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RNAi抗猪繁殖与呼吸综合征病毒的研究进展: 2013年; 猪繁殖与呼吸综合征(Porcine reproductive and respiratory syndrome,PRRS)是世界上主要的猪传染性疾病之一,以妊娠母猪发热、厌食、早产、流产、死胎等繁殖障碍及仔猪高死亡率和育成猪呼吸困难,类流感症状、发育迟缓为主要的特征。该病给各个国家的养猪业带来巨大的经济损失,目前,疫苗和抗病毒药物只能提供有限的保护。自2006年以来,不断有研究者应用RNA干扰(RNA interference,RNAi)技术开展抗猪繁殖与呼吸综合征病毒的研究,并取得了一些阶段性成果。对已有的研究成果进行了综述。; 李红梅贺聪张春红张健騑张建峰孟轩郭鹏举; 关键词：猪繁殖与呼吸综合征病毒 RNAI 抗病毒

shRNA抑制猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)JXA1-R株在Marc-145细胞中复制及抗PRRSV细胞株的建立被引量：1: 2013年; 猪繁殖与呼吸综合征(porcine reproductive and respiratory syndrome,PRRS)是世界上主要的猪传染性疾病之一,目前,疫苗和抗病毒药物只能提供有限的保护。本研究选择猪繁殖与呼吸综合征病毒(porcine reproductive and respiratory syndrome virus,PRRSV)JXA1-R株ORF1a、ORF3、ORF4、ORF5、ORF6、ORF7的保守区域为靶序列,利用pSilencer2.1-U6neo构建shRNA表达载体并转染Marc-145细胞。经实时荧光定量PCR、细胞病变及病毒滴度分析,结果显示,ORF1a-4-shRNA、ORF3-1-shRNA、ORF6-2-shRNA干扰质粒能明显抑制病毒基因的转录,并有效抑制PRRSV在Marc-145上的增殖,显著降低病毒滴度。最后筛选ORF6-2-shRNA表达质粒转染猪胎儿成纤维细胞,构建稳定转染细胞株,为抗PRRSV转基因猪的生产奠定了基础。; 李红梅贺聪张茂孟轩张建峰张健騑郭鹏举; 关键词：猪繁殖与呼吸综合征病毒 RNA干扰

抑制猪源p53基因表达的RNA干扰载体及其制备与应用: 本发明公开了一种抑制猪源p53基因表达的RNA干扰载体及其制备方法与应用，属于基因工程领域。该RNA干扰载体以pEGFP-C1为骨架载体，包括猪U6RNA聚合酶Ⅲ启动子和干扰猪源p53基因的shRNA的转录模板。将pEG...; 沈海燕张建峰郭鹏举张春红周恒朱余军; 文献传递

重组猪IFN-λ3原核表达及其活性分析被引量：2: 2015年; 应用RT-PCR技术从多聚肌苷酸多聚胞苷酸(poly(I∶C))刺激的ST细胞中扩增猪干扰素-λ3(PoIFN-λ3)基因。基因序列分析表明,PoIFN-λ3基因全长为588bp,与绵羊IFN-λ3基因(XM_004015683)的同源性最高(87.6%);分子遗传进化树分析表明猪IFN-λ3与牛、绵羊亲缘关系最近,与马、人、黑猩猩和鸡的亲缘关系次之。将PoIFN-λ3成熟肽序列定向插入pET-32a载体,转化宿主菌Rosetta gami B,IPTG诱导表达,SDS-PAGE和Western blotting检测分析表明,PoIFN-λ3基因获得表达,重组蛋白大小为32 000,以包涵体形式存在。重组蛋白经变性、纯化、复性后,用细胞病变抑制法在MDBK/VSV系统上进行抗病毒活性的测定。结果显示,复性后重组蛋白的含量约为1g/L,抗水泡性口炎病毒(VSV)活性达到2×103 U/mg,表明重组poIFN-λ3具有较高的抗病毒作用。; 周恒沈海燕郭鹏举张春红张建峰刘志成孙俊颖李玉谷; 关键词：原核表达抗病毒活性

抑制猪源p53基因表达的RNA干扰载体及其制备与应用: 本发明公开了一种抑制猪源p53基因表达的RNA干扰载体及其制备方法与应用，属于基因工程领域。该RNA干扰载体以pEGFP-C1为骨架载体，包括猪U6RNA聚合酶Ⅲ启动子和干扰猪源p53基因的shRNA的转录模板。将pEG...; 沈海燕张建峰郭鹏举张春红周恒朱余军

鸡贫血病毒广州株VP3和VP1基因的克隆与序列分析: 2015年; 采用PCR方法成功克隆了3株鸡贫血病病毒（CAr）广州株VP3和VPl的部分基因，并进行了核苷酸序列测定。序列分析表明，3株CAV广州株与国内外其他21株CAV毒株的核苷酸序列相似性在89．5％-100．0％之间；推导氨基酸序列的相似性在84．8％-98．2％之间。系统发育进化树分析显示，3株CAV广州株和中国TJBD40、SD22、SD24株都同处于一个分支上，而与马来西亚的SMSC-1株、日本的G6株以及澳大利亚的CAU269／7株的亲缘关系较远。; 沈海燕张建峰刘志成周恒郭翠丽郭鹏举张春红; 关键词：鸡贫血病病毒分子进化树

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郭鹏举