雷雪
- 作品数：4 被引量：4H指数：2
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- caveolae对血管平滑肌细胞增殖的影响及可能机制被引量：2
- 2013年
- 目的观察caveolae对血管平滑肌细胞增殖的影响及可能机制。方法取培养第3代VSMCs培养皿中培养。干扰组细胞加甲基-β-环糊精(methyl-β-cyclodextrin,MβCD)(5 mmol/L,DMEM配置)作用2 h;对照组加入与MβCD等量的DMEM作用2 h后以DMEM冲洗3次后正常培养48 h。采集细胞进行RT-PCR检测Caveolin-1、pSmad2 mRNA表达变化,Western blot法检测Caveolin-1、pSmad2蛋白表达变化,免疫组化检测Caveolin-1、TGF-β受体1(TGF-βR1)在细胞中的表达分布,CCK-8法检测细胞增殖能力。结果 Caveolin-1在MβCD干扰后,基因和蛋白表达水平明显下降(P<0.01),并且以细胞膜和细胞质高表达为主;而Smad2在MβCD干扰后,基因和蛋白表达水平明显上升,与正常对照组相比,差异有统计学意义(P<0.01);并且TβR-1在MβCD干扰后细胞内表达增加。CCK-8检测结果显示,MβCD干扰后,VSMCs增殖被显著抑制(P<0.01)。结论破坏caveolae结构后可以抑制VSMCs的增殖,其可能的机制是caveolae被破坏后,TGF-β/Smad信号通路增强,不能抑制Smad2磷酸化和下游的信号转导,从而达到抑制VSMCs的增殖的作用。
- 李正杨周政杨辉刘俊赖挺安家印雷雪
- 关键词：血管平滑肌细胞小窝转化生长因子
- 甲基-β-环糊精对内皮素-1诱导大鼠颈总动脉血管平滑肌细胞胞内钙浓度变化的影响
- 2014年
- 目的研究甲基-β-环糊精(methyl-β-cyclodextrin,MβCD)对内皮素-1(endothelin-1,ET-1)诱导大鼠颈总动脉血管平滑肌细胞(vascular smooth muscle cells,VSMCs)胞内钙离子浓度([Ca2+]i)变化的影响。方法原代培养大鼠颈总动脉平滑肌细胞,通过形态学和免疫荧光染色鉴定。再通过炎症因子TNF-α(100μg/L)和MβCD(5 mmol/L)的不同处理将细胞分为4组:PSS液+ET-1组(A组)、PSS液+MβCD+ET-1组(B组)、PSS液+TNF-α+ET-1组(C组)、PSS液+TNF-α+MβCD+ET-1组(D组)。最后各组细胞经Furo-2/AM染色后,采用TILL荧光钙成像系统检测活细胞在ET-1(100 nmol/L)刺激下胞内钙荧光强度的变化情况,R(F 340 nm/F 380 nm)值代表单细胞胞内钙荧光强度比值。结果TILL荧光钙成像系统检测结果显示A^D组细胞静息状态荧光强度R0值分别为(0.591 6±0.082 0)、(0.575 3±0.079 0)、(0.655 1±0.083 7)、(0.610 5±0.080 4),组间比较无统计学差异(P>0.05)。各组细胞经ET-1(100 nmol/L)刺激后胞内钙荧光强度分别较静息状态上升:A组上升(115±17)%,B组上升(67±15)%,与A组比较差异有统计学意义(P<0.05);C组上升(279±21)%,与A组比较差异有统计学意义(P<0.01);D组上升(88±16)%,与C组比较差异有统计学意义(P<0.01)。结论 MβCD破坏caveolae结构后明显降低了VSMCs胞内钙离子浓度升高程度,caveolae可能是抑制脑血管痉挛发生的重要靶点。
- 雷雪阴金波刘俊李正杨安家印周政
- 关键词：钙离子浓度内皮素-1
- Rock信号通路参与TNF-α刺激兔基底动脉平滑肌增殖被引量：2
- 2013年
- 目的探索Rock信号通路在肿瘤坏死因子α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)引起兔基底动脉血管平滑肌细胞(vascular smooth muscle cells,VSMCs)增殖中的作用。方法组织块法原代培养兔基底动脉VSMCs,TNF-α刺激VSMCs,Rho激酶(Rho kinase,Rock)抑制剂Y-27632预处理,CCK-8法检测细胞增殖变化,流式细胞仪检测细胞周期,免疫细胞化学观察增殖细胞核抗原(proliferating cell nuclear antigen,PCNA)在VSMCs的定位及表达变化,Western blot法检测细胞PCNA表达量的变化。结果细胞培养24 h后,与阴性对照组比较,20 ng/mL TNF-α处理可以显著增加VSMCs的增殖率(P<0.01),PCNA蛋白表达显著增高(P<0.01),S期+G2/M期细胞比例明显增加(P<0.05);加入Y-27632预处理后,与20 ng/mL TNF-α处理组相比,VSMCs的增殖率受到显著抑制(P<0.01),PCNA蛋白表达明显减少(P<0.05),S期+G2/M期细胞比例明显减少(P<0.05)。结论 TNF-α可促进VSMCs增殖和细胞周期进程,Rock抑制剂可阻滞TNF-α对VSMCs的这一作用,Rock信号通路参与TNF-α诱导的VSMCs增殖和细胞周期进程加速。
- 安家印周政刘俊杨辉雷雪李正杨
- 关键词：基底动脉血管平滑肌细胞RHO相关激酶类肿瘤坏死因子Α
- Caveolae对血管平滑肌细胞胞内钙浓度调节作用的研究
- 研究背景和目的: 蛛网膜下腔出血(subarachnoid hemorrhage,SAH)是由于外伤或颅内动脉瘤破裂导致的血液成分进入蛛网膜下腔后所引起的一组临床症状,而脑血管痉挛(cerebral vasospasm...
- 雷雪
- 关键词：蛛网膜下腔出血血管平滑肌细胞钙浓度小窝
- 文献传递
