霍金耀
- 作品数:22 被引量:124H指数:4
- 供职机构:河南诸美种猪育种集团有限公司更多>>
- 发文基金:河南省教育厅自然科学基金国家自然科学基金更多>>
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- 对猪瘟并发魏氏梭菌感染的诊疗体会
- 2011年
- 河南省周口市某猪场,共有母猪60头,总存栏量为900头左右,2010年1,月18号下午,畜主发现有7头(在两个圈中)25千克左右的猪突然发病,并死亡两头,另有一头送到门诊后很快死亡,此次发病的几头猪以前精神不是很好。经询问,畜主曾用干扰素、黄芪多糖注射液、磺胺类药物治疗,效果极差。在免疫接种方面,该场只接种过猪瘟、伪狂犬疫苗以及猪丹毒一猪肺疫二联苗。
- 霍金耀赵静
- 关键词:猪瘟魏氏梭菌黄芪多糖注射液诊疗并发
- PEDV流行株N基因主要抗原表位原核表达及ELISA方法的建立
- 本研究利用PCR技术扩增PEDV N基因部分片段,通过原核表达获得重组N蛋白,作为包被抗原,初步建立起检测PEDV抗体的间接ELISA,为进一步研制PEDV ELISA抗体检测试剂盒奠定了良好基础。
- 郑逢梅赵军霍金耀李欢杨霞常洪涛杜季梅王晓梦王川庆
- 关键词:核衣壳蛋白原核表达
- 文献传递
- PEDV流行株N基因主要抗原表位原核表达及ELISA方法的建立
- <正>猪流行性腹泻(porcine epidemic diarrhea,PED)是由猪流行性腹泻病毒(porcine epidemic diarrhea virus,PEDV)引起的一种接触性肠道传染病,临床上以猪的急性...
- 郑逢梅赵军霍金耀李欢杨霞常洪涛杜季梅王晓梦王川庆
- 文献传递
- 猪流行性腹泻病毒纤突蛋白基因克隆与序列分析
- S蛋白被认为对PEDV的生物学特性有重要影响。在本研究中,对5株PEDV河南株的S全基因序列进行分析。由于S基因S1区域的N’端有15个核苷酸的插入和6个核苷酸的缺失,因此,5株PEDV河南株的S全基因均比参考株(CV7...
- 郑逢梅赵军常洪涛陈陆王新卫杨霞霍金耀刘红英姚惠霞王川庆
- 关键词:猪流行性腹泻病毒S基因系统进化分析
- 文献传递
- 猪流行性腹泻病毒检测方法建立及基因变异分析
- 2010年底开始,猪病毒性腹泻在我国许多地区出现暴发流行,为调查此次腹泻疫情暴发的原因,本试验建立了可同时检测PEDV、TGEV、GARV和PKV的多重RT-PCR方法,用于临床腹泻猪粪便样本的检测。为提高对PEDV检测...
- 霍金耀
- 关键词:猪流行性腹泻病毒荧光定量PCR检测系统进化分析抗体监测
- 文献传递
- PEDV流行株N基因主要抗原表位原核表达及ELISA方法的建立被引量:9
- 2014年
- 为建立检测猪流行性腹泻病毒(PEDV)N蛋白抗体的ELISA方法,应用RT-PCR从腹泻仔猪样本中扩增获得了1段PEDV河南流行毒株N基因全长序列,根据对其氨基酸序列的抗原性分析结果,将N基因上2个大的抗原表位区(112~321位氨基酸)克隆至原核表达载体pET-32u,构建pET-32a-N重组质粒并转化至宿主菌BL21(DE3)中。将重组菌在37℃条件下加入IPTG进行诱导使该蛋白获得了高效表达,表达产物为融合蛋白,相对分子质量约41300。Western-blot分析表明,所表达的蛋白可与抗PEDV全病毒小鼠阳性血清发生反应。以纯化的重组N蛋白作为包被抗原建立了检测PEDV抗体的间接ELISA方法,抗原最佳包被量0.226ug/μL,血清最佳稀释度为1:100,二抗最佳稀释度为1:2000,待检血清n450值≥0.28判定为阳性。国内首次用该方法对临床猪血清样本进行了检测,母猪血清PEDV抗体阳性率为84.26%(166/197),仔猪血清阳性率为27.93%(31/111)。结果表明,建立的间接ELISA方法特异性、灵敏性和可重复性良好,可用于-1盏床上PEDV抗体水平的监测和PED流行病学调查。
- 郑逢梅赵军霍金耀李欢杨霞陈陆常洪涛王新卫刘红英杜季梅姚慧霞王川庆
- 关键词:PEDVN基因原核表达抗体监测
- 河南省猪流行性腹泻病毒分子进化分析
- 引言/目的近年来,猪流行性腹泻(porcine epidemic diarrhea,PED)在我国不断发生爆发,且流行的季节性越来越不明显。为了解河南省PEDV基因变异情况,本研究对分离于河南省不同地区11株PEDV野毒...
- 霍金耀郑逢梅陈陆常洪涛赵军王川庆
- 猪圆环病毒病并发猪瘟的诊断与防制分析
- 2011年
- 发病时间:2011年1月26日
发病地点:河南省南阳市郊某猪场
发病情况:该猪场共有母猪80头,总存栏约600头,三个月前保育猪曾发生过猪瘟,紧急接种猪瘟疫苗后病情好转。保育舍现存栏200余头,均于30日龄接种猪瘟兔化弱毒疫苗2头份。本次发病共有140头,死亡约30头,畜主曾用庆大霉素、磺胺类药物以及黄芪多糖注射液治疗,效果不佳。另外经询问得知,该场发病前偶尔使用稍带霉变的玉米。
- 霍金耀赵静
- 关键词:猪瘟疫苗猪圆环病毒病猪瘟兔化弱毒疫苗黄芪多糖注射液发病时间并发
- 猪流行性腹泻病毒、传染性胃肠炎病毒、A群轮状病毒和嵴病毒多重RT-PCR检测方法的建立及临床应用被引量:11
- 2013年
- 本研究建立了可同时检测猪流行性腹泻病毒(Porcine epidemic diarrhea virus,PEDV)、传染性胃肠炎病毒(Transmissible gastroenteritis Virus,TGEV)、A群轮状病毒(Group A rotavirus,GARV)和猪嵴病毒(Porcine kobuvirus)的多重RT-PCR方法。检测中,建立的多重RT-PCR方法能够检测到500pg的TGEV、PEDV、GARV和猪嵴病毒等量混合RNA模板,与常规的单一RT-PCR检测结果基本相同(检测TGEV、PEDV、GARV和猪嵴病毒的灵敏性分别为100%、100%、93.33%和96.67%,特异性均为100%)。结果表明,建立的多重RT-PCR方法敏感性和特异性良好,可作为临床上猪病毒性腹泻病因快速、高效的诊断工具。应用该方法对2010-2012年华中地区190份腹泻仔猪样本进行检测,PEDV、TGEV、GARV和猪嵴病毒的阳性率分别为62.11%、0.53%、7.37%和82.11%。混合感染方面,PEDV和猪嵴病毒混合感染率为47.89%,PEDV和GARV混合感染率为4.74%,GARV和猪嵴病毒混合感染率为7.37%,PEDV、GARV和猪嵴病毒混合感染率为4.74%,未发现TGEV与其它3种病毒的混合感染情况。另外,有27份样本中仅检出PEDV(14.21%),57份样本只检出猪嵴病毒(30%)。分析表明,我国自2010年底大面积暴发的病毒性腹泻是多病原混合感染造成的,主要病原为PEDV,猪嵴病毒在其中所起作用尚待进一步验证和研究。
- 霍金耀郑逢梅陈陆余秋颖常洪涛陈文定明星郑关民赵军王川庆
- 关键词:PEDVTGEV
- 断奶母猪乏情原因分析及防治措施被引量:3
- 2015年
- 母猪断奶前后及时减料,短期优饲、运动、公猪诱情相结合以及科学的饲养管理,能有效防止断奶母猪乏情所带来的经济损失。从管理的角度讲,断奶-发情间隔成为生产者评估母猪从上一个妊娠期恢复情况好坏的第一个指标,也是确定哺乳期管理对断奶-发情时间间隔到底有多大帮助的一个重要指标。但在养猪生产中,断奶母猪发情延迟或不发情的情况很普遍,断奶-发情间隔天数增加,直接导致母猪的非生产天数增加,饲养成本升高,严重影响猪场经济效益。本文对临床上引起断奶母猪不发情的常见原因进行分析,并提出相应改进措施,供同行参考。
- 霍金耀郑逢梅
- 关键词:母猪乏情断奶前母猪不发情发情间隔