范双喜
- 作品数：7 被引量：8H指数：2
- 供职机构：广东省计划生育科学技术研究所更多>>
- 发文基金：广东省医学科学技术研究基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 比较四种冷冻保护剂对大鼠睾丸组织结构的保护作用被引量：3
- 2009年
- 目的比较4种保护剂对睾丸组织结构的冷冻保存效果,探索冷冻睾丸组织的最佳保护剂。方法选取6只雄性成龄SD大鼠(体重210～225g)的新鲜睾丸组织,分别用以下四种保护剂进行冷冻保存:甘油-卵黄-柠檬酸钠(Ⅰ组);甘油-蔗糖(Ⅱ组);丙二醇(PrOH,Ⅲ组);二甲亚砜(DMSO,Ⅳ组)。光镜和透射电镜综合分析非冷冻睾丸组织和冷冻1个月后的睾丸组织的完整性,用光镜对各组进行评分,并用非参数秩和检验方法对各组之间的差异进行统计分析。结果光镜观察,冷冻组和非冷冻组睾丸组织的生精小管、间质细胞及基质的评分差异没有统计学意义(P>0.05),但基底膜的两组评分差异有统计学意义(P<0.05),显示基底膜损伤较严重;用秩和检验各组保护剂对睾丸组织的冻存效果,分析结果显示各冷冻组对生精小管和间质细胞的损伤差异有统计学意义(P<0.05),Ⅰ组和Ⅳ组的生精小管评分高于其它各组。透射电镜观察发现Ⅳ组对睾丸组织的精原细胞、支持细胞和间质细胞损伤轻微,明显优于其它各组。结论DMSO作低温保护剂对睾丸组织的保护作用优于甘油-卵黄-柠檬酸钠、甘油-蔗糖及丙二醇。
- 唐立新江芳范双喜蒋汉琼王奇玲马春杰邓顺美文任乾
- 关键词：睾丸
- 供精人群艾滋病知识和行为调查被引量：3
- 2006年
- 黄江涛唐立新王奇玲马春杰庄嘉明范双喜
- 关键词：艾滋病知识供精者人类辅助生殖技术人类精子库
- 冻存后大鼠睾丸组织精原干细胞的体外分离培养被引量：1
- 2008年
- 目的研究冻存的大鼠睾丸组织复苏后精原干细胞(SSCs)体外分离培养的生物学特性。方法用二甲基亚砜(DMSO)作低温保护液,于液氮中冻存。4个月后复苏冻存的睾丸组织,进行SSCs的分离纯化,在小鼠胚胎成纤维细胞(MEF)饲养层进行培养,并利用碱性磷酸酶(AKP)鉴定SSCs。结果从冻存睾丸组织分离的精原干细胞在MEF饲养层上的正常形态、增殖能力与新分离的精原干细胞无明显不同。结论大鼠睾丸组织的冷冻复苏并不影响精原干细胞其原有的生物学特性,包括其正常的贴壁、形态和增殖能力。
- 江芳唐立新范双喜文任乾马春杰邓顺美徐珊珊
- 关键词：睾丸精原细胞细胞培养技术
- 4种冷冻保护剂睾丸组织冷冻方法的研究
- 目的：试图发现最佳的睾丸组织冷冻程序,对4种冷冻保护剂(甘油、丙三醇、二甲亚砜和精子保护剂)及不同的睾丸冷冻方法进行比较实验。方法：将雄性成龄 SD 大鼠(210～225 g)的睾丸组织分别用4种冷冻方法进行冷冻保存,并...
- 唐立新范双喜马春杰文任乾蒋汉琼王奇玲江芳庄嘉明
- 文献传递
- 精原干细胞在冻存后小鼠MEF饲养层的培养
- 目的:探讨精原干细胞(SSCs)在冻存小鼠胚胎成纤维细胞(MEF)饲养层的培养增殖情况.
方法:取孕12～13天的昆明小鼠胚胎分离MEF，利用体外培养体系，对MEF进行培养、传代、冻存之后利用冻存的MEF制备饲...
- 江芳唐立新范双喜文任乾马春杰邓顺美徐珊珊
- 关键词：胚胎成纤维细胞冷冻保存精原干细胞
- 文献传递
- 以支持细胞为饲养层培养冻存后大鼠精原干细胞研究被引量：1
- 2009年
- 目的:研究冻存的精原干细胞体外分离培养的生物学特性,为今后冻存精原干细胞的批量培养和长期利用提供依据。方法:取7～8d的SD雄性大鼠,分离睾丸组织,用两步酶消化法和差速时间贴壁法,分离精原干细胞和支持细胞。以二甲基亚砜(DMSO)作冷冻保护液,将分离到的精原干细胞放置于液氮中冻存;利用体外培养体系,进行支持细胞的培养和饲养层的制备;然后将复苏的精原干细胞接种到支持细胞饲养层上培养,并利用碱性磷酸酶鉴定精原干细胞。结果:用两步酶消化法和差速贴壁法能分离到纯度较高的精原干细胞和支持细胞,冻存的SSCs解冻后能在支持细胞饲养层上贴壁、生长、增殖,碱性磷酸酶活性鉴定呈阳性。结论:冻存后精原干细胞在体外支持细胞饲养层上呈集落样生长,并能长时间维持细胞集落形态及数目,可为体外研究药物或毒物干扰精原干细胞提供细胞模型。
- 江芳唐立新马春杰文任乾邓顺美汤乐范双喜
- 关键词：支持细胞饲养层冷冻保存精原干细胞
- 大鼠精原干细胞的分离纯化
- 目的:探讨大鼠精原干细胞的分离纯化。方法:采用酶消化法制备8d Wister 大鼠睾丸单细胞悬液;Percoll 液不连续密度梯度分离精原干细胞;用贴壁速度的差异纯化精原干细胞.光镜观察精原干细胞的形态结构特征;应用碱性...
- 唐立新范双喜文任乾江芳徐姗姗邓顺美马春杰唐运革
- 关键词：精原干细胞分离纯化碱性磷酸酶活性
- 文献传递
