茅奇峰
- 作品数：2 被引量：2H指数：1
- 供职机构：温州医学院更多>>
- 发文基金：浙江省自然科学基金浙江省重大科技专项基金温州市科技局科研基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 重组人IL-11的原核表达、纯化和鉴定被引量：1
- 2012年
- 以本实验室构建的pET24a-hrIL-11表达载体为模板,PCR扩增重组人白细胞介素11(hrIL-11)的基因,克隆入pET21a表达载体,转化BL-21(DE3),经异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)诱导产生hrIL-11/His融合蛋白,并经Western blot实验确认。原核表达的hrIL-11/His融合蛋白经变性后,利用亲和层析纯化,目的蛋白纯度达95%以上。纯化后蛋白经尿素梯度复性后,比活达到1×106 IU/mg。研究结果为进一步研究该蛋白在促进血小板增殖等方面的作用奠定了基础。
- 唐佳许晓玲聂小霞茅奇峰高基民
- 关键词：重组人白细胞介素11原核表达纯化生物学活性
- hIL-15-SA双功能融合蛋白的制备被引量：1
- 2010年
- 目的:对双功能融合蛋白hIL-15-SA的发酵及纯化工艺进行研究。方法:采用发酵罐高密度发酵hIL-15-SA工程菌,通过镍柱亲和层析及阴离子交换层析纯化目的蛋白。免疫印迹分析产物,淋巴细胞增殖试验以及细胞锚定试验检测双功能融合蛋白hIL-15-SA的生物学活性。结果:采用半合成培养基,以3%的接种量,pH值为7.2发酵可得到湿菌47 g/L,21.15 g/L包涵体。经纯化后目的蛋白纯度为97%。细胞增殖试验和细胞表面锚定修饰试验表明,经纯化复性的hIL-15-SA融合蛋白具有双重生物活性。结论:本研究获得了高产量、高纯度的hIL-15-SA双功能融合蛋白,为后续的体内生物学功能研究奠定了基础。
- 余宏盛严耀明茅奇峰高基民
- 关键词：白细胞介素15链亲和素融合蛋白中试工艺
