颛孙丹丹
- 作品数:3 被引量:2H指数:1
- 供职机构:湖南农业大学生物安全科学技术学院更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金国家重点基础研究发展计划更多>>
- 相关领域:生物学更多>>
- 通过染色体整合表达古菌乙酰化酶合成N-末端乙酰化胸腺肽β4被引量:2
- 2011年
- 胸腺肽β4(Tβ4)是N-末端乙酰化的43肽,具有多种重要生物学功能.其生物合成存在两大难点,即乙酰化修饰和小分子肽的表达.本研究发现来自古菌Sulfolobus solfataricus的乙酰化酶ssArd1可以催化Tβ4的N-末端乙酰化修饰.利用Red同源重组技术将ssArd1基因表达盒整合至E.coli BL21(DE3)染色体的lpxM位点上,构建了可以实现Tβ4N-末端乙酰化修饰的新型宿主E.coli BDA.将Tβ4编码基因融合在改造的微型Spl DnaX Intein的N端,并在Intein的C端添加His标签,构建了表达载体pET-Tβ4-Intein.在E.coli BDA中表达的融合蛋白,经镍亲和层析纯化后用β-巯基乙醇诱导融合蛋白切割释放小分子多肽,获得了具有N-末端乙酰化的Tβ4.
- 曹赛戴红梅孙旭颛孙丹丹和金周司信喜李树龙方宏清陈惠鹏谢达平周长林
- 关键词:乙酰化酶INTEIN
- rimJ基因缺失不影响大肠杆菌BL21(DE3)生长的温度敏感性
- 2010年
- 目的:研究rimJ基因对大肠杆菌BL21(DE3)菌株生长的温度敏感性的影响。方法:利用SceⅠ-Red同源重组技术将大肠杆菌BL21(DE3)基因组中的rimJ基因缺失,得到rimJ缺失突变菌;比较缺失突变株和原始菌株在不同温度(25℃、37℃、42℃)下的最大比生长速率,利用统计学方法分析rimJ基因的缺失对BL21(DE3)菌株生长的温度敏感性是否有影响。结果:rimJ基因被成功敲除;统计分析结果表明缺失突变株和原始菌株的最大比生长速率没有明显区别。结论:rimJ基因缺失对大肠杆菌BL21(DE3)生长的温度敏感性无影响。
- 颛孙丹丹方宏清戴红梅李树龙谢迟陈惠鹏
- 关键词:大肠杆菌BL21(DE3)比生长速率温度敏感性
- BL21(DE3)菌株rimJ基因敲除与Nα-乙酰转移酶底物特异性研究
- N-末端乙酰化修饰是蛋白最主要的修饰方式之一,本文主要内容是研究乙酰化酶基因rimJ缺失对大肠杆菌BL21(DE3)生长的温度敏感性影响以及两种原核乙酰化酶RimJ和NAT的底物特性。 一、通过设计长度为100...
- 颛孙丹丹
- 关键词:温度敏感性
- 文献传递