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郑伟: 作品数：41 被引量：69H指数：5; 供职机构：浙江国际旅行卫生保健中心更多>>; 发文基金：国家质检总局科技计划项目浙江出入境检验检疫局科研基金国家质检公益性行业科研专项更多>>; 相关领域：医药卫生农业科学生物学动力工程及工程热物理更多>>

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不同加热方式对嗜肺军团菌环介导等温扩增检测法的影响: 2011年; 目的:研究不同的加热方式对嗜肺军团菌环介导等温扩增检测法的影响方法:用已知的13株嗜肺军团菌样本,采用空气浴、水浴和PCR仪同时进行环介导等温扩增,观察沉淀反应、荧光反应以及产物电泳结果。结果:水浴和PCR仪加热LAMP反应的沉淀产物较多,荧光反应较强,电泳检测结果较为明显。空气浴的3种检测结果均较弱。结论:采用水浴和PCR仪进行环介导等温扩增反应的效果较好,从仪器设备的成本及实验条件考虑,采用水浴是环介导等温扩增反应首选的加热方式。; 吕沁风吴忠华郑伟徐琦孟军李禾; 关键词：嗜肺军团菌水浴

西尼罗病毒的逆转录重组酶介导扩增检测方法被引量：5: 2020年; 【背景】随着西尼罗热在全球范围内广泛流行,西尼罗热传入我国的风险加大。研究西尼罗病毒的快速检测方法,为西尼罗病毒检测建立方法储备。【目的】建立西尼罗病毒逆转录重组酶介导扩增(reverse transcription recombinase aided amplification,RT-RAA)检测方法。【方法】根据西尼罗病毒基因保守区序列设计引物和探针,建立西尼罗病毒RT-RAA检测方法,并评价该方法的重复性、特异性和灵敏度。【结果】RT-RAA方法的整个扩增反应过程温度恒定,反应温度为39°C,检测时间较短(20 min内),并且检测限可达10 copies,与基孔肯雅病毒、登革病毒、乙型脑炎病毒、黄热病毒等蚊媒病毒无交叉反应,具有良好的特异性,样本检测符合预期。【结论】建立的西尼罗病毒RT-RAA方法具有快速、特异以及灵敏的特点,可用于西尼罗病毒的口岸快速检测和流行病学监测。; 吕沁风廖静罗鹏郑伟刘建礼郭利川应清界; 关键词：西尼罗病毒

逆转录重组酶介导扩增技术快速检测基孔肯雅热病毒被引量：1: 2017年; 本研究通过使用逆转录酶,将基孔肯雅热病毒RNA首先逆转录为cDNA。选取基孔肯雅热病毒保守序列设计引物及探针,建立基孔肯雅热病毒重组酶介导一步法等温核酸扩增RT-RAA(Reverse transcription recombinase aided amplification,RT-RAA)快速检测法,并分析其灵敏度及特异性。结果显示,该方法整个过程在39℃进行,检测时间短(<20 min),检测下限可达100 copy,并与黄热病毒、日本乙型脑炎病毒、西尼罗病毒、登革病毒I型等蚊媒病毒不存在交叉反应。本文建立的基孔肯雅热病毒RT-RAA检测法,灵敏度高、特异性强、操作简便,适应于口岸基层基孔肯雅热病毒的快速检测。; 罗鹏姜梓凡郑伟吴忠华吕沁风郭利川应清界王刚; 关键词：分子检测

嗜肺军团菌环介导等温扩增检测法的建立被引量：6: 2010年; 目的:建立一种快速简便的嗜肺军团菌分子检测方法。方法:运用环介导等温扩增技术(loop-mediated isothermal amplification,LAMP),设计一套引物特异性识别嗜肺军团菌毒力基因——mip基因的6个特殊区域,在恒温条件下,对8株嗜肺军团菌和5株其它细菌进行检测,并与普通PCR方法进行比对,验证该方法的特异性和灵敏度。结果:所有嗜肺军团菌扩增产物均产生肉眼可见的白色沉淀,而其它不同菌株均不产生沉淀;加入荧光染料smart green后,嗜肺军团菌扩增产物均产生强绿色荧光,其它菌株呈弱荧光。与普通PCR(检出限约为57.6 pg,)比,LAMP扩增反应的灵敏度大100倍左右,基因组DNA检出限为576 fg,阳性水样检出限为8 cfu/ml。结论:LAMP技术可在简易的实验环境中快速、特异、灵敏地检测嗜肺军团菌。; 吕沁风郑伟罗鹏吴忠华李禾沈建根; 关键词：基因扩增

抗结核菌糖脂抗原抗体及抗阿拉伯甘露糖抗原抗体并联检测在口岸肺结核病快速诊断中的应用: 2010年; 〔目的〕研究抗结核菌糖脂抗原(TBGL)抗体及抗阿拉伯甘露糖抗原(LAM)抗体并联检测在结核病血清学诊断中的价值。〔方法〕采集结核病患者及健康对照者血清,用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测抗TBGL抗体,用胶体金法检测抗LAM抗体。〔结果〕91例结核患者TBGL抗体、LAM抗体总阳性率均为62.6%,其中活动性肺结核病人的TBGL阳性率为65.3%,LAM阳性率为69.4%;非活动性结核病人TBGL阳性率为59.5%,LAM阳性率为54.8%,两组间差异不明显。肺结核病人两抗体并联检测阳性率为89.0%,明显高于单独抗体检测阳性率(P<0.05),特异性达85.7%。〔结论〕抗TBGL、LAM抗体并联检测敏感性、特异性高,方法快速简便,对口岸结核病预防控制有较高的实用价值。; 郑伟李禾吴忠华吕沁风罗鹏孟军; 关键词：血清结核

检测布鲁氏菌的试剂及复合探针荧光定量PCR检测布鲁氏菌的方法: 本发明提供了一种检测布鲁氏菌的试剂，它包括以下上游引物、下游引物、荧光探针和淬灭探针；上游引物的基因序列为：5′-caagggcaaggtggaagatt-3′；下游引物的基因序列为：5′-ctgcgaccgatttga...; 吴忠华吕沁风郑伟黄建可李禾

等温扩增检测猴痘病毒的试剂及等温扩增检测猴痘病毒的方法: 本发明提供了一种等温扩增检测猴痘病毒的试剂。它包括：（1）检测猴痘病毒的标准品，所述标准品为采用人工合成的基因片段，克隆入pGSI质粒，得到的重组质粒载体；所述基因片段的碱基序列如SEQ ID NO：1所示；（2）引物，...; 吕沁风郑伟吴忠华徐琦罗鹏何蕾

检测黄热病毒的试剂及检测黄热病毒的方法: 本发明提供了一种检测黄热病毒的试剂，它包括外引物F3、外引物B3、内引物FIP、内引物BIP；引物基因序列如下：外引物F3，TGGGAGAGGAGATTCACGT；外引物B3，TCAAGCCGCCAAATAGCC；内引物...; 吕沁风郑伟吴忠华曹筝何蕾罗鹏; 文献传递

用于检测猴痘病毒的NASBA试剂盒及其应用: 本发明公开了一种用于检测猴痘病毒的NASBA试剂盒及其应用。本发明所提供的NASBA试剂盒中含有用于检测猴痘病毒的组合物，所述组合物由一个引物对和一个探针组成；所述引物对由序列表中序列1和序列2所示的两条单链DNA分子组...; 吕沁风郑伟吴忠华罗鹏徐琦何蕾李禾; 文献传递

两种进口第4代HIV检测试剂检测性能评价被引量：5: 2013年; 目的:评价BioMerieux公司的HIV抗原/抗体联合检测快速法(VIDAS HIV DUO QUICK)和Vironostika HIV Uniform II Ag-Ab ELISA法检测HIV抗体和P24抗原的特异性及敏感性。方法:用上述两种试剂分别检测HIV抗体阴性样品1184例、HIV抗体阳性样品128例、BBI阳转血清盘(PRB929 01-07)和7种不同稀释度的P24抗原阳性对照血清等,对其进行敏感性和特异性分析。结果:两种试剂检测HIV抗体均具有较高特异性,但快速法检测特异性较高(为98.6%),而ELISA法检测特异性较低(为96.0%)。两种试剂检测HIV抗体和抗原的敏感性一样。另外,从检测BBI阳转血清盘的结果可知,两种4代抗原/抗体联合检测试剂检测BBI阳转血清盘AD第18 d结果即为阳性,而3代HIV抗体检测试剂在第21 d结果为阳性,4代检测试剂敏感性比3代检测试剂高,进一步缩短了HIV感染检测的窗口期,可以检出窗口期的样品。结论:这2种4代检测试剂在增加HIV P24抗原检测的情况下,不影响其检测HIV抗体的特异性和敏感性,并进一步缩短了HIV感染窗口期。建议HIV抗体初筛检测使用第4代HIV抗原/抗体联合检测试剂,可检出更多艾滋病早期感染者。; 吴忠华郑伟吕沁风罗鹏李禾; 关键词：HIV抗体 P24抗原 ELISA 性能评价

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