赵炳武
- 作品数：9 被引量：25H指数：3
- 供职机构：中国农业科学院特产研究所更多>>
- 发文基金：广东省自然科学基金广东省农业科技攻关项目农业公益性行业专项“牛羊重大疫病防控技术研究与产业化”更多>>
- 相关领域：农业科学生物学更多>>
- PCV-2分离新方法的建立及广东株全基因序列的分析
- 2008年
- 利用体外环化的猪圆环病毒2型(PCV-2)全基因的感染性,建立一种分离PCV-2的方法。根据GenBank中PCV-2的基因序列,设计合成1对扩增PCV-2全基因组的特异性引物。通过PCR方法从广东发病猪病料扩增到PCV-2全基因组片段,将该片段克隆入pMD18-T载体,筛选获得阳性重组质粒pM-DT-YF并测序。将所测序列与GenBank中发表的PCV毒株序列进行同源性比较。将质粒pMDT-YF大量扩增,经SacⅡ酶切质粒得到PCV-2全基因组,通过T4连接酶体外环化后,脂质体介导转染PK-15细胞,盲传8代。用间接免疫荧光抗体试验(IFA)可检测到特异性荧光。将转染细胞稀释后接96孔细胞培养板,培养3 d。用荧光定量法检测各孔的PCV-2拷贝数,选择拷贝数最大的细胞扩大培养,经IFA法测定病毒滴度显著增加。结果表明,利用具有感染性的体外环化的全基因组的克隆转染PK-15细胞,并通过选择压力可获得较高滴度的具有感染性的PCV-2。
- 赵炳武于海霞郝永清蒋智勇宋长绪
- 关键词：猪圆环病毒2型基因组
- 猪繁殖与呼吸障碍综合征病毒Nsp2基因缺失株Jiangxi-3毒力的进一步研究
- 2010年
- 通过Reed-Muench法检测从江西发生持续高热的病猪体内分离的猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)Nsp2基因缺失株Jiangxi-3第9代(Jiangxi-3F9)的病毒滴度;将此毒株接种于PRRSV和猪圆环病毒2型(PCV2)抗原与抗体均为阴性的60日龄健康猪进行猪半数致死量(LD50)的测定,并且对LD50试验中存活下来的试验猪再次进行较大剂量的攻毒试验,另将病毒接种于PRRSV和PCV2抗原和抗体均为阴性的6月龄健康猪,对所有攻毒试验猪通过体温检测、临床症状观察、RT-PCR、ELISA等方法进一步研究Jiangxi-3F9的毒力。结果表明:Jiangxi-3F9的病毒滴度为105.25TCID50·mL-1,Jiangxi-3F9病毒的LD50为102.·2mL-1。动物试验各项检测结果说明Jiangxi-3F9毒力强。
- 王旭荣张彩勤赵炳武宋长绪
- 关键词：猪繁殖与呼吸综合征病毒NSP2基因缺失毒力
- 猪繁殖与呼吸综合征病毒流行株Jiangxi-3的全基因组序列分析被引量：3
- 2009年
- 通过RT-PCR分段扩增PRRSV流行株Jiangxi-3的基因组,参照VR2332序列,根据各片段之间相重叠的区域,将扩增片段的序列依次拼接获得Jiangxi-3完整的全基因组,并通过DNAStar软件对其进行分析。结果表明:Jiangxi-3的Nsp2推导氨基酸发生30个氨基酸的不连续缺失,与HB-1(sh)/2002相比,Nsp2推导的第480位氨基酸由D突变为E,缺失的位置为第481位氨基酸和532～560位氨基酸;Jiangxi-3与2006年Tian Kegong等从江西"高热病"病死猪体内分离的毒株JXA1的各个结构蛋白阅读框的氨基酸同源性为98.0%～100%;Jiangxi-3与HB-1(sh)/2002、VR2332、RespPRRSMLV的Nsp2推导的氨基酸同源性分别为94.7%、77.8%、77.7%,由遗传系统发育树可知与2006年以前分离的毒株相比,Jiangxi-3与HB-1(sh)/2002的亲缘关系较近。说明Jiangxi-3和JXA1极可能由同一毒株HB-1(sh)/2002演化而来。
- 王旭荣张彩勤赵炳武张春红杨增岐宋长绪
- 关键词：猪繁殖与呼吸综合征病毒全基因组
- 猪繁殖与呼吸综合征病毒变异株的致病性试验被引量：4
- 2009年
- 【目的】研究从江西、湖南发生持续高热的病猪体内分离的4株NSP2基因缺失的猪繁殖与呼吸综合征病毒（Porcine reproductive and respiratory syndrome virus，PRRSV）Jiangxi-3、Jiangxi-4、Hunan-1、Hunan-2的致病力。【方法】通过Reed—Muench法，测定4株PRRSV（第3代）的TCID50，将毒株分别接种PRRSV和猪圆环病毒2型（PCV2）抗原与抗体均为阴性的健康猪，各设同居试验猪，通过检测体温、临床症状观察、RT—PCR、ELISA、病理切片等方法检测病毒的致病性。【结果】4株病毒的TCID50为10^-3.75～10^-4.5／mL。攻毒试验猪和同居试验猪均表现典型猪繁殖与呼吸综合征临床症状，最后试验猪均死亡。病理切片也显示典型的猪繁殖与呼吸综合征病理变化，并在脑组织内检测到PRRSV核酸。【结论】4株PRRSV分离株的致病力增强。
- 王旭荣张彩勤张春红赵炳武祝卫国杨增岐王建华宋长绪
- 关键词：猪繁殖与呼吸综合征病毒变异株猪高热病
- 猪繁殖与呼吸综合征河南毒株Henan-1的分离及其NSP2、ORF3、ORF5的序列分析被引量：15
- 2008年
- 将2007年1月河南省某猪场送检的疑似高热病病料处理后接种于Marc-145细胞，出现细胞聚集、固缩、脱落等特异性细胞病变。根据GenBank中猪繁殖与呼吸综合征病毒（PRRSV）的基因序列设计并合成针对NSP2、ORF3和ORF5基因的引物，RT-PCR扩增目的基因并将其克隆入pMD18-T载体进行测序。并与国内外已发表的毒株的序列进行比较。结果表明：分离毒株Henan-1是美洲型PRRSV，而且NSP2基因发生30个AA的不连续缺失；Henan-1的NSP2、ORF3和ORF5基因与JXA1、JX0612、HZ-X、HB-1（sh）、CH-1a、HB-2（sh）、SP、ATCC VR-2332、Henan-HN1、Resp PRRS／Repro MLV、PA8、BJ-4等毒株等位基因的核苷酸同源性分别为83．0％～99．0%、88．3％～99．2％、88．6％～99．5％，推导的氨基酸同源性分别为66．7％～97．9％、84．7％～98．8％、87．1％～99．5％；而ORF3和ORF5基因与LV4．2．1等位基因核苷酸同源性分别为64．7％和64．2％，推导的氨基酸同源性分别为56．7％和61．0％。基因系统发育树分析表明：Henan-1与JXA1、JX0612株的亲缘关系很近，与HB-1（sh）亲缘关系较近，与HZ-X、CH-1a、HB-2（sh）、SP、RespPRRS／Repro MLV等毒株处于不同的分支。
- 张彩勤王旭荣杨增岐赵炳武宋长绪
- 关键词：猪繁殖与呼吸综合征病毒
- PRRSV流行株Nsp2、ORF5和ORF3基因序列的分析被引量：2
- 2008年
- 采用RT-PCR方法扩增2006年--2007年从江西、湖南、海南、广东等4省的不同猪场病猪体内分离的11株猪繁殖与呼吸综合征病毒（PRRSV）流行株的Nsp2、ORF5和ORF3基因，并进行序列分析。结果表明，11个PRRSV流行株的Nsp2均发生30个氨基酸的不连续缺失，缺失位置与JXA1毒株相同；11个PRRSV流行株的ORF5、ORF3基因和JXA1相应序列的核苷酸同源性分别为99．2％～99．8％、99．1％～99．6％，氨基酸同源性分别为98．0％～99．5％、98．4％～99．6％；11个PRRSV流行株之间ORF5基因的核苷酸同源性和氨基酸同源性分别为98．8％～100．0oA、98．0oA～100．0％，其中5个流行株的ORF3基因的核苷酸和氨基酸同源性分别为99．0％～99．6％、98．8％～99．69，6。根据Nsp2所建立的遗传系统发育树可知这11个PRRSV流行株与JXA1株的亲缘关系很近。
- 王旭荣张彩勤赵炳武张春红杨增岐宋长绪
- 关键词：猪繁殖与呼吸综合征病毒NSP2ORF5ORF3
- 猪圆环病毒2型广东毒株全基因的序列分析及分离新方法的建立
- 猪圆环病毒2型(Porcine circovums type 2，PCV2)不仅可以引起断奶仔猪多系统衰竭综合征(PMWS)，而且还与猪皮炎肾病综合症(Porcine dermatitis and nephropathy...
- 赵炳武
- 关键词：猪圆环病毒2型全基因基因序列病毒分离
- 文献传递
- 猪繁殖与呼吸障碍综合征病毒Nsp2基因缺失株Jiangxi-3灭活疫苗免疫效果评价被引量：2
- 2010年
- 将猪繁殖与呼吸障碍综合征病毒(PRRSV)Nsp2基因缺失株Jiangxi-3的第9代病毒(Jiangxi-3F9)按常规方法制成油佐剂灭活疫苗,经肌肉注射免疫PRRSV和猪圆环病毒(PCV2)抗原与抗体均为阴性的60日龄健康猪,免疫组分别于初次免疫第21和28天、二次免疫第28天(即初次免疫第28天加强免疫1次)用200LD50的Jiangxi-3 F9进行攻毒,同时各组均设立对照组。通过试验动物体温变化、临床症状、血清PRRS抗体和抗原定期检测结果评价灭活疫苗的免疫效果。结果表明,初次免疫第21和28天免疫组攻毒后体温仍然明显升高,而二次免疫第28天免疫组攻毒后体温升高不明显,最高体温约40℃。初次免疫21-28 d免疫组特异性抗体水平持续升高,初次免疫第21天与第28天抗体水平差异显著(0.01
- 王旭荣张彩勤赵炳武宋长绪
- 关键词：NSP2基因灭活疫苗
- 牛传染性鼻气管炎病毒LNM株致弱疫苗免疫效力的研究被引量：3
- 2011年
- 为检测牛传染性鼻气管炎病毒(IBRV)抗体在免疫牛体内的产生及其消长规律,评价IBRV LNM株致弱疫苗的保护效力,并确定免疫持续期,本实验对免疫试验组牛每头颈部肌肉接种制备的IBRV LNM株致弱疫苗104.5 TCID50/mL,监测血清抗体效价,进行免疫期的确定。在疫苗免疫后的6个月、9个月和12个月分别抽取3头免疫组和两头对照组牛采用IBRV-LN01/08强毒株进行攻毒试验,每头牛的攻毒剂量为107.0 TCID50/mL。结果显示疫苗免疫后12个月时,中和抗体效价仍维持在1∶11以上。攻毒结果显示3个时间点强毒攻击后,疫苗对免疫牛均具有良好的保护力。研究表明IBRV弱毒疫苗可有效地保护免疫牛抵抗IBRV强毒株的攻毒,其免疫持续期最少为12个月。
- 郭利冷雪张淑琴苗立光赵炳武武华
- 关键词：牛传染性鼻气管炎病毒弱毒活疫苗效力免疫持续期
