贺华君
- 作品数：28 被引量：112H指数：7
- 供职机构：华东理工大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金上海市青年科技启明星计划更多>>
- 相关领域：生物学医药卫生理学化学工程更多>>
- SOD体内吸收及SOD受体
- 综述了有关肝等细胞内吞SOD过程中的形态学方面的证据和配体印迹等方面的结果，提示在某些细胞膜表面 可能存在与SOD特异性作用的受体或相关的蛋白质。
- 贺华君蔡金舜袁勤生
- 关键词：形态学细胞膜特异性作用肝细胞
- 文献传递
- 磁场对碳酸酐酶的影响被引量：10
- 1999年
- 建立了流动注射分析方法 ,评价了碳酸酐酶 (CA)的活性 ,并用此方法研究了磁场对酶催化活性的影响。发现磁场作用使酶活力升高 ,2 10mT下作用 4h ,其活力增加了 17% ;随着磁化时间的延长 ,其磁场效应基本上趋于一致 ,且观察到了磁酶效应的可逆性。实验还发现磁场使酶 -底物反应的活化能降低 ,并对可能机理作了初步探讨。
- 贺华君朱元保范秋领黄金明曹祉祥何双娥
- 关键词：磁场碳酸酐酶流动注射分析催化活性
- SOD的体内吸收与SOD受体
- 贺华君袁勤生
- 关键词：超氧化物岐化酶SOD
- 文献传递
- 磁场对纤维素酶的活性及构象的影响被引量：12
- 1998年
- 以羧甲基纤维素钠（CMC）为底物评价纤维素酶的活性，研究了不同条件下静磁场对酶的活性及构象的影响。9℃，pH4．0条件下磁化，其活性及荧光光谱均不见明显变化；但若改变反应时的pH，可使活性增加达16.4％；并发现磁处理后的酶有滞后效应及可逆性。较高温度下，磁化处理酶液，其活性及构橡均发生不同程度的变化，且对其抑制动力学表现为混合型抑制模式；其构象变化也基本上随失活的增加荧光强度增大。
- 贺华君朱元保钟科军曹祉祥何双娥
- 关键词：磁场纤维素酶催化活性构象可逆性荧光光谱
- 人EC-SOD的克隆及高效表达被引量：7
- 2002年
- 将编码人胞外超氧化物歧化酶 ( EC- SOD)成熟肽的 c DNA插入含 T7启动子的质粒p ET- 2 8a( + )中构建表达质粒 p ET- EC- SOD,表达菌株用 1 mmol/ L异丙基硫代 - β- D-半乳糖苷( IPTG)诱导表达 3h～ 5 h后 ,产生较多的重组人 EC- SOD,并形成包含体。SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳 ( SDS- PAGE)分析表明 ,表达的重组蛋白占菌体可溶性蛋白质的 2 6%以上。经纯化和复性后的EC- SOD比活为每毫克纯化酶蛋白 1 2 0 0 U。将 EC- SOD c DNA基因插入昆虫杆状病毒供体质粒p Fast Bac HTb中 ,重组杆状病毒 Bac HT- EC- SOD转染粉纹夜蛾 Tn- 5 Bl- 4细胞 ,经扩增后在细胞内进行表达。SDS- PAGE分析结果表明 ,粉纹夜蛾细胞中表达一相对分子质量约为 2 8ku的特异蛋白质带 ,Western blot分析表明 ,该特异条带即为 EC- SOD蛋白 ,连苯三酚自氧化法测得表达产物比活为每毫克细胞裂解物 2 60
- 范立强贺华君袁勤生杨冠珍吴祥甫
- 关键词：EC-SOD大肠杆菌昆虫杆状病毒基因克隆基因表达
- 人GPx1基因的克隆及其序列分析
- 贺华君施惠娟袁勤生
- 关键词：基因序列分析谷胱甘肽含硒酶
- 文献传递
- 口服蛋白质生物大分子药物吸收的研究进展
- 贺华君施惠娟袁勤生
- 关键词：蛋白质药物药物吸收
- 文献传递
- 人GPx1基因的克隆及其序列分析被引量：4
- 2001年
- 目的 克隆中国人谷胱甘肽过氧化物酶 (GPx1)的cDNA。方法 用逆转录 聚合酶链反应 (RT PCR) ,以中国人胎盘组织总RNA为模板 ,扩增中国人谷胱甘肽过氧化物酶 (GPx1)的cDNA ,进行序列分析。计算机分析其二级结构并比较已发现的人GPx家族的 5种GPx氨基酸序列。结果 从中国人胎盘组织中克隆的GPx1基因 ,与国外文献报道相比 ,只有 1个氨基酸残基发生变异 ,即leu2 2 变为Val2 2 ,该变化不影响GPx1活性中心的结构 ;人GPx的硒结合区及活性中心区域的氨基酸序列是高度保守的。结论 首次克隆了中国人体特异的胞质内GPx1基因 ,为其生物学活性及结构与功能的关系的研究创造了条件。
- 贺华君范立强袁勤生谢倩吴祥甫
- 关键词：基因克隆超氧化物歧化酶
- 中枢神经系统靶向性Mn-SOD的克隆和在大肠杆菌中的表达研究被引量：4
- 2001年
- 靶向性超氧化物歧化酶 (SOD)是治疗氧自由基引起神经细胞损伤所致疾病等的有效途径 .将破伤风毒素C部分 (tetanustoxinfragmentC ,TTC)基因与编码Mn SOD的cDNA融合克隆进pET 2 2b(+)载体 ,1mmol/L异丙基 D 硫代半乳糖 (IPTG)诱导在大肠杆菌中表达 .SDS 聚丙烯酰胺凝胶电泳 (PAGE)图谱可见约 71ku有表达产物条带 ,与理论计算值相符 ;蛋白质印迹 (Westernblot)分析显示 ,表达产物与抗Mn SOD及破伤风毒素的多抗有免疫反应 ,而且表达产物用邻苯三酚自氧化法测定具有SOD活性 .融合蛋白可作为有效的试剂靶向性输送Mn SOD到神经元细胞 。
- 张艳红贺华君袁勤生杨卫东吴祥甫
- 关键词：锰超氧化物歧化酶中枢神经系统克隆
- 分泌癌胚抗原肿瘤靶向性Cu,Zn-SOD的基因克隆及表达被引量：2
- 2001年
- 将 Cu,Zn- SOD与抗癌胚抗原 ( CEA)单链抗体基因 ( Sc Fv gene)融合 ,重组到含 T7启动子的表达载体 p ET- 2 2 b( + )中 ,构建表达质粒 p ETSOD- Sc Fv,并转化大肠杆菌 BL2 1 ( DE3) ,进行高效表达 ,表达物占菌体可溶性总蛋白的 1 8%。SDS- PAGE和蛋白质印迹图谱显示表达物相对分子质量为 41 k D,与融合基因编码蛋白质的理论值相符。该蛋白质在大肠杆菌中为分泌型表达 ,有利于纯化。RIA测定表明表达产物能特异性地与抗原 CEA结合 ,邻苯三酚法测定也表明表达产物具有 SOD酶的活性 ,该融合蛋白为分泌 CEA肿瘤的靶向性治疗及放疗。
- 贺华君杨卫东施惠娟吴祥甫袁勤生
- 关键词：癌胚抗原单链抗体克隆
