贾红梅
- 作品数:3 被引量:10H指数:2
- 供职机构:温州医学院附属第一医院更多>>
- 发文基金:温州市科技局科研基金浙江省自然科学基金温州市科技计划项目更多>>
- 相关领域:医药卫生更多>>
- ADMA对内皮生长晕细胞凋亡及其相关p38丝裂素活化蛋白激酶表达的影响被引量:4
- 2010年
- 目的:探讨非对称性二甲基精氨酸(ADMA)对内皮生长晕细胞(EOCs)凋亡和黏附能力的影响以及凋亡相关p38丝裂素活化蛋白激酶(p38MAPK)表达水平的变化。方法:分离脐血中单个核细胞并原代培养扩增内皮生长晕细胞,免疫细胞化学染色和荧光染色法鉴定其内皮细胞特性。将浓度为0、1、5、10、30μmol/L ADMA与内皮生长晕细胞作用48 h,流式细胞仪检测细胞凋亡率,DAPI染色及AnnexinV/PI双染观察凋亡细胞核形态变化。在倒置显微镜下观察计数重黏附细胞数来测定细胞黏附能力。用特异性的phospho-p38MAPK抗体的W esternb lotting检测p38MAPK的活性。结果:采用贴壁法培养的细胞具有多种内皮细胞特性。ADMA(1-30μmol/L)诱导内皮生长晕细胞的凋亡(P<0.01),同时ADMA(5-30μmol/L)使phospho-p38MAPK蛋白表达增加,两者作用均呈浓度依赖性。ADMA作用组和对照组相比,激光共聚焦显微镜下可见更显著的细胞凋亡形态学改变。除1μmol/L ADMA外,5、10、30μmol/L ADMA均可抑制内皮生长晕细胞的黏附能力。结论:ADMA能诱导内皮生长晕细胞发生凋亡并抑制其黏附能力,ADMA诱导内皮生长晕细胞发生凋亡可能与p38 MAPK磷酸化水平上升有关。
- 夏雪张怀勤贾红梅林以诺黄伟剑叶盛邵小琳
- 关键词:精氨酸细胞凋亡P38MAPK
- 非对称性二甲基精氨酸通过Caspase-3信号转导通路诱导晚期内皮祖细胞凋亡被引量:4
- 2010年
- 目的观察非对称性二甲基精氨酸对晚期内皮祖细胞的诱导凋亡作用,通过检测Caspase-3的活性探讨其诱导凋亡的信号转导通路。方法从脐带血中分离培养晚期内皮祖细胞。DiI-ac-LDL和FITC-UEA-Ⅰ双荧光染色法鉴定其内皮属性;不同浓度非对称性二甲基精氨酸(0、1、5、10和30μmol/L)作用于细胞48h,激光共聚焦显微镜观察细胞形态变化,流式细胞仪测定细胞凋亡率;不同浓度非对称性二甲基精氨酸作用于细胞48h或10μmol/L非对称性二甲基精氨酸作用于细胞不同时间(0、3、6和9h),酶标仪测Caspase-3活性;加入Caspase-3特异性抑制剂(ac-DEVD-CHO)半小时后加入10μmol/L非对称性二甲基精氨酸作用48h,流式细胞仪测细胞凋亡率。结果非对称性二甲基精氨酸作用于晚期内皮祖细胞后,可见典型的细胞凋亡形态学改变,且随非对称性二甲基精氨酸浓度增加细胞凋亡增加。在此过程中,Caspase-3被活化,其活化程度随非对称性二甲基精氨酸浓度增加及作用时间延长而升高。加入Caspase-3特异性抑制剂后细胞凋亡减少。结论非对称性二甲基精氨酸可呈浓度依赖性诱导晚期内皮祖细胞凋亡,此作用可能是通过激活内源性凋亡途径Caspase-3信号转导通路实现的。
- 贾红梅张怀勤夏雪林以诺叶盛黄伟剑杨德业
- 关键词:非对称性二甲基精氨酸晚期内皮祖细胞凋亡CASPASE-3
- 非对称性二甲基精氨酸对内皮生长晕细胞凋亡和功能的影响被引量:2
- 2010年
- 目的:探讨非对称性二甲基精氨酸(ADMA)对内皮生长晕细胞(EOCs)凋亡和功能的影响。方法:密度梯度离心法分离脐血单个核细胞,培养并扩增EOCs,免疫组化法、荧光染色法鉴定其内皮细胞特性。将浓度为0、1、5、10、30μmol/L的ADMA与EOCs作用48h,流式细胞仪检测细胞凋亡率,DAPI染色观察凋亡细胞核形态变化,并在倒置显微镜下检测细胞的黏附能力和成血管能力。结果:ADMA(1~30μmol/L)呈浓度依赖性的诱导EOCs的凋亡(P<0.01)。ADMA处理组于DAPI染色下可见更显著的细胞凋亡形态学改变。除1μmol/LADMA外,5、10、30μmol/LADMA均可抑制EOCs的黏附能力。10μmol/LADMA作用组与对照组相比,明显降低细胞成血管能力(P<0.01)。结论:ADMA可以诱导体外培养的EOCs发生凋亡并抑制其黏附能力和成血管能力。
- 夏雪张怀勤贾红梅林以诺黄伟剑
- 关键词:细胞凋亡非对称性二甲基精氨酸