葛瑞民
- 作品数：3 被引量：3H指数：1
- 供职机构：北京大学基础医学院细胞生物学系更多>>
- 发文基金：福建省教育厅资助项目国家重点基础研究发展计划更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- shRNA腺病毒介导的JNK1 RNAi抑制U87MG人胶质瘤细胞的增殖被引量：2
- 2011年
- 目的研究腺病毒介导的shRNA对U87MG人胶质瘤细胞JNK1基因表达的抑制作用,以及对细胞增殖的影响。方法设计合成针对JNK1基因以及无义对照的shRNA序列,通过腺病毒介导shRNA的表达来下调JNK1的表达;Q-PCR和Western blot验证病毒效果;用BrdU掺入的方法来检测细胞的增殖情况。结果限制性酶切及DNA测序结果证实shRNA插入片段完全正确;Q-PCR和Western blot结果表明JNK1的表达与对照组相比明显下降;BrdU掺入结果表明Ad-shJNK1处理组细胞增殖显著降低。结论重组的JNK1shRNA腺病毒构建成功,JNK1的下调明显抑制了细胞的增殖,为深入研究JNK信号通路在神经肿瘤中的作用奠定基础。
- 董林葛瑞民祁楠沈丽
- 关键词：C-JUN氨基末端激酶小发夹RNA神经肿瘤
- 巢蛋白基因沉默通过激活细胞周期依赖性激酶(cdk5)促进大鼠神经胶质瘤细胞C6的迁移和增殖(英文)被引量：1
- 2011年
- 中间纤维蛋白巢蛋白(nestin)在各种胚胎前体细胞及成熟组织中均有表达.近年一些研究显示,巢蛋白的表达上调和一些恶性肿瘤的病理特征有相关性.但是,巢蛋白在干细胞分化及肿瘤发生中的作用还不为人知.在本研究中,我们运用短发卡状的RNA为工具,以大鼠神经胶质瘤细胞系C6为模型,对巢蛋白的功能进行了研究.划痕实验和迁移实验的结果均显示,巢蛋白基因沉默可以促进C6细胞的迁移.同时,BrdU渗入实验显示,此过程伴随着细胞增殖的增加.进一步研究显示,细胞周期依赖性激酶cdk5的活性在此过程中有显著的增加.此外,巢蛋白基因沉默所引起的迁移改变可以被cdk5特异性抑制剂roscovitine所回复,而对细胞增殖则没有显著影响.综上所述,本研究揭示了巢蛋白基因沉默与神经胶质瘤细胞的迁移和增殖相关,而cdk5是此过程的重要调节因子.
- 兰宝金鲁文静兰峰曹翠丽葛瑞民陈玲珑张小燕陆爱丽吴碧莲马晓雯沈丽
- 关键词：中间纤维巢蛋白迁移增殖
- 外源表达持续活化型Gli2对小鼠星形胶质细胞生物学特性的影响
- 2013年
- 目的探讨外源表达持续活化型Gli2对小鼠星形胶质细胞生物学特性的影响。方法构建可表达持续活化型Gli2的慢病毒载体,包装慢病毒颗粒,继而感染小鼠星形胶质细胞,对其生物学特性的改变进行鉴定。结果研究发现,含有外源表达的持续活化型Gli2的小鼠星形胶质细胞在神经干细胞培养基中连续培养13 d后可获得形成细胞球的能力,且形成的细胞球与正常的小鼠神经球在形态上相近;对所形成的细胞球做免疫荧光染色,结果显示神经干细胞的特异性标志物Nestin呈阳性。结论在小鼠星形胶质细胞中外源表达持续活化型Gli2后可使其获得形成神经球样细胞球的能力。
- 吴文涛葛瑞民董林刘秀秀张小燕沈丽
- 关键词：GLI2神经球星形胶质细胞NESTIN
