邢佑尚
- 作品数：9 被引量：30H指数：4
- 供职机构：中国科学院北京基因组研究所更多>>
- 发文基金：国家质检总局科技计划项目国家科技重大专项更多>>
- 相关领域：生物学农业科学更多>>
- 噬菌体抗体库及其在检验检疫中的应用被引量：2
- 2012年
- 介绍了抗体库技术,重点介绍了噬菌体抗体库技术及其在检验检疫中的应用,综述了噬菌体抗体库技术使用的噬菌体种类,所用到的不同衣壳蛋白展示系统,免疫和非免疫抗体库,噬菌体抗体库的不同分子类型,跟踪了噬菌体抗体库技术在检验检疫领域的应用研究,包括生物寄生虫检测、病毒检测、转基因产品检测、药物残留检测,以及单链噬菌体抗体库技术在检验检疫领域的研究进展。
- 邢佑尚汪琳赵胤泽王慧珊
- 关键词：噬菌体抗体库检验检疫
- 非洲马瘟病毒、西尼罗病毒和马冠状病毒的基因芯片检测技术研究被引量：4
- 2012年
- 为探索建立马病病毒基因芯片检测方法,采用人工拼接的方式拼接了非洲马瘟病毒(ASHV)核酸序列,通过分子克隆技术获得西尼罗病毒(WNV)和马冠状病毒(ECV)的特异基因片段。用芯片点样仪逐点分配到处理过的玻片上,制备成检测芯片。以拼接、克隆的核酸序列为模板通过多重不对称RT-PCR进行特异性扩增和荧光标记后滴加到芯片上进行杂交,对杂交结果进行扫描检测和计算机软件分析。结果显示,制备的基因芯片可同时检测和鉴别上述3种病毒,ECV质粒样品、WNV质粒样品检测灵敏度为102拷贝;AHSV质粒样品检测灵敏度为104拷贝。其他病毒材料未出现荧光信号,验证了本方法的特异性。证明基因芯片技术可快速、准确和灵敏地同时进行多种病毒的检测。
- 赵胤泽汪琳邢佑尚张灿
- 关键词：非洲马瘟病毒基因芯片
- 禽流感免疫噬菌体抗体库构建及ELISA检测方法的建立
- 2012年
- 本研究应用噬菌体抗体库技术筛选禽流感亚型病毒Fab抗体,并建立相应ELISA检测方法。用禽流感亚型混合疫苗免疫小鼠,取其脾脏提取总RNA用于扩增免疫球蛋白轻链和重链基因,克隆至噬菌粒pComb3,然后转化入感受态细胞XL1-Blue中,以1012 CFU辅助噬菌体VCSM13进行感染后,获得Fab抗体库容量为8×107 CFU。以H5N1病毒为抗原进行4轮亲和筛选,获得特异性结合的克隆,利用获得的特异性克隆进行ELISA检测方法的建立。
- 邢佑尚汪琳张灿赵胤泽栢亚铎吴亚琼李玉欣
- 关键词：禽流感病毒噬菌体抗体库
- 转基因动物技术的主要应用被引量：1
- 2010年
- 转基因动物不仅可以用来研究基因功能,也可按照人的意愿改良动物的遗传品质,为人类探讨疾病发病机理,寻求有效治疗途径,提供筛选和鉴定药物的理想模型;改良家畜生长特性,提高饲料利用率和产量,为人体提供异体移植器官和生产珍贵药物蛋白。转基因动物研究蕴含着巨大的经济价值,具有非常广阔的应用前景,在国际上成为生物工程的投资热点之一。本文主要对转基因动物的应用进行综述。
- 赵胤泽汪琳柏亚铎邢佑尚
- 关键词：转基因动物
- 五种马病毒基因芯片检测方法的建立被引量：2
- 2011年
- [目的]既保护我国畜牧业的安全,又在检验检疫口岸实现马匹的快速通关,探索建立马病毒基因芯片检测方法。[方法]采用人工拼接的方式拼接了非洲马瘟病毒核酸序列、通过分子克隆技术获得西尼罗热、马冠状病毒、马鼻肺炎病毒和马动脉炎病毒的特异基因片段,设计合成五种马病病毒高度保守的特异性核酸序列作为检测探针点制于芯片上,再用多重不对称PCR以拼接、克隆的核酸序列为模板扩增目的片段,与芯片上探针特异结合。[结果]建立了五种病毒的基因芯片快速检测方法,实现了五种马病同时检测。[结论]本研究建立的芯片快速高通量基因芯片检测方法可应用于大规模出入境马属动物的快速筛查。
- 汪琳周琦柏亚铎邢佑尚赵胤泽张鹤晓蒲静乔彩霞蒋迪齐玮
- 关键词：非洲马瘟病毒马鼻肺炎病毒基因芯片
- 猪传染性胃肠炎病毒与猪呼吸道冠状病毒荧光RT-PCR鉴别检测方法建立与应用被引量：4
- 2011年
- 本研究根据Genbank登录的猪传染性胃肠炎病毒(TGEV)N基因和S基因保守区序列设计合成了两对引物和探针,通过对荧光定量RT-PCR反应条件的优化,建立了TaqMan荧光定量RT-PCR快速检测TGEV的方法。该方法能有效地鉴别序列密切相关的猪传染性胃肠炎病毒与呼吸道冠状病毒。与常规RT-PCR试验比较表明,所建立的荧光RT-PCR检测技术快速、敏感,检测时限3个小时以内,具有很好的特异性和重复性。通过对39份临床样品进行检测,结果表明所建立的检测方法直接检测样品中猪传染性胃肠炎病毒。
- 王慧珊高志强王金宝张鹤晓乔彩霞吴亚琼邢佑尚朱淑芬
- 关键词：猪传染性胃肠炎病毒猪呼吸道冠状病毒荧光RT-PCR
- 3种转基因成分检测蛋白芯片的研制被引量：13
- 2011年
- 为研制一种可同时检测3种转基因成分BTCry1Ac蛋白、植酸酶蛋白、BTCry1Ah蛋白的蛋白芯片。本文将3种转基因成分蛋白质的单克隆抗体点于化学修饰的基片上,对芯片的表面修饰材料、点样缓冲液成分、封闭液种类、标记二抗使用浓度、反应时间进行优化,并对芯片检测的特异性、灵敏度进行测定。结果表明:研制芯片的表面为环氧修饰,使用含0.1%BSA和30%甘油的点样缓冲液和含1%BSA的封闭液,每次反应时间为30min时,有最佳反应结果;其检测灵敏度为:BTCry1Ac蛋白35ng/mL、植酸酶蛋白20ng/mL、BTCry1Ah蛋白30ng/mL,信号稳定;本研究建立的抗体蛋白芯片检测法可同时检测3种转基因蛋白,并具有较高的灵敏性、特异性和可靠性。
- 汪琳邢佑尚周琦赵胤泽柏亚铎蒲静张伟乔彩霞
- 关键词：蛋白芯片
- 基因芯片在犬病病原体检测中的应用被引量：4
- 2011年
- 为了实现犬病的快速诊断,本研究利用高通量的基因芯片技术,建立了犬传染性肝炎、犬瘟热和犬细小病毒病基因芯片快速检测方法,同时提取DNA和RNA病毒核酸,再用多重不对称PCR扩增目的片段,与芯片上探针特异结合,实现了3种犬病同时检测,CDV、CAV的检测灵敏度达102copies,CPV的检测灵敏度达103copies。
- 汪琳赖平安邢佑尚赵胤泽蒋迪柏亚铎蒲静谷强乔彩霞吴丹张鹤晓
- 关键词：犬传染性肝炎犬瘟热犬细小病毒基因芯片
- 一种噬菌体抗体库及其在禽流感免疫检测中的应用
- 本发明涉及一种抗体库，是在Pcomb3载体的Xba和Sac酶切位点间插入一段免疫球蛋白轻链可变区VL基因序列，以及Spe和Xho内切酶切位点间插入一段免疫球蛋白重链可变区VH基因序列，其特征在于：所述的两段基因片段包含了...
- 汪琳邢佑尚张灿秦奕柏亚铎周琦刘艳华任鲁风蒲静张玉红齐玮王绪敏张伟张沫琦
- 文献传递
