赛岩
- 作品数：8 被引量：8H指数：2
- 供职机构：军事医学科学院放射与辐射医学研究所更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家科技重大专项“重大新药创制”科技重大专项更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 肝脏特异HPPCn转基因小鼠的建立及表型分析被引量：1
- 2012年
- 目的建立高表达HPPCn转基因小鼠,为研究该基因在肝癌发生发展中的功能提供研究模型。方法显微注射外源基因pGEM-A1b/his-HPPCn至FVB/N小鼠原核,注射受精卵移植到假孕受体出生个体。PCR和Southern blot鉴定转基因小鼠基因型,Western blot和Realtime-PCR检测转基因阳性和阴性小鼠肝脏HPPCn蛋白表达情况,HE染色和透射电镜观察肝脏病理改变。结果经检测,显微注射共产生2只首建鼠,转入的重组HPPCn基因能在肝脏中特异表达,并能够稳定遗传。转基因小鼠肝脏内HPPCn含量明显增高。转基因后并未对小鼠造成不良影响。结论 HPPCn参与了肝癌发生发展的过程,其在体内的高水平表达,为在体内研究该基因的功能提供了工具。
- 文川赛岩白纪民刘勇常菁王智崔春萍
- 关键词：肝肿瘤白细胞介素6
- HPPCn促进肝癌细胞迁移的作用和机制研究
- 肝细胞癌(Hepatocellular carcinoma,HCC)流行性广、病程短、病死率高,2010年统计数据显示在我国每年有约34.4万人死于肝细胞癌,占全球肝癌死亡人数55％。肝癌浸润和转移特性是影响肿瘤患者生存...
- 赛岩
- 关键词：肝肿瘤细胞迁移血管形成上皮细胞间质转化鞘氨醇激酶
- miR-17-92在急性肝脏损伤中的功能和作用被引量：1
- 2016年
- 目的利用体外细胞模型和基因敲低模型评价miR-17-92在急性肝脏损伤中的作用。方法利用慢病毒LV-miR-17-92感染正常人肝细胞系L02,获得稳定过表达miR-17-92肝脏L02细胞,利用四氯化碳模拟肝细胞损失,MTS法检测miR-17-92高表达L02细胞和对照细胞的存活率。利用Alb-cre转基因小鼠和miR-17-92-loxp转基因小鼠杂交,获得肝脏组织特异的miR-17-92基因敲低小鼠。利用四氯化碳和伴刀豆球蛋白A,分别建立两种急性小鼠肝损伤模型。取肝脏组织进行HE染色,眼球取血检测谷丙转氨酶、谷草转氨酶,进而评价miR-17-92在急性肝脏损伤中的功能和作用。结果 Q-PCR结果显示慢病毒感染显著提高了L02细胞中miR-17-92的表达。MTS结果显示四氯化碳处理明显抑制了L02细胞的生长,而与对照组相比,miR-17-92过表达提高了四氯化碳处理后细胞的存活率(P<0.05)。基因组PCR结果和肝脏Q-PCR分析均显示肝脏特异miR-17-92基因敲低小鼠肝脏中miR-17-92的表达显著降低。小鼠腹腔四氯化碳给药能够显著诱导野生型小鼠肝脏miR-17-92的水平,而基因敲低小鼠中miR-17-92表达无明显变化。在四氯化碳和伴刀豆球蛋白A肝脏损伤模型中,与对照组相比,miR-17-92肝脏特异性敲低小鼠的肝脏病理学损伤明显加重,提示miR-17-92可能参与了急性肝损伤的修复过程。结论肝脏损伤能够诱导miR-17-92表达增加,而miR-17-92过表达对四氯化碳诱导的肝细胞损伤具有保护作用,miR-17-92敲除则加重了四氯化碳和伴刀豆球蛋白A诱导的急性肝损伤。因此,miR-17-92在急性肝脏损伤中起保护作用。
- 王若素高慧英赛岩崔春萍
- 关键词：肝损伤CCL4伴刀豆球蛋白A
- HPPCn激活鞘氨醇激酶（SphK）信号促进肝脏损修复及其调控microRNA-17-92影响肝癌发生发展的作用和机制研究
- Hepatopoietin Cn(HPPCn)是我们实验室的研究人员发现的一个能够特异性促进肝细胞增殖的蛋白因子。HPPCn能促进肝细胞DNA合成和细胞分裂,以及70%肝脏切除小鼠的肝脏再生,并且对CCl4引起的大鼠肝纤...
- 赛岩
- 关键词：鞘氨醇激酶酒精性肝病肝细胞癌
- 文献传递
- HPPCn激活鞘氨醇激酶(SphK)信号促进肝脏损伤修复及其调控microRNA-17-92影响肝癌发生发展的作用和机制研究
- Hepatopoietin Cn（HPPCn）是我们实验室的研究人员发现的一个能够特异性促进肝细胞增殖的蛋白因子。HPPCn能促进肝细胞DNA合成和细胞分裂，以及70％肝脏切除小鼠的肝脏再生，并且对CCl4引起的大鼠肝纤...
- 赛岩
- 关键词：肝细胞癌微小核糖核酸肝细胞生长因子鞘氨醇激酶
- 文献传递
- 鞘氨醇激酶通过调控血管发生促进肝癌转移被引量：3
- 2012年
- 目的确定鞘氨醇激酶(SPK)在肝癌转移中的作用。方法用Ad-SPK1腺病毒感染肝癌细胞LM-3使其SPK过表达,Western blot检测SPK1表达及激活情况;Transwell、划痕实验检测肝癌细胞迁移情况。体外管状结构形成实验检测SPK对脐静脉内皮细胞(HUVEC)管状化形成的影响。建立SPK过表达裸鼠模型,体内检测肝癌迁移情况。结果在体外SPK对肝癌细胞的迁移无显著影响;Ad-SPK能够促进HUVEC管状结构形成;裸鼠皮下移植瘤结果显示Ad-SPK促进肿瘤生长和转移。结论鞘氨醇激酶通过调控血管发生促进肝癌转移。
- 赛岩代学强白纪民刘勇常菁范礼斌崔春萍
- 关键词：疾病模型肝肿瘤肿瘤移植鞘氨醇激酶
- 定量检测肝细胞生成素Cn的双抗体夹心ELISA检测方法的建立
- 2013年
- 目的建立定量检测肝细胞生成素Cn(HPPCn)的双抗体夹心ELISA方法。方法利用杂交瘤方法获得8个抗HPPCn单克隆抗体(mAb),并行SDS-PAGE和Western印迹对纯化抗体特性进行鉴定。利用镀金芯片法对8个抗体进行配对检测。通过方阵滴定法确定包被抗体和酶标抗体的最适工作浓度。以纯化的HPPCn抗原为标准品建立标准曲线。结果得到了8株稳定分泌抗人HPPCn抗体的杂交瘤细胞株,分别为Ab_65-29-6,Ab_3-3-3,Ab_9-34-1,Ab_4-8-12,Ab_7-8-10,Ab_2-30-23,Ab_11-11-12和Ab_12-27-23。8个抗体均能够特异结合HPPCn抗原,其中Ab_65-29-6与细胞中HPPCn结合的特异性最好。经抗体配对检测证实最佳配对组合为:Ab_2-30-23和Ab_4-8-12。包被抗体Ab_2-30-23和识别抗体Ab_4-8-12的最适工作浓度为2.5μg/ml,最适稀释度为1∶2000,标准曲线检测的线性范围为5.0～60 ng/ml。结论制备了可特异性检测人HPPCn蛋白的单克隆抗体,并建立了一种可用于定量检测人HPPCn的双抗体夹心ELISA方法。
- 代学强刘勇吴昊车薇高慧英赛岩吴飞林周旭崔春萍
- 关键词：双抗体夹心酶标抗体
- 小鼠原发性肝癌短期诱导模型的建立和评价被引量：4
- 2011年
- 目的用一个月的时间建立小鼠原发性肝癌模型。方法用二乙基亚硝胺(DEN)通过腹腔注射的方式对C57BL/6小鼠进行肝脏物理损伤和毒性诱导,再经过30%部分肝切除(PH)刺激肝再生,同时辅以二乙酰基芴(2-AAF)抑制肝实质细胞分裂,使DEN的毒性诱导作用直接作用于肝脏卵圆细胞(OVC),诱导突变。结果 模型组存活8只(8/12),将存活的各组小鼠通过放射免疫分析(R IA)、免疫组化(IHC)和免疫印迹(WB)方法鉴定短期诱导小鼠原发性肝癌建模是否成功,结果发现原发性肝癌的绝大多数指标明显改变。结论鉴定结果表明采用化学损伤结合部分肝切除方法,经过一个月时间成功诱导并建立了C57BL/6小鼠的原发性肝癌模型。
- 刘勇赛岩刘冬梅刘杨文川范礼斌崔春萍
- 关键词：肝细胞癌二乙基亚硝胺肝切除术肝再生卵圆细胞
