金灵
- 作品数：11 被引量：12H指数：2
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- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 抗MS_2多聚酶单克隆抗体的制备及鉴定
- 1992年
- 应用MS_2-X蛋白(含MS_2多聚酶的98个氨基酸,乙型肝炎X抗原的145个氨基酸)免疫小鼠,取其脾细胞与Sp2/0细胞融合后,经阳性克隆检测,克隆化及体外传代培养,共筛选出了2株抗MS_2多聚酶的单克隆抗体,这在国内尚未见报道。经ELISA及Western Blot实验证实,此2株单克隆抗体只能与MS_2多聚酶发生反应,而不能与乙型肝炎X抗原和正常细菌蛋白发生反应,其抗体亚类为IgG_1,腹水效价为1∶32000～1∶64000。应用抗MS_2单克隆抗体,可以建立亲和层析技术,高效快速地将基因工程表达的MS_2多聚酶—目的蛋白融合蛋白,从大量的细菌蛋白中纯化出来,这对深入研究目的蛋白的结构与功能具有十分重要的作用。
- 吴在川陈万荣金灵张习坦蒋豫图
- 关键词：杂交瘤单克隆抗体
- 乙型肝炎病毒的X蛋白在大肠杆菌中的高效表达被引量：5
- 1989年
- X基因是乙型肝炎病毒(HBV)的四个开读框架之一,编码一个含154个氨基酸的蛋白。将含有编码145个氨基酸的X基因主要部分用Bam HI及Bgl Ⅱ酶切,获得Bam HI-Bgl Ⅱ HBV DNA片段(584bp),将其插入到质粒pEx31的Bam HI切点,构建成一个在λPL启动子控制下表达MS2-X融合蛋白的质粒—pEx31-HBX。含此质粒的大肠杆菌可产生占菌体蛋白总量40％的28千道尔顿融合蛋白。用抗X标准抗血清证实,此融合蛋白具有X的抗原活性,并制备了抗融合蛋白的抗血清。这是在国内首次成功地高效表达乙型肝炎病毒的X蛋白。
- 金灵马贤凯
- 关键词：乙肝病毒X基因大肠杆菌
- α_1－抗胰蛋白酶PCR定点突变体的构建与分析
- 1995年
- 利用一对寡核苷酸引物，对含有α＿１－抗胰蛋白酶（α＿１－ＡＴ）ｃＤＮＡ基因的质粒进行定点诱变，使３５８Ｍｅｔ－ＡＴＧ突变为Ａｒｇ－ＡＧＧ。经过Ｓａｎｇｅｒ双脱氧链要末端终止法进行ＤＮＡ序列测定，表明α＿１－ＡＴ被成功地定点突变。将突变得到的α＿１－ＡＴＰｉｔｔｓ基因克隆入ｐＢＶ２２０载体中并进行表达，得到了有抗原活性的凝血酶抑制剂α＿１－ＡＴＰｉｔｔｓ表达产物。以一对引物代替两对引物，节省了引物合成的费用，方法简便、快速、经济。
- 叶玲刘建伟金灵逯好英汲言山孙淑英
- 关键词：突变体凝血酶抑制剂引物PCR
- HCV C基因在E.coli中的高效表达
- 1995年
- 本文在基因克隆和序列分析基础上,设计并构建了五种不同的HCV C基因表达工程菌株,研究了影响HCVC基因在E.coli中高效表达的因素。结果表明疏水区编码序列的存在与否对基因表达水平影响较大;翻译通读现象可直接影响目的表达产物的累积水平;不同宿主细胞对外源基因表达水平的影响也同样具有重要意义。通过试验研究,获得了高表达工程菌株,其表达水平达38.5％,为制备高质量重组HCV C抗原并研究其在疾病防治中的作用奠定了基础。
- 逯好英金灵王宇王捷张晓晖尚丹马贤凯
- 关键词：HCVC基因宿主细胞
- 检测血清中抗乙型肝炎X抗体ELISA竞争法的建立及初步应用被引量：1
- 1992年
- 应用基因工程表达的乙型肝炎X抗原(HBxAg)和抗-HBx单克隆抗体(抗-HBx McAb),国内首次建立了检测血清中抗-HBx抗体的ELISA竞争法。此方法敏感性高,血清抗-HBx效价达1∶10即可测出:特异性强,与抗-HBs、抗-HBc、抗-HAV和抗-HD等皆无有意义竞争;稳定性和重复性好;而且由于使用了单克隆抗体,可使方法标准化。对200份临床肝炎血清进行了检测,结果显示抗-HBx阳性率为2.5％,此方法可用于流行病学调查及临床诊断。
- 吴在川金灵陈万荣张习坦蒋豫图阎惠平
- 关键词：ELISA单克隆抗体
- ＢＡ－免疫印迹方法及其应用
- 苏新初连瑞金灵
- 关键词：免疫技术弗氏志贺氏菌微生物检定生物素蛋白免疫酶技术免疫印迹法抗生物素蛋白
- 福氏痢疾菌膜成分与细菌抗原性和毒力的关系被引量：1
- 1990年
- 应用免疫转移技术,用从感染福氏痢疾菌的病人获取的恢复期血清分析了福氏痢疾菌膜成分与细菌抗原性和毒力的关。发现福氏痢疾菌的膜蛋白67kD 和63kD 均含有两种成分,一种和膜蛋白60kD 都可能是保护性抗原,而另一种与膜蛋白78kD 和35kD一样与福氏痢疾菌的毒力有关。采用微细胞同位素掺入示踪显示这些与病人恢复期血清反应的膜蛋白由质粒编码。
- 金灵苏新
- 关键词：膜蛋白
- Biotin-Avidin免疫转移技术被引量：4
- 1989年
- Biotin-Avidin-Immunoblot是将生物素和亲和素引入酶标免疫检测中,用于经电泳分离并转移到硝酸纤维素膜上的蛋白质的分析。该方法特异性好,具有很好的重复性,检测敏感度可达1.5×10^(-11)mg,与放射免疫检测方法相似。
- 金灵苏新
- 关键词：生物素
- 全文增补中
- 肝细胞癌组织内HBxAg的表达及其与p21ras的关系被引量：1
- 1996年
- 应用免疫组织化学技术ＡＢＣ与ＰＡＰ法检测６６例肝细胞癌（其中５７例含有癌周组织）与１５例肝硬化组织内ＨＢｘＡｇ，ＨＢｓＡｇ，ＨＢｃＡｇ及ｐ２１ｒａｓ的表达，分析了ＨＢｘＡｇ与ｐ２１的关系。结果：ＨＢｘＡｇ在癌周与癌组织内均有高频率表达，癌内ＨＢｘＡｇ阳性组ｐ２１的阳性率显著高于阴性组（Ｐ＜０．０１），但癌周组织ＨＢｘＡｇ阳性组与阴性组间ｐ２１阳性率无显著差异。提示：ＨＢｘＡｇ与肝细胞癌变有密切关系，在控制、调节ｒａｓ癌基因表达上起重要作用。
- 戴朝六夏振龙陈淑珍姜卫国王之章金灵逯好英马贤凯
- 关键词：RAS癌基因肝肿瘤
- 乙型肝炎病毒X基因的转录激活作用及其机理的研究进展
- 1991年
- 乙型肝炎病毒X基因的翻译产物可在多种细胞中反式激活乙型肝炎病毒和其他数种病毒以及一些细胞基因的调控序列,促进基因转录。X蛋白的作用与病毒增强子的某些序列有关,可能通过细胞内转录调控因子桥接直接作用于转录起始复合物,或X蛋白本身具有蛋白磷酸激酶活性,共价修饰细胞转录调控因子,进而影响转录起始。X蛋白的反式激活作用有利于病毒基因的大量表达,促进病毒复制,并且可干扰细胞基因的转录表达,影响细胞分化增殖,是导致病毒大量复制和细胞肿瘤转化的重要因素之一。
- 金灵马贤凯王嘉玺
- 关键词：X基因乙肝病毒转录
