隋丹丹
- 作品数：5 被引量：16H指数：2
- 供职机构：西北农林科技大学林学院更多>>
- 发文基金：国家林业公益性行业科研专项中央级公益性科研院所基本科研业务费专项长江学者和创新团队发展计划更多>>
- 相关领域：农业科学生物学更多>>
- 草兔卵透明带3(ZP3)基因真核表达载体的构建与表达被引量：1
- 2015年
- 【目的】利用基因重组技术将草兔卵透明带3基因(ZP3)构建到真核表达载体上,并在RK-13细胞中表达ZP3蛋白,为后期的免疫不育研究提供方便。【方法】提取草兔卵巢总RNA,采用RT-PCR方法克隆ZP3基因,将其与pEGFP-N1真核表达载体连接,构建pEGFP-N1-ZP3表达载体,并将载体转入RK-13细胞中进行ZP3表达。利用倒置荧光显微镜、RT-PCR和Western Bolt方法对重组ZP3蛋白表达情况进行观测。【结果】RT-PCR获得长为1 260bp的草兔ZP3基因;成功构建pEGFP-N1-ZP3重组质粒,将其转染RK-13细胞后表达出73ku的重组ZP3蛋白,RT-PCR验证和Western Bolt结果与ZP3基因的理论长度一致。【结论】首次构建了草兔ZP3基因真核表达载体并成功在真核细胞中表达重组ZP3蛋白。
- 吴景龙隋丹丹张冬辉周智敏李昊郑雪莉韩崇选
- 关键词：草兔免疫不育PEGFP-N1真核表达
- 草兔卵透明带3(ZP3)基因的克隆及序列分析被引量：6
- 2013年
- 根据GenBank中欧洲兔ZP3mRNA序列设计特异性引物,以草兔卵巢组织总RNA为模板,通过RT-PCR技术首次克隆得到草兔ZP3cDNA编码区,命名为hZP3(GenBank登录号:KC447289)。生物信息学分析表明:扩增出的hZP3基因编码序列长1 260bp,编码419个氨基酸,包含一个完整的开放阅读框(ORF)。与欧洲兔ZP3基因核苷酸一致性高达96%。预测的ZP3蛋白具有ZP家族典型特征。系统进化树显示其与欧洲兔亲缘关系最近,其次是啮齿目动物,符合物种进化规律。hZP3基因编码区的成功克隆,为进一步利用该基因通过免疫不育手段防治森林草兔危害提供了基础。
- 张浩韩崇选郑雪莉吴景龙隋丹丹
- 关键词：草兔克隆
- 枣疯植原体rp基因和secY基因序列分析被引量：7
- 2014年
- 【目的】基于核糖体蛋白基因(rp)和运输蛋白基因(secY),明确了陕西、山西及山东3省枣疯植原体的亚组分类地位。【方法】采集陕西、山西及山东3省枣产区的枣疯病样品,提取样品总DNA;设计引物对rpF1、rpF2、rpR1和secF1、secF2,对枣疯植原体的rp基因和secY基因进行PCR扩增及核苷酸序列测定与系统发育分析。【结果】获得枣疯植原体的rp基因和secY基因,大小分别为1 196和1 421bp。序列比对结果表明,陕西、山西及山东3个省枣疯植原体的rp基因和secY基因序列均一致;系统发育分析表明,这3省的枣疯植原体与樱桃致死黄化植原体(CLY5)和桃树黄化植原体印度株系(PY-In)的亲缘关系最近。【结论】以rp和secY基因作为植原体16SrRNA基因分类系统的辅助分子证据,将陕西、山西、山东的枣疯植原体归属到16SrⅤ-B亚组,明确三省内枣疯植原体的亲缘关系。
- 张磊韩翔隋丹丹吴景龙吴云锋韩崇选
- 关键词：枣疯病植原体
- 中华鼢鼠卵透明带3基因的分子克隆及原核表达分析
- 中华鼢鼠（Myospalax fontanierii）属于啮齿目仓鼠科鼢鼠属，为中国的特有物种。是分布在甘肃、陕西黄土高原地区最主要的有害生物之一。它常年生存于地下，依靠取食植物的根、茎、叶存活，给农田、草甸和森林带来严...
- 隋丹丹
- 关键词：中华鼢鼠卵透明带3RACE基因克隆原核表达
- 文献传递
