苔黑酚法和改良Lowry法分别检测PA-STF的核糖及多肽含量,并进行无菌试验、热原质试验和安全试验等,以免疫保护性试验检定其免疫学活性。结果 PA-STF的理化性状符合《中国生物制品》(2000版)的要求标准;免疫保护性试验中,灌服PA-STF的小鼠存活率均明显高于灌服nTF和NS的小鼠的存活率(P<0.05)。结论成功制备了PA-STF,该制剂可转移针对甲型副伤寒沙门菌的特异性免疫应答,增强小鼠抗甲型副伤寒沙门菌的免疫力。
- 周建伟罗军敏孙万邦马锐田丹
- 关键词：甲型副伤寒特异性转移因子检定
- 抗病毒治疗对CHB患者外周血TCRβ链CDR3谱系的影响被引量：4
- 2014年
- 目的:分析慢性乙型肝炎(CHB)患者抗病毒治疗前后T淋巴细胞受体(TCR)β链各家族互补决定区3(CDR3)谱系的变化,了解抗病毒治疗前后T细胞应答的变化。方法:采用荧光定量PCR(FQ-PCR)溶解曲线法对11例CHB患者抗病毒治疗前后外周血单个核细胞(PBMC)T淋巴细胞受体β链可变区(TCR BV)基因各家族CDR3谱系进行分析,了解抗病毒治疗前后T细胞应答的变化。分析TCR CDR3谱系与CHB患者血清病毒载量的关系。结果:11例CHB患者抗病毒治疗后多个TCR CDR3谱系均出现了不同程度偏移。低病毒载量组(HBV DNA≤104拷贝/ml)治疗后谱型偏移率显著高于高病毒载量组(HBV DNA≥105拷贝/ml)。结论:CHB患者抗病毒治疗后单寡谱型偏移率与治疗前血清HBV DNA的水平相关。
- 陈宇姚新生邱隆敏马锐庄勤建吕红伍绍强
- 关键词：T淋巴细胞受体互补决定区
- 流感病毒在四个肿瘤传代细胞系中增殖情况的比较
- 2001年
- 目的 观察流感病毒在 4种肿瘤细胞系中的增殖情况 ,选择敏感的细胞系。方法 用不同稀释度的流感病毒感染 4种肿瘤细胞 ,用血球吸附实验比较流感病毒在 4种肿瘤细胞中的增殖情况。结果 流感病毒对Pc12细胞和Mcloy细胞不敏感 ,对JEC细胞最敏感 ,对OMC6 85细胞次之。结论 对流感病毒的研究工作中可试用这两株本院建立的肿瘤细胞系 (JEC细胞和OMC 6 85细胞系 )来分离培养及鉴定。
- 马锐
- 关键词：流感病毒肿瘤细胞系增殖
- 慢性乙型肝炎患者外周血及肝组织中T淋巴细胞受体β链互补决定区3谱系分析被引量：5
- 2010年
- 目的 分析慢性乙型肝炎（CHB）患者外周血及肝组织T淋巴细胞受体（TCR）β链各家族互补决定区3（CDR3）谱系的变化,了解CHB患者T淋巴细胞克隆增生的情况.方法 采用荧光定量PCR（FQ-PCR）溶解曲线法分析4例健康对照者及11例CHB患者外周血单个核细胞（PBMC）及肝组织T淋巴细胞受体β链可变区（TRBV）基因各家族CDR3谱系漂移情况,比较11例CHB患者TCR β链可变区各家族外周血及肝组织CDR3谱系漂移异常率.率的比较采用卡方检验.结果 11例CHB患者PBMC及肝组织TRBV各家族CDR3溶解曲线谱型图出现数量不等、形态不一的单峰、寡峰、偏峰及极低水平或缺失等现象,肝组织TRBV家族CDR3的谱系漂移异常率明显高于外周血的异常率（x2=23.246,P＜0.01）,在同一患者的外周血及肝组织中发现部分相同的TRBV亚家族表达,TRBV13.1、BV17和BV22同时被多例CHB患者的外周血及肝组织限制性取用.结论 CHB患者PBMC及肝组织中的T淋巴细胞均存在不同程度的克隆增生,部分TRBV亚家族被多例CHB患者外周血及肝组织同时限制性取用.
- 伍绍强姚新生邱隆敏马锐毕晓英陈宇
- 关键词：互补决定区
- 甲型流感病毒H_3N_2诱导人子宫内膜腺癌细胞凋亡的实验研究被引量：6
- 2007年
- 目的探讨甲型流感病毒H3N2对人子宫内膜腺癌细胞系(endometrialadenocarcinomacelllines,JEC)细胞的凋亡诱导作用及机制。方法取不同血凝单位的H3N2感染JEC细胞,经HE染色、琼脂糖凝胶电泳以及流式细胞术等方法检测细胞凋亡情况,并用免疫细胞化学法检测H3N2对JEC细胞Fas、FasL及TGF-β表达的影响。结果感染后的JEC在形态上呈现凋亡变化;电泳出现梯状条带;流式细胞术显示细胞凋亡率随病毒感染时间的延长而降低,且有随着病毒浓度增加而增高的趋势。免疫细胞化学法示病毒感染后JEC细胞的Fas染色增强,TGF-β染色减弱,但FasL始终没有表达。结论甲型流感病毒H3N2能够诱导JEC细胞凋亡,此作用与病毒浓度及感染时间有一定关系,其机制可能与Fas和TGF-β的表达有关。
- 王欢吴中明马锐王玉
- 关键词：甲型流感病毒细胞凋亡
- 多系统萎缩患者TCR α链CDR3谱系的荧光定量PCR溶解曲线被引量：1
- 2010年
- 目的:利用荧光定量PCR溶解曲线分析技术检测1例多系统萎缩患者TCRα链CDR3谱系。方法:提取1例多系统萎缩患者和1例正常人外周血单个核细胞(peripheral blood mononuclear cell,PBMC)中的总RNA,逆转录成cDNA,以32个人TCRα链胚系可变区基因家族(TRAV)设计上游引物,共同的TCRα链恒定区基因家族(TRAC)设计下游引物,荧光定量PCR(FQ-PCR)扩增32个TRAV基因各家族CDR3谱系,溶解曲线法分析各家族CDR3谱系的单、寡、多克隆增生,挑选单克隆进行PCR扩增,扩增产物行普通琼脂糖凝胶回收后测序分析。结果:多系统萎缩患者和正常人PBMC的32个TCRα链TRAV家族CDR3谱型的FQ-PCR产物的各家族相对定量表达不一;正常人的32个TCRα链TRAV家族CDR3谱型的溶解曲线图表现为多个峰型的高斯分布,多系统萎缩患者的TRAV10、TRAV15、TRAV29家族CDR3谱型的溶解曲线表现为单峰的克隆性增生,其他家族为多峰、寡峰的多克隆及寡克隆增生,未出现缺失的家族,对单峰的TRAV15家族的测序得到的CDR3区的氨基酸组成为:SAIYFCAEDRDSTLTFG。结论:该多系统萎缩患者的PMBC中,存在TCRα链CDR3谱系漂移。
- 田丹孙永萍汤贤英马锐姚新生
- 关键词：多系统萎缩互补决定区荧光定量PCR
