许惠艳
- 作品数:60 被引量:72H指数:4
- 供职机构:广西大学动物科学技术学院更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金广西壮族自治区自然科学基金广西壮族自治区科学研究与技术开发计划更多>>
- 相关领域:农业科学生物学文化科学医药卫生更多>>
- 不同时间间隔进行激活处理对猪早期ICSI胚发育的影响
- 2009年
- [目的]探讨不同激活方法对胞质内显微受精(ICSI)猪卵母细胞原核形成及其早期发育的影响。[方法]以体外成熟44~48 h的猪卵母细胞为试材,通过用ICSI法对其进行受精,然后用不同激活方法激活,研究了不同激活方法对ICSI卵母细胞原核形成和早期胚胎发育的影响。[结果]化学激活处理组的猪卵母细胞的原核形成率显著高于没有经过激活处理组,Ion(5 min)+6-DMAP(4 h)组的原核形成率为38.08%,Ion(5 min)+NCSU23(3 h)+6-DMAP(4 h)组的原核形成率为47.78%。各处理组的分裂率差异不显著,但2个激活处理组的分裂率较高。不经激活处理组的囊胚率为3.82%,Ion(5 min)+6-DMAP(4 h)组的囊胚率为15.49%,Ion(5 min)+NCSU23(3 h)+6-DMAP(4 h)组的囊胚率为10.70%。[结论]2种激活方法的原核形成率和囊胚率差异不显著,都可用于ICSI猪卵母细胞的激活。
- 许惠艳皮道元何若钢卢晟盛张玲潘天彪蓝海恩黄敏瑞卢克焕
- 关键词:卵母细胞显微受精胚胎培养
- 适合代谢组学水牛胚胎培养及检测胚胎发育潜能的方法
- 本发明公开了一种适合代谢组学的水牛胚胎二步培养法,该法经体外成熟、体外受精后获得假定受精胚胎进行群体培养,待胚胎发育到囊胚阶段,进行单胚胎培养。以此为基础,发明人还建立了一种检测水牛胚胎发育潜能的方法,即按上述培养方法进...
- 陆阳清许惠艳卢克焕朱平川
- 文献传递
- 基于AMEL基因位点差异的水牛性别PCR鉴别方法被引量:2
- 2015年
- 【目的】建立检测不同性别水牛染色体AMEL基因位点差异的PCR鉴别方法,为水牛早期胚胎性别鉴定及水牛分离精子重分析提供简便可靠的检验手段。【方法】采用PCR扩增不同性别水牛染色体中的AMEL基因,Clone Manager 9.0软件分析序列差异,BLASTn程序分析基因同源性,MEGA 6.06软件构建系统发育进化树。【结果】以水牛血液基因组DNA为模板、amel B1为引物,引物退火温度60℃,公水牛可扩增出两条清晰条带,长度分别为376(AMEL-X基因)和304 bp(AMEL-Y基因);母水牛仅扩增出1条清晰条带,长度为376 bp(AMEL-X基因)。与AMEL-X基因相比,水牛AMEL-Y基因缺失155-226区域的72 bp,同时存在20个基因型多态位点。临床检测结果证实,基于AMEL基因的PCR鉴别结果与实际性别的吻合率达100%,amel B1引物的灵敏度为0.5 ng模板量。BLASTn比对分析结果显示,水牛AMEL-X和AMEL-Y基因与不同哺乳动物的对应序列存在高度保守性,其相似性均接近或高于90%,与牛存在最近的亲缘关系。【结论】AMEL基因在哺乳动物中高度保守,且在不同性别水牛中呈多态性特征,以其作为分子靶标建立的水牛性别PCR鉴定方法切实可行,为水牛早期胚胎性别鉴定及水牛分离精子重分析提供了一个更便捷、高效的检验手段。
- 李婷婷左二伟李孟琪谢龙杨欢卢晟盛陆阳清许惠艳李永国陆之泽杨小淦卢克焕
- 关键词:水牛PCR性别鉴定
- 蔗糖和海藻糖对水牛卵母细胞玻璃化冷冻保护效果的比较被引量:4
- 2015年
- 本实验比较蔗糖或海藻糖作为非渗透性保护剂对水牛成熟卵母细胞冷冻效果的影响。将体外成熟的水牛卵母细胞随机分成对照组、蔗糖组、海藻糖组,研究玻璃化冷冻后的存活率、细胞骨架和孤雌激活后发育潜能的变化。结果表明:玻璃化冷冻中蔗糖组(89.68%)与海藻糖组(91.81%)的存活率差异不显著;冻融后的卵母细胞在细胞骨架方面的表现为:蔗糖组和海藻糖组的纺锤体结构、染色体形态与微丝分布正常率分别为34.69%、42.83%、39.13%和39.51%、49.43%、42.61%,两组间差异不显著(p>0.05),但均明显低于对照组(66.40%,71.82%,76.18%,p<0.01);在进一步研究发育潜能中发现,冻融后卵母细胞的卵裂率、囊胚率和囊胚细胞数在实验组中均无显著性差异(p>0.05),但两组的卵裂率、囊胚率均显著低于对照组(p<0.01)。综上所述,玻璃化冷冻时添加蔗糖或海藻糖作为非渗透性保护剂对水牛成熟卵母细胞的保护作用差异不明显,表明两者均可在冷冻时添加使用。
- 王彩玲张华智李智方许惠艳杨小淦陆阳清卢晟盛卢克焕
- 关键词:水牛玻璃化冷冻蔗糖海藻糖
- 桂科Ⅰ号成年公猪体细胞核移植胚胎的体外生产
- 2016年
- 目前,关于桂科Ⅰ号猪体细胞核移植胚胎体外发育的研究尚未见报道。本研究结果表明,桂科Ⅰ号成年公猪来源的皮肤成纤维细胞(adult boar fibroblast cell,ABFC)和刚出生小公猪来源的皮肤成纤维细胞(newborn boar fibroblast cell,NBFC)对体细胞核移植(somatic cell nuclear transfer,SCNT)胚胎的体外发育没有明显影响;在体外环境培养下,一种组蛋白去乙酰化酶抑制剂—Scriptaid(SCR)对桂科Ⅰ号公猪SCNT胚胎的囊胚率具有促进作用。研究进行3个实验,实验一结果表明,细胞呈现典型的成纤维细胞形态,且生长呈现S型;实验二结果表明,通过将ABFC与NBFC注射到去核的卵母细胞制作SCNT胚胎,ABFC和NBFC来源的桂科Ⅰ号公猪SCNT胚胎的融合率、分裂率、囊胚率和囊胚细胞数没有明显的差异(53.2%vs 61.7%,p>0.05;72.3%vs 75.7%,p>0.05;11.9%vs 11.7%,p>0.05;60.7 vs 57.5,p>0.05);实验三结果表明,通过500 nmol/L SCR处理ABFC来源的SCNT胚胎,与对照组相比,处理组的分裂率和囊胚细胞数没有明显的差异(82.6%vs 80.1%,p>0.05;42.9 vs 41.4,p>0.05);但添加500 nmol/L SCR的ABFC来源的SCNT胚胎的囊胚率明显比对照组的高(21.6%vs 11.5%,p<0.05)。数据表明桂科Ⅰ号成年公猪体细胞可作为供体细胞生产克隆胚胎,并且在体外环境培养下,通过500 nmol/L SCR处理极大地提高克隆胚胎的囊胚率,本研究可为下一步生产存活的桂科Ⅰ号SCNT猪奠定基础。
- 聂骏宇农素群朱向星谢炳坤全守能王雪芳肖鹏许惠艳杨小淦陆阳清张明卢克焕廖玉英卢晟盛
- 关键词:体细胞核移植胚胎组蛋白去乙酰化酶抑制剂
- 食蟹猴-猪异种体细胞核移植的研究
- 卢晟盛卢克焕许常龙梁明明许惠艳杨小淦
- 课题来源与背景:1、国家自然科学基金项目:食蟹猴体细胞异种核移植构建胚胎干细胞研究(项目批准号:30860039)。2、广西科学研究与技术开发计划项目:建立模式动物食蟹猴体细胞异种核移植技术平台(桂科能0815011-6...
- 关键词:
- 关键词:食蟹猴生物医学异种体细胞核移植动物实验
- 细胞松弛素B对水牛成熟卵母细胞玻璃化冷冻效果的影响
- 引言/目的 水牛是联合国粮农组织认为最具开发潜力和开发价值的家畜之一.水牛奶的蛋白质、脂肪,微量元素等含量均高于黑白花牛奶,故其高端奶制品更具竞争力.将水牛卵母细胞进行冷冻保存,可为保存种质资源以及为物种遗传改良提供机会...
- 王彩玲钟一治李敏玲杨小淦陆阳清卢晟盛许惠艳卢克焕
- 大菱鲆主要器官的组织学观察被引量:1
- 2007年
- 应用光学显微技术对大菱鲆(Scophthalmus maximus)心脏、胃、肠、肝脏、胰脏、脾脏、肾脏的结构进行了组织学观察。结果显示,大菱鲆的心脏分为心内膜、心肌层和心外膜,其中以心肌层为最厚。胃、肠的管壁由内向外分为:黏膜层、黏膜下层、肌层和浆膜。胃腺内偶见含有嗜酸性颗粒的细胞。肠皱襞较高,黏膜上皮为单层柱状上皮,杯状细胞散在于柱状上皮细胞之间。肝细胞体积较大,呈多边形,肝细胞以中央静脉为中心,排列成凹凸不平的肝细胞索,相邻的肝细胞索互相吻合连接成网状。胰脏大部分附着于肠壁上,少部分埋藏在肝脏内。脾脏实质分为白髓和红髓,中央动脉数量较多。肾脏无皮质髓质之分,由肾小体和肾小管构成。
- 张玲许惠艳薛艳霞辑开丽贾永起战歌沈萍刘慧房慧伶
- 关键词:大菱鲆组织学显微结构
- 食蟹猴耳部成纤维细胞体外培养体系的初步建立被引量:5
- 2009年
- 建立食蟹猴耳部成纤维细胞的体外培养体系,为食蟹猴体细胞核移植、转基因技术及治疗性克隆做准备。通过组织块培养法进行原代培养,成功分离了食蟹猴耳部成纤维细胞;原代培养后用0.25%胰蛋白酶+0.02%EDTA消化液消化细胞,用含10%FBS的DMEM对细胞进行培养,细胞在体外传至第25代;用含10%FBS和10%DMSO的DMEM为冷冻液对细胞进行冷冻保存,解冻传代后,细胞形态和生长速度没有明显变化;用细胞技术法绘制细胞的生长曲线显示,符合体外细胞生长规律;用吉姆萨染色法对不同代数细胞的染色体倍性进行分析,二倍体细胞所占比例为80%以上。
- 许丹娜许惠艳凌泽继卢晟盛谢莉萍卢克焕
- 关键词:食蟹猴体外培养
- 乙酰基--L--肉碱对水牛卵母细胞体外成熟影响的研究
- 卵母细胞成熟是影响雌性动物繁殖能力的重要因素之一,卵母细胞成熟过程需要消耗大量的能量,脂肪酸的β-氧化是卵母细胞成熟及后续胚胎发育的重要能量来源之一,在卵母细胞成熟及胚胎附植过程中发挥重要作用。乙酰基-L-肉碱(Acet...
- 许惠艳
- 关键词:水牛卵母细胞体外成熟