邓小昭
- 作品数：3 被引量：23H指数：3
- 供职机构：武汉大学生命科学学院病毒学研究所更多>>
- 发文基金：世界银行贷款项目国家教育部博士点基金江苏省自然科学基金更多>>
- 相关领域：生物学医药卫生更多>>
- 乙型肝炎病毒e抗原基因与绿色荧光蛋白基因的融合及其表达被引量：10
- 1997年
- 质粒pS65T含有T7启动子驱动的绿色荧光蛋白突变型gfpS65T基因，经修饰后，在其中插入乙型肝炎病毒e抗原（HBeAg）基因，使两基因同框成为融合基因。在大肠杆菌BL21中由于T7启动子的控制，高效表达了具有双功能（抗原性和发光性）的融合蛋白（GFP－HBeAg）。融合蛋白MW为52kDa，N端有6个组氨酸残基，因而用Ni金属螯合层析柱对融合蛋白进行了分离纯化，利用诊断HBV的ELISA试剂盒检测了融合蛋白的抗原性，在荧光显微镜下观察到了融合蛋白的绿色荧光。并探讨了用其组装成新型免疫诊断试剂的可能性。
- 岳莉莉齐义鹏邓岩卉吕利群邓小昭
- 关键词：乙型肝炎病毒绿色荧光蛋白基因
- 截短和融合的绿色荧光蛋白的表达及其荧光特性被引量：10
- 1998年
- 水母Aequoreavictoria的绿色荧光蛋白 (GFP)是一种能发射强烈荧光的特殊蛋白质 ,其荧光的产生是由于内部第 6 5～ 6 7位的Ser Tyr Gly自身环化和氧化形成生色基团的缘故 .Ser6 5→Thr(简称S6 5T)突变型的荧光强度较野生型GFP高出6倍 ,并且其激发波更长 ,肉眼可见发出的强烈荧光 .将 gfpS65T基因从 3′端截短 36bp ,不影响GFPS65T的荧光特性 ,但当截短到 2 2 5bp时 ,几乎失去了荧光特性 .将HBVe抗原基因与突变型 gfpS65TP融合 ,发现其激发光谱又回复到野生型状态 .虽然其荧光强度与 gfpS65T相似 ,但发射波谱变宽且肉眼不能观察 .若将表达这种融合蛋白的菌落在低温下存放数日 ,则又恢复了它肉眼可见的绿色荧光 .以上结果说明GFP的发光机制除与生色基团有关外 ,也与GFP分子的构象完整性和分子内微环境有关 ,野生型GFP与HCVCore抗原的融合也证实了这一点 .
- 岳莉莉齐义鹏胡建红邓小昭
- 关键词：荧光特性绿色荧光蛋白融合蛋白
- 家蚕核多角体病毒双穿梭载体的构建及GFP和HBeAg融合蛋白的表达被引量：6
- 1999年
- 用ＡｃＮＰＶ穿梭载体Ａｃ－Ｂａｃｍｉｄ与野生型ＢｍＮＰＶＤＮＡ共转染家蚕ＢｍＮ细胞，通过同源重组得到整合了ｌａｃＺ／Ｔｎ７ａｔ／ｍｉｎｉＦ表达盒的ＢｍＮＰＶＢａｃｍｉｄ，除能在大肠杆菌／ＢｍＮ细胞中穿梭复制外，还能感染ＢｍＮ－ＰＶ的非允许细胞Ｓｆ９，成功地构建了ＢｍＮＰＶ的双穿梭载体．经与重组转座质粒ｐＦＧＨｅ转座，获得了插入ｇｆｐ／ＨＢＶｅ融合基因的重组ｒＢｍ－Ｂａｃｍｉｄ（ｒＢｍＧＨｅ），在家蚕细胞中表达了既能发射绿色荧光又具有ＨＢｅＡｇ抗原性的双功能融合蛋白．
- 邓小昭邓小昭刁振宇朱应
- 关键词：穿梭载体GFPHBEAG核多角体病毒家蚕
