钦博
- 作品数：8 被引量：36H指数：3
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- 检测牛结核抗体的免疫胶体金试纸条及制备方法
- 本发明属于动物细菌学与动物传染病学技术领域。具体涉及一种检测牛结核抗体的免疫胶体金试纸条及其制备方法。本发明的试纸条是由样品垫、结合垫、硝酸纤维素膜、吸水垫和PVC背衬组装而成。在PVC背衬上按顺序依次粘附有样品垫、结合...
- 郭爱珍张书环陈焕春谭亚娣晁彦杰陈颖钰钦博吕文匡有吉
- 文献传递
- 牛IFN-γ原核表达、单克隆抗体制备及其ELISA检测方法的建立被引量：22
- 2007年
- 实验旨在建立牛重组IFN-γ（BovIFN-γ）的ELISA检测技术，为牛传染病的免疫学诊断提供新方法。PHA刺激体外培养的奶牛外周血白细胞，从培养细胞中提取总RNA，经过RT-PCR扩增出BovIFN-γ基因cDNA，进一步克隆至pET28a，转化大肠杆菌，经IPTG诱导，表达出预期大小（18kD左右）组氨酸标记蛋白，经鉴定为BovIFN-γ；以纯化的重组BovIFN-γ为免疫原，应用淋巴细胞杂交瘤技术，获得4株能稳定分泌抗BovIFN-γ单克隆抗体的细胞株，分别命名为A7、A10、G6与G10。免疫球蛋白亚类鉴定证明杂交瘤细胞所分泌的抗体均为IgG1，腹水效价在1：2^10×100～1：2^11×100之间。Western-blot分析显示，4株单抗均能特异性结合重组BovIFN-γ。ELISA试验表明，4株单抗只与融合蛋白BovIFN-γ反应，而不与非相关性蛋白Ag85B、ESAT-6-CFP-10、GM-CSF等发生反应。选取A10细胞株分泌的单克隆抗体、纯化的多克隆抗体及辣根过氧化物酶（HRP）标记的羊抗免IgG，建立了检测BovIFN-γ的双抗体夹心ELISA方法。实验结果表明，此方法检测敏感性达到2ng／mL，特异性良好，为进一步建立灵敏、特异的病原感染诊断方法奠定了基础。
- 李川谭亚娣陈颖钰胡巧云马艳张桂荣钦博晁彦杰陈焕春郭爱珍
- 关键词：单克隆抗体ELISA克隆
- 牛型分枝杆菌MPB70蛋白胶乳凝集方法的建立及应用
- 牛结核病是严重危害奶牛养殖业和人类食品安全的B类传染病,而现行的PPD皮试方法在特异性敏感性方面都存在不足。为了研究新型诊断试剂,提高诊断的特异性和敏感性,本研究用大肠杆菌工程菌表达了牛型分枝杆菌特异性抗原MPB70并提...
- 钦博万学济胡巧云喻正军晁彦杰郭爱珍陈焕春谭亚娣
- 关键词：牛型分枝杆菌牛结核病胶乳凝集法
- 文献传递
- 牛型分枝杆菌MPB70蛋白胶乳凝集方法的建立及应用被引量：11
- 2007年
- 为了研究牛结核病新型诊断试剂,提高诊断的特异性和敏感性,我们用大肠杆菌工程菌表达了牛型分枝杆菌特异性抗原MPB70并提纯蛋白建立了牛结核病乳胶凝集试验(LAT)诊断方法。MPB70是一种牛型分枝杆菌特异性分泌而卡介苗BCG缺失的蛋白质,热稳定性好,用此蛋白建立的乳胶凝集方法具有良好的敏感性、特异性以及较长的保存期,检测70份临床奶牛血清,与皮内变态反应和间接血凝方法相比较分别具有71.4%和88.6%的符合率。该方法还可鉴别诊断自然感染和疫苗免疫接种。我们建立的牛型分枝杆菌MPB70蛋白乳胶凝集试验诊断方法将分子生物学手段和经典试验方法有机结合,为临床快速检测牛结核病血清特异性抗体水平提供了行之有效的方法,。
- 钦博万学济胡巧云喻正军晁彦杰郭爱珍陈焕春谭亚娣
- 关键词：牛型分枝杆菌牛结核病MPB70胶乳凝集间接血凝
- 一种适用于牛结核抗体检测的试剂盒及应用
- 本发明属于动物免疫学技术领域。公开了一种适用于牛结核检测试剂盒及其制备方法，所述的试剂盒，包含盒体、设在盒体内的V形底96孔反应板、牛结核分支杆菌野毒感染标准阳性血清、健康牛阴性血清、血清稀释液和1％致敏绵羊红细胞悬液。...
- 谭亚娣胡巧云晁彦杰钦博张桂容陈焕春张书环
- 文献传递
- 间接ELISA检测牛分枝杆菌抗体方法的建立及初步应用被引量：9
- 2007年
- 针对现行牛结核病检疫方法结核菌素皮内变态反应(TST)的不足,本研究选用牛分枝杆菌特异性抗原MPB83、MPB70及CFP10与ESAT-6融合蛋白(CFP10-ESAT-6)分别建立了检测牛分枝杆菌特异抗体的间接酶联免疫吸附方法(ELISA)。上述3种抗原中一种以上抗原的特异性抗体为阳性时,即可判断为结核检测阳性。以TST为标准,判断ELISA方法的敏感性与特异性。结果证明,ELISA方法具有较好的敏感性(71.4%)。对ELISA检测为强阳性的奶牛进行细菌分离,并对5头结核菌分离阳性奶牛进行TST检测,结果有3头为TST阳性,2头可疑,显示出ELISA方法对严重感染牛的检测较TST具有更高的敏感性。由于TST与ELISA分别以细胞免疫与体液免疫为基础,两种检测方法结合应用可进一步提高牛结核病的检出率。
- 张桂荣万学济陈颖钰吴波晁彦杰吕文钦博郭爱珍陈焕春谭亚娣
- 关键词：牛分枝杆菌ELISAMPB70检疫
- 牛结核病胶乳凝集方法的建立以及临床的初步应用
- 结核病是一种严重危害人类健康的慢性呼吸道传染病，其病原是结核分枝杆菌。据WHO估计全球约有20亿人感染，其中5％-10％会发展成活动性肺结核，每年新病例达800-1，000万，约300万人死亡。牛结核病（bTB）是由牛分...
- 钦博
- 关键词：分枝杆菌牛结核病原核表达胶乳凝集变态反应
- 文献传递
- 检测牛结核抗体的免疫胶体金试纸条及制备方法
- 本发明属于动物细菌学与动物传染病学技术领域。具体涉及一种检测牛结核抗体的免疫胶体金试纸条及其制备方法。本发明的试纸条是由样品垫、结合垫、硝酸纤维素膜、吸水垫和PVC背衬组装而成。在PVC背衬上按顺序依次粘附有样品垫、结合...
- 郭爱珍张书环陈焕春谭亚娣晁彦杰陈颖钰钦博吕文匡有吉
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