陈姗
- 作品数:3 被引量:5H指数:2
- 供职机构:南方医科大学珠江医院更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金广东省自然科学基金广东省科技计划工业攻关项目更多>>
- 相关领域:医药卫生更多>>
- BDNF-TAT融合蛋白在大肠杆菌中的表达纯化及脑中分布被引量:1
- 2011年
- 目的在大肠杆菌中表达并纯化BDNF.TAT融合蛋白,研究其靶向性及在脑中的分布。方法重组质粒PET-30(a)-BDNF—TAT转染至大肠杆菌BL21(DE3)pLysS中,IPTG诱导其表达后用SP-Sepharose阳离子交换柱纯化,纯化后蛋白用0.4m01/L精氨酸倍比稀释法复性。KM种小鼠采用随机数字表法分为给药组[尾静脉注射复性后BDNF.TAT融合蛋白4μg(适量生理盐水溶解)1、阴性对照组(尾静脉注射等体积生理盐水)和空白对照组(不进行任何处理),每组各3只。3h后提取小鼠脑组织全蛋白.Western blotting检测脑组织中BDNF-TAT表达,SABC免疫组化染色观察BDNF—TAT在脑组织中的分布。结果获得纯度约90%活性的BDNF—TAT融合蛋白。给药组BDNF-TAT蛋白的相对表达量为1.897±0.286,阴性对照组BDNF—TAT蛋白的相对表达量为0.615±0.234。空白对照组BDNF—TAT蛋白的相对表达量为0.335±0.154,比较差异有统计学意义(F=39.019,P=0.000)。免疫组化染色结果显示给药组BDNF-TAT主要分布于小鼠脑组织海马CA1、CA3和DG区.而阴性对照组和空白对照组中没有明显阳性染色。结论BDNF-TAT融合蛋白在大肠杆菌中以包涵体形式大量表达,并能通过外周给药靶向至小鼠脑组织。
- 罗道飞李文适陈姗季爱民
- 关键词:脑源性神经营养因子融合蛋白靶向性
- 聚乙烯亚胺介导siRNA分子体内外基因沉默VEGFR2表达被引量:2
- 2010年
- 应用阳离子聚合物聚乙烯亚胺(polyethyleneimine,PEI)包裹靶向小鼠VEGFR2基因的siRNA分子,以研究其体外基因沉默作用及不同给药途径的肿瘤生长抑制作用。采用共聚焦显微镜观察荧光染料CY3标记的siRNA分子的细胞内定位,RT-PCR和Western blotting检测VEGFR2mRNA和蛋白表达水平基因沉默效果,建立裸鼠皮下肿瘤模型比较经瘤内和尾静脉给予siVEGFR2/PEI抑制肿瘤生长的作用。共聚焦显微镜观察证实PEI能成功转染siRNA分子进入细胞质,siVEGFR2/PEI转染的MS1细胞中VEGFR2mRNA和蛋白表达水平明显下降,沉默效率分别为28.2%和23.6%。瘤内给与siVEGFR2/PEI组裸鼠肿瘤体积[(189.429±17.562)mm3]明显小于空白组[(365.844±20.713)mm3]和PEI静脉给药组[(315.507±20.491)mm3]。结果表明,PEI能有效介导siRNA分子转染进入细胞质并能特异性沉默靶基因的表达。未经组织靶向性修饰的PEI不具有肿瘤靶向作用,瘤内注射的抗肿瘤效应优于静脉给药途径,这为进一步研究PEI介导的siRNA分子体内基因沉默效应的机制和优化该给药系统临床治疗肿瘤应用奠定了基础。
- 杨欢车瓯陈姗孙靓季爱民
- 关键词:聚乙烯亚胺SIRNA基因沉默
- 2007~2010年广州地区35家三甲医院骨科非甾体抗炎药用药分析被引量:2
- 2012年
- 目的对广州地区35家三甲医院骨科非甾体抗炎药(non-steroidal anti-inflammatory drug,NSAIDs)使用情况进行用药分析与评价,为该类药物临床合理使用提供科学依据。方法对广州地区35家三甲医院骨科2007~2010年非甾体抗炎药的应用品种、用药金额、用药频度(DDDs)、日均费用(DDC)等进行统计分析。结果 2007~2010年骨科NSAIDs的使用品种、购药金额、用药频度均逐年增加,总用药金额增长率分别为17.2%、11.4%和17.6%,其中,塞来昔布和布洛芬的用药金额一直稳居第1位和第2位,不良反应较小的COX-2抑制剂的市场份额迅速上升,但长期使用的安全性尚待观察。结论 NSAIDs市场将进一步扩大,新型COX-2选择性抑制剂将具有广阔的市场前景。
- 陈姗季爱民
- 关键词:非甾体抗炎药用药分析用药金额用药频度日均费用