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顾怡珺
作品数:
5
被引量:12
H指数:2
供职机构:
上海交通大学附属儿童医院
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发文基金:
国家教育部博士点基金
上海市自然科学基金
国家自然科学基金
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相关领域:
医药卫生
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合作作者
周君梅
上海市儿童医院
陈方
上海市儿童医院
张胜利
上海市儿童医院
吴静
上海市儿童医院
王雪
上海市儿童医院
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上海交通大学...
作者
5篇
顾怡珺
5篇
周君梅
4篇
陈方
2篇
余玲
2篇
王雪
2篇
吴静
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张胜利
1篇
张艳阳
1篇
张明庆
传媒
4篇
中华小儿外科...
1篇
中华医院管理...
年份
1篇
2014
1篇
2013
2篇
2012
1篇
2011
共
5
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应用温度敏感型培养皿获得尿道下裂患儿尿源性细胞膜片的研究
被引量:1
2012年
目的探讨通过Nunc Upcell温度敏感型培养皿获得尿道下裂患儿尿源性细胞膜片的可行性。方法排尿时,对尿道下裂患儿尿源性细胞进行收集和原代培养,传代后计数细胞并绘制生长曲线,观察细胞形态学特征,RT-PCR、细胞免疫荧光染色鉴定尿源性细胞特异mRNA及蛋白表达情况;将尿道下裂患儿尿源性细胞转移入Thermo公司的Nunc Upcell中,根据温度的变化获得该细胞的细胞膜片。结果镜下观察和生长曲线图显示:尿道下裂患儿来源的尿源性细胞具有与正常人的尿源性细胞类似的体外增殖能力,培养至第十代生长仍很旺盛,可以达到10^9个细胞,能够满足组织工程所需要的细胞数量;2组细胞具有类似的群体倍增时间;RT-PCR和细胞免疫荧光染色显示这2组尿源性细胞均表达尿道上皮细胞和平滑肌细胞表面标志物;利用NuncUpcell温度敏感型培养皿可以转移得到完整的细胞膜片,且转移后的细胞仍保持旺盛的增殖能力。结论尿道下裂患儿来源的尿源性细胞可在体外大量增殖,可作为一种新型的种子细胞用于泌尿系统组织工程;结合使用新型的NuncUpcell温度敏感型细胞培养皿,可获得尿道下裂患儿尿源性来源细胞的细胞膜片,为将来进行尿道缺损修复的动物及临床试验奠定了良好基础。
王雪
周君梅
张胜利
余玲
顾怡珺
吴静
张明庆
陈方
关键词:
细胞培养
我院生物样本库“一病一卡”管理制度的建立与应用
被引量:5
2013年
当今,转化医学已广受关注并进入迅猛发展的时期。而医学标准化、高质量的人类疾病生物样本库是极其珍贵的资源,是基础与临床研究的源头,是实现转化医学的核心环节。我国政府虽十分重视生物样本库的建设,但目前其尚处于初创阶段,各家样本库大多存在管理混乱、缺乏标准化操作流程等问题。如何解决这些问题,并进一步对样本库进行规范化建设和管理,至关重要。我院于2011年底开始筹建生物样本库,同时开始建立相关标准化管理制度和技术规范。我院为综合性儿童医院,各系统病种繁多,样本的采集几乎涉及每一个临床科室。为了从源头上保证样本的质量,我们在样本的采集阶段建立了“一病一卡”的管理制度,保证了样本采集、运送和接收过程的科学化和标准化。试用近1年来,反响颇佳,现总结如下。一、“一病一卡”
吴静
顾怡珺
周君梅
关键词:
生物样本
人类疾病
人隐睾特异性诱导多能性干细胞体外向生殖细胞定向分化的初步研究
被引量:2
2014年
目的 将人隐睾特异性诱导多能性干细胞在体外定向分化形成生殖细胞.方法 将人隐睾特异性诱导多能性干细胞在去除饲养层细胞的条件下进行贴壁培养,诱导液中加入BMP4因子,诱导的不同阶段收集分化后的细胞进行细胞免疫染色和生殖细胞特异基因表达的检测.结果 人隐睾特异性诱导多能性干细胞在体外可分化形成DAZL阳性细胞,加入BMP4诱导分化的细胞中,DAZL阳性细胞数明显高于未加入BMP4的细胞,但没有观察到SCP3阳性细胞;加入BMP4诱导分化后的细胞DAZL基因的表达量是未加入BMP4的2倍,生殖分化后期相关基因VASA表达略有上升,TEKT1的表达无明显变化;诱导分化实验尚未形成单倍体的精子.结论 BPM4因子可促进人隐睾特异性诱导多能性干细胞在体外分化形成原始生殖细胞,为将来继续诱导形成单倍体精子打下了重要的基础,为隐睾的防治提供借鉴.
张艳阳
包杰文
顾怡珺
陈方
周君梅
关键词:
隐睾
多潜能干细胞
细胞分化
生殖细胞
隐睾和尿道下裂患儿尿源性细胞的培养和鉴定
被引量:5
2012年
目的体外培养健康人及隐睾和尿道下裂患儿尿源性细胞并对其生物学特性进行鉴定。方法分别收集健康人、隐睾和尿道下裂患儿的清洁尿液,离心后收集沉渣,接种培养,连续传代。对培养得到的细胞进行细胞免疫荧光染色、核型分析、短串连重复序列分析等实验鉴定其生物学特性。结果倒置相差显微镜下观察细胞的生长,细胞在体外培养条件下增殖旺盛,根据其传代时的细胞数绘制的生长曲线显示:隐睾和尿道下裂患儿的尿液来源的细胞与健康人尿液来源的细胞具有相似的体外增殖能力;细胞免疫荧光染色显示:尿源性细胞表达尿道上皮细胞表面标志物;这些细胞均保持正常的核型;短串连重复序列实验表明:这些细胞分别具有自身独特的基因座,其DNA分型在ATCC、JCRB、DSMZ细胞库中均未找到与其细胞分型100%相匹配的细胞。结论无论是健康人还是疾病患儿的尿液中均能培养出大量细胞,这些细胞以上皮细胞为主;这些细胞核型正常,携带有相应个体独一无二的遗传信息,可作为简便无创的细胞来源,为研究个体特异的、疾病特异的机制研究和临床诊断提供来源。
周君梅
王雪
张胜利
余玲
顾怡珺
陈方
关键词:
尿液
细胞培养
疾病特异性iPS细胞的研究进展和在小儿外科领域的应用展望
被引量:2
2011年
人体发育是由受精卵基因组按照特定时空顺序进行选择性的表达和调控而成。胚胎发育的早期阶段是器官发生的关键时期,各种遗传和环境的异常改变常会造成各种身体外形或内脏结构、功能的先天性畸形,但由于伦理和技术的限制,很难对这一早期阶段的发育过程进行在体研究。因此,寻找合适的研究模型,用于研究人类胚胎早期发育异常造成的先天性畸形的发病机制至关重要。
顾怡珺
周君梅
陈方
关键词:
外科领域
IPS
特异性
先天性畸形
小儿
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