落继先
- 作品数：9 被引量：8H指数：2
- 供职机构：山西大学生命科学学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家教育部博士点基金山西省回国留学人员科研经费资助项目更多>>
- 相关领域：生物学农业科学医药卫生文化科学更多>>
- 摘除眼柄对河南华溪蟹蜕皮激素与几丁质酶含量和β-NAGase活性的影响被引量：4
- 2014年
- 为探索摘除眼柄对河南华溪蟹蜕皮机制的影响,采用灼伤挤压法摘除眼柄后,运用ELISA技术检测了河南华溪蟹血淋巴中蜕皮激素的含量和表皮组织中几丁质酶的含量,同时用比色法测定了表皮中N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶(β-NAGase)的活性。结果显示,摘除眼柄后河南华溪蟹血淋巴中蜕皮激素的含量出现先升高后下降的总趋势,在摘除眼柄96 h时,血淋巴中蜕皮激素含量上升到最大值[♂:(23.25±4.56)ng/L;♀:(35.75±7.15)ng/L]。表皮中几丁质酶的含量在摘除眼柄后亦出现先升高后下降的变化趋势,在摘除眼柄48 h达到最大[♂:(16.29±3.91)ng/L;♀:(30.49±5.28)ng/L],到120 h仍显著高于对照组。表皮中N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶(β-NAGase)的活性在摘除眼柄后持续升高,在144 h时达到最大[♂:(400.44±21.00)U/g;♀:(216.94±23.97)U/g],后逐渐下降,但依旧高于对照组。研究推测,摘除眼柄通过增加蜕皮激素含量、几丁质酶的含量和β-NAGase的活性来促进河南华溪蟹蜕皮。实验将为进一步研究甲壳动物蜕皮生长的调控机制提供新的理论基础。
- 裴思慧落继先邹恩民孙敏刘娜井维鑫王兰
- 关键词：蜕皮蜕皮激素几丁质酶N-乙酰-Β-D-氨基葡萄糖苷酶
- 转化生长因子β1诱导肺支气管上皮细胞发生上皮间质转化被引量：1
- 2020年
- 目的:研究转化生长因子β1(TGF-β1)对人肺支气管上皮细胞(HBEC)的细胞形态和上皮间质转化(EMT)标志基因表达的影响。方法:TGF-β1处理HBEC 0、1、2、3、4和5 d,观察细胞形态;运用免疫荧光实验,观察TGF-β1处理HBEC 4 d时的细胞骨架;TGF-β1分别处理0、1、3、6 h和0、1、2、3、4、5 d,提取总RNA后反转录并进行实时荧光定量PCR检测EMT标志基因α-SMA、β-catenin、SNAI1和E-cadherin的mRNA表达情况。结果:TGF-β1处理HBEC 2 d时就能够引起类似EMT的形态改变,在处理3、4和5 d时细胞形态改变尤为明显,大多数细胞变为纺锤形;免疫荧光实验结果显示,细胞骨架的分布随细胞形态发生改变;实时荧光定量PCR结果显示,SNAI1在3 h和Ecadherin在6 h的mRNA表达量显著升高;α-SMA和β-catenin的mRNA表达量在各时间点均显著降低;SNAI1和Ecadherin的mRNA表达量在1 d时显著升高,随后各时间点mRNA表达量都呈现不同程度的下降,SNAI1在3和4 d时mRNA表达量显著降低,α-SMA在2、4和5 d时mRNA表达量显著降低;E-cadherin各时间点mRNA表达量都呈现不同程度的降低,2、3和5 d的mRNA表达量显著降低;β-catenin的mRNA表达量在不同时间点均无显著变化。结论:TGF-β1刺激HBEC可观察到发生类似EMT的细胞形态改变,但EMT标志基因mRNA的表达量变化反复。
- 郭佳落继先
- 关键词：转化生长因子Β1上皮间质转化细胞骨架
- 多聚赖氨酸在悬浮细胞转染中的应用被引量：1
- 2019年
- 目的:悬浮细胞的转染较贴壁细胞存在一定难度,用多聚赖氨酸包被的细胞培养板培养悬浮细胞使其贴壁,用脂质体2000按照贴壁细胞转染的方法转染悬浮细胞,提供一种高效的转染悬浮细胞的方法。方法:悬浮细胞Jurkat或CCRF-CEM培养于包被了0.1 mg/mL多聚赖氨酸的细胞培养板,16 h后洗掉未贴壁的细胞,用脂质体2000分别将pWPXLd质粒或靶向人ABL1基因的小干扰RNA(siRNA)转染细胞,24 h后于荧光显微镜下观察绿色荧光蛋白印迹鉴定siRNA的干扰效率。结果:pWPXLd成功转染2种细胞,siRNA成功抑制了ABL1的表达。结论:质粒和siRNA均能成功转染,提供了一种高效可行的转染悬浮细胞的方法。
- 王俊婷落继先
- 关键词：悬浮细胞转染多聚赖氨酸小干扰RNA白血病
- 动物生物学虚拟仿真实验“斑马鱼胚胎发育重要阶段观察”的建设与应用探索
- 2023年
- 动物生物学实验是生物科学专业的基础实验课程。为了提高动物生物学实验教学质量,更直观、形象、深入地展示与讲解多细胞动物起源于单细胞动物的生物发生律,本研究本着“能实不虚、以虚补实、虚实结合”的原则,结合实验教学经验与科研项目成果,建设了“斑马鱼胚胎发育重要阶段观察”虚拟仿真实验,并将之应用于动物生物学实验教学。该虚拟仿真实验实现了动态观察斑马鱼胚胎发育重要阶段的全过程,具有动静结合、阶段与过程结合、虚实结合的“三结合”特色,获评首批“国家级虚拟仿真一流课程”。
- 王兰王茜张左兵孙敏刘娜贾如董峰许鹏杨映娟落继先李涌泉马文丽
- 关键词：斑马鱼胚胎发育虚拟仿真实验动物生物学
- 一种溪蟹单细胞悬液的制备方法
- 本发明提供了一种溪蟹单细胞悬液的制备方法，其步骤为：将溪蟹组织切成碎片，放入5-10℃、pH7.0-7.5的PBS溶液中，加入胰蛋白酶，进行酶解，用100-200目细胞筛过滤，酶液在8-12℃、800-1000rpm离心...
- 王金香王兰刘娜落继先王茜井维鑫
- 文献传递
- 一种高效抑制Jurkat细胞表达RhoGDI2的方法
- 2016年
- 目的:RhoGDI2是RhoGTP酶的解离抑制因子,在白血病细胞内表达量很高。构建Rho GDI2短发夹RNA(sh RNA)的慢病毒载体,并鉴定该慢病毒在急性T细胞白血病细胞系Jurkat内的抑制效率。方法:针对人rho GDI2基因序列合成sh RNA序列,通过限制性内切酶Bam HⅠ和XhoⅠ、T4DNA连接酶,将该sh RNA序列插入慢病毒载体p EN_h H1c,测序正确后通过LR重组酶与p DSL_hp UGIP重组,转化感受态细菌,筛选阳性克隆,测序鉴定正确后用脂质体法将质粒与ps PAX2、p MD2共转染293T细胞、包装病毒并侵染Jurkat细胞,采用荧光显微镜观察侵染效率、West-ern印迹鉴定Rho GDI2 sh RNA在Jurkat细胞内的表达。结果:构建的Rho GDI2 sh RNA慢病毒成功侵染Jurkat细胞并抑制Rho GDI2的表达。结论:构建并鉴定了RhoGDI2 shRNA的慢病毒表达质粒,为研究RhoGDI2在白血病中的作用奠定了基础。
- 卫丹落继先
- 关键词：JURKAT细胞短发夹RNA慢病毒白血病
- CXCL12-CXCR4在人类恶性肿瘤中的生物学功能被引量：2
- 2022年
- 转移和细胞浸润是实体癌和淋巴癌治疗的难点,也是疾病复发和死亡的主要原因。癌细胞的迁移是肿瘤转移和侵袭的前提。CXCL12-CXCR4通路在实体瘤和白血病的发病中发挥重要作用。CXCL12与其受体CXCR4之间的相互作用可以激活多种信号通路,调节不同的生理和病理生理过程。因此,阻断CXCL12-CXCR4的结合和/或下游通路在治疗各种疾病和癌症方面具有临床益处。目前,已发现一些CXCL12和CXCR4拮抗剂,并通过研究证实其在抗肿瘤活性方面取得了令人鼓舞的结果;但这些药物由于其严重的毒副作用未能大规模应用于临床患者。迫切需要研发新型CXCL12-CXCR4轴拮抗剂以治疗肿瘤。本文综述了CXCR4通路在实体肿瘤和白血病中的最新研究进展,并讨论了CXCR4通路在实体肿瘤和白血病中的治疗价值和未来的研究方向。
- 王森落继先Istvan Boldogh
- 关键词：趋化因子受体4白血病
- 一种转染Jurkat细胞的方法
- 本发明公开一种转染Jurkat细胞的方法，步骤包括：将0.1mg/mL多聚‑D‑赖氨酸加入24孔细胞培养板，4度静置过夜，吸出液体，超净台内开盖吹干，用PBS洗；向上述培养板接种Jurkat细胞，培养箱中培养，次日移除上...
- 落继先王俊婷井维鑫王兰
- 文献传递
- 昆明小鼠和DBA/2小鼠尾静脉注射L1210细胞的比较研究
- 2019年
- 目的:通过尾静脉注射L1210细胞建立昆明小鼠及DBA/2小鼠的白血病模型,观察肿瘤细胞的迁移情况以及小鼠存活时间,为后续L1210细胞迁移的细胞内信号通路研究及抗肿瘤药物筛选奠定基础。方法:常规培养小鼠白血病细胞L1210系,将昆明小鼠及DBA/2小鼠随机分为对照组(A、C)和实验组(B、D),实验组尾静脉注射5×10^6L1210细胞,对照组注射等体积的PBS。昆明小鼠组饲养56d,DBA/2小鼠组饲养14d。定期测量小鼠体重并观察小鼠形态,取濒死小鼠以及最后解剖的小鼠的心、肝、脾、肺等脏器称重并测量,统计结果。结果:A、B、C、D组小鼠的平均存活天数分别为56、56、13.83±0.37、10.33±3.40d。昆明小鼠实验组脾脏明显肿大,肺脏有少量白细胞浸润,心脏和肝脏无明显变化,无死亡现象;DBA/2小鼠注射L1210细胞后第7d开始出现死亡,随着饲养时间的延长,死亡率不断上升。结论:昆明小鼠或DBA/2小鼠尾静脉注射L1210细胞均可引起肿瘤细胞的体内浸润。昆明小鼠尾静脉注射L1210细胞存活时间长,适合长期观察或周期比较长的实验;DBA/2小鼠尾静脉注射L1210细胞存活时间短,但实验现象明显。后期研究可以针对不同的研究目的和实验周期来选择合适的实验模型。
- 郑慧广李鼎昀落继先
- 关键词：L1210细胞实验小鼠尾静脉注射白血病迁移
