邢凤英
- 作品数:18 被引量:93H指数:6
- 供职机构:上海交通大学医学院实验动物科学部更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金上海市科技兴农重点攻关项目上海市科委科研计划项目更多>>
- 相关领域:农业科学生物学医药卫生更多>>
- 猪体外成熟卵母细胞的电激活及其激活后的体外培养被引量:13
- 2002年
- 主要研究了猪体外成熟卵母细胞电激活的条件以及孤雌激活胚胎的体外培养体系。用不同场强、脉冲时程和脉冲次数激活猪体外成熟的卵母细胞。结果表明 ,在本试验条件下电激活最佳场强和脉冲时程为 130V·mm-1/ 80 μs ,其囊胚发育率为 (2 0 .12± 8.18) % (P >0 .0 5 )。多次脉冲并不比单次脉冲的激活效果好 (P >0 .0 5 )。孤雌激活胚胎用不同培养方式和气体环境在体外培养 7d ,发现 7d不换液与第 5天换液和第 5天换含 10 %胎牛血清的培养液其囊胚发育率 [分别为 (2 5 .30± 7.5 5 ) %、(2 6 .4 4± 8.35 ) %和 (17.6 8± 5 .39) % ]无显著差异 (P >0 .0 5 ) ,后两者换液培养方式其囊胚细胞数 (15 .78± 5 .4 6、14 .5 5± 4 .81)明显低于不换液的 (18.0 1± 6 .79,P <0 .0 1)。同时发现低氧 (5 %CO2 ∶7%O2 ∶88%N2 )气体环境培养的胚胎囊胚发育率和囊胚细胞数和高氧环境 (5 %CO2 的空气 )无明显差别 ,分别为 [(2 0 .78± 8.80 ) %、17.0 0± 6 .12和 (2 5 .30± 7.5 5 ) %、18.0 1± 6 .79,P >0 .0 5 ]。表明激活后第 5天换原液和换含胎牛血清的培养液不能提高囊胚细胞数。低氧 (5 %CO2 ∶7%O2 ∶88%N2 )气体环境培养猪胚胎的效果不比高氧环境 (5 %CO2 的空气 )好。
- 吴中红邢凤英刘国世曾申明朱士恩张忠诚伏彭辉
- 关键词:体外成熟卵母细胞电激活体外培养胚胎培养
- 3-4岁猕猴生理指标的测定被引量:5
- 2013年
- 目的建立3-4岁猕猴生理指标基础数据。方法对100只3~4岁猕猴(古50只,早50只)进行了较全面的血液学和心肺功能等生理指标的测定,包括血常规30项、血液生化22项、凝血功能2项以及血压、心电图、呼吸次数。结果血常规中,雌性猕猴的平均红细胞血红蛋白浓度(MCHC)极显著低于雄性猕猴(P〈0.01);雌性猕猴极显著高于雄性的项目有血小板计数(PLT)、血小板压积(PCT)、嗜酸性粒细胞计数(E0*)、嗜碱性粒细胞计数(BASO#)、嗜酸性粒细胞百分比(EO%)与嗜碱性粒细胞百分比(BAs0%)(P〈0.01);显著高的项目有白细胞计数(WBC)和淋巴细胞计数(LYMPH)(P〈0.05)。血液生化指标中,雌性猕猴极显著低于雄性的项目为尿素氮(BUN)、总胆红素(TBIL)、Y一谷氨酰转肽酶(GGT)与无机磷(IP)(P〈0.01);显著低的项目为天冬氨酸转氨酶(AST)、白蛋白(ALB)和直接胆红素(DBIL)(P〈0.05);雌性猕猴显著高于雄性的项目为血糖(GLU),血钙(Ca)和甘油三酯(TG)(P〈0.05)。血凝与血压、心电图的各参数中,雌、雄性别的猕猴之间无显著性差异。呼吸次数的监测结果显示雌性猕猴的呼吸次数较雄性猕猴极显著减少(P〈0.01)。结论建立了3。4岁实验用猕猴的生理指标的正常值,为猕猴实验和疾病诊断中相关生理指标的分析提供了基础参考值。
- 邢凤英严国锋杨伟敏陈学进李垚
- 关键词:猕猴血液学心肺功能生理指标
- 猪输卵管上皮细胞、颗粒细胞、耳上皮细胞及胎儿成纤维细胞的培养被引量:6
- 2003年
- 本文培养了猪输卵管上皮细胞、颗粒细胞、耳上皮细胞、胎儿成纤维细胞等几种细胞 ,比较了几种细胞原代和传代培养的特点 ,发现原代培养时猪耳组织、胎儿组织消化后的单细胞和剩余细胞团块一起培养 ,其生长速度较单个细胞快。 4种细胞中颗粒细胞体积最大 ,生长速度最慢 ,传代密度须保持 2× 10 5 ml以上为宜。
- 吴中红邢凤英刘国世曾申明张忠诚
- 关键词:输卵管上皮细胞颗粒细胞纤维细胞
- 猪卵母细胞体外成熟和孤雌激活效率影响因素分析被引量:12
- 2004年
- 研究了月龄和卵巢采集后的保存条件对猪卵母细胞体外成熟和孤雌激活效率的影响 ,以确立猪卵母细胞体外成熟的最佳条件。试验包括 :(1)卵巢保存的生理盐水温度 (2 2、30、37、38.5、4 0℃ )对猪卵母细胞体外成熟和发育潜力的影响。 (2 )卵巢保存时间对猪卵母细胞体外成熟和后期发育的影响。 (3)初情期前后母猪卵母细胞对体外成熟和发育潜力的影响。结果表明 ,(1) 38.5℃保存的卵巢卵母细胞激活后的卵裂率 (79.6 4 % )和囊胚率(18.11% ) ,37℃的卵裂率 (76 .18% )和囊胚率 (33.82 % )相比 ,差异不显著 (P >0 .0 5 )。当温度达到 4 0℃时 ,卵裂率(2 1.6 8% )和囊胚率 (0 )与 37℃相比差异极显著 (P <0 .0 1)。 30℃与 37℃相比 ,卵裂率和囊胚率之间差异不明显 (P>0 .0 5 )。而当温度降低到 2 2℃时 ,卵裂率和囊胚率明显降低 (P <0 .0 5 )。 (2 )猪卵巢在体外保存 2和 6h对卵母细胞激活后的卵裂率 (6 8.86 %VS 6 8.74 % )和囊胚率 (16 .12 %VS 16 .0 9% )无显著影响 (P >0 .0 5 )。 (3)初情期前、后母猪卵母细胞激活后的卵裂率没有显著差异 (72 .90 %± 7.0 4 %VS 77.35 %± 8.2 9%P >0 .0 5 ) ,但初情期后母猪卵母细胞激活后的囊胚发育率显著高于初情期前 (2 2 .5 2 %± 7.4 8%VS 36 .6 2 %± 10 .2 5 % 。
- 邢凤英吴中红曾申明刘国世朱士恩张忠诚陈学进
- 关键词:卵母细胞体外成熟影响因素
- 小鼠受精前后转录谱重编程及染色质重组机制
- 转录谱重编程主要发生在卵母细胞生成后期及附植前胚胎发育阶段,我们用免疫组化和荧光分子追踪的方法研究了母源特异性转录谱在受精后转变成合子转录谱的基本机理,发现在GV(GerminalVesicle)期卵母细胞中转录停止的时...
- 邢凤英
- 关键词:胚胎发育染色质结构
- 文献传递
- 线栓法大鼠大脑中动脉脑缺血模型的评价方法初探被引量:2
- 2013年
- 目的 初步探讨及完善线栓法大鼠中动脉脑缺血模型的评价体系.方法 将自制线栓从颈内动脉插入大鼠大脑中动脉并闭合创口,制备永久性大鼠脑缺血模型,模型制备前称其体质量,脑缺血24 h后分别称取体质量,进行神经行为学评分、脑电波检测、TTC染色、HE染色和脑水分测定.结果 根据修改后的13分评分标准,对脑缺血24 h后的大鼠作神经行为评价并进行分组,雄性大鼠5分以下(包括5分)和5分以上组在体质量变化均存在明显的差异(P<0.05),而雌性大鼠两组间没有明显差异.本实验选取5分以上组做进一步的评价,发现雄性大鼠缺血侧的脑含水比显著高于雌性大鼠(P<0.01).梗死面积雄性大鼠略大于雌性,但二者之间无显著性差异.HE染色发现5分以上组右脑比正常大鼠存在明显的结构破坏,脑电分析也表明手术后的右脑明显比左脑的输出输入信息受阻明显.结论 经过TTC、HE和脑电等的评价方式,对采用13分制神经行为学评分以5分作分界提供了实验依据,确认了只有达到5分值以上的模型才是成功及有效的脑缺血模型.
- 邢凤英周颖马政文吴文庆李垚陈学进严国锋
- 关键词:线栓法
- 不同供体细胞代数对兔体细胞核移植效率的影响被引量:1
- 2012年
- 将兔成纤维细胞分为5~10低代数组和20~25高代数组进行核移植研究。结果显示,2试验组供体细胞核移植的效率存在差异。通过对供体细胞进行核移植后的重构胚胎的融合率、卵裂率、囊胚率以及体内发育的比较,发现低代数相对来说更有效率,但是高代数组也能获得正常的克隆后代。结果表明,兔不同代数体外培养细胞对克隆效率存在影响,并为制备转基因打靶兔提供基础。
- 宋伟杰谷瑞环尹明茹李敦高邢凤英李善刚陈学进李和平
- 关键词:成纤维细胞体细胞核移植
- 猪体外成熟卵母细胞激活方法的比较被引量:10
- 2003年
- 研究了离子霉素/6-二甲氨基嘌吟(DMAP),乙基汞硫代水杨酸钠/二硫苏糖醇(DTT)激活猪体外成熟卵母细胞的最佳条件,比较研究了电脉冲和化学刺激对猪体外成熟卵母细胞的激活效率。结果表明,用15μmol/L离子霉素处理猪体外成熟卵母细胞10,20,30,40,50,60和70min,其囊胚发育率差异不显著,以40min时的囊胚发育率最高,用15,20和25μmol/L离子霉素处理猪体外成熟卵母细胞,其囊胚率无显著差异。用100,200和300μmol/L乙基汞硫代水杨酸钠分别激活猪体外成熟卵子,发现100μmol/L乙基汞硫代水杨酸钠中处理30min组的卵裂率和囊胚率最高,电脉冲与两种最佳化学激活组的比较研究表明,电激活组的囊胚率最高,但囊胚细胞数低,相反,乙基汞硫代水杨酸钠/二硫苏糖醇激活组的囊胚细胞数最高,囊胚率却较低。
- 吴中红邢凤英曾申明刘国世朱士恩张忠诚
- 关键词:体外成熟卵母细胞细胞核移植孤雌激活囊胚发育率
- 兔转基因成纤维细胞克隆的建立及条件优化
- 2012年
- 探索和优化兔成纤维细胞由单细胞成长为克隆群体的技术条件,建立转基因单克隆细胞系筛选系统,为进一步生产基因打靶克隆兔创造条件。将3~5代的成纤维细胞分散成单个细胞,对比不同培养基对单细胞克隆形成的影响。利用脂质体转染兔成纤维细胞后,按照不同的稀释比例传代并筛选转基因单细胞克隆,研究不同稀释比例对转基因单细胞克隆形成的影响。经过比较试验发现同化的DMEM/F12培养基能很好地支持单细胞克隆早期生长,转基因后1∶80倍的稀释比例能够获得较多的转基因单细胞克隆。本试验结果有助于提高转基因和基因打靶克隆动物的制作效率。
- 宋伟杰张振韬尹明茹李垚邢凤英李善刚陈学进李和平
- 关键词:转基因
- 猪卵母细胞体外成熟的研究
- 该实验对影响猪卵母细胞体外成熟的因素进行了研究,以便确立猪卵母细胞体外成熟的最佳条件.实验的内容包括:1)卵巢保存的生理盐水温度(22℃、30℃、37℃、38.5℃、40℃)对猪卵母细胞体外成熟和发育潜力的影响.2)卵巢...
- 邢凤英
- 关键词:体外成熟猪卵母细胞卵裂率囊胚率
- 文献传递