胡蔚蓉
- 作品数:3 被引量:2H指数:1
- 供职机构:华东理工大学生物工程学院生物反应器工程国家重点实验室更多>>
- 相关领域:医药卫生化学工程更多>>
- 人apoA-I基因启动子转录上调剂筛选系统的建立与应用被引量:2
- 2007年
- PCR扩增含有apoA-I基因的转录调控序列的启动子片断(376 bp),克隆入含有荧光素酶报告基因和新霉素抗性基因的pGL3B-neo载体中,构成受apoA-I启动子调控的重组报告基因质粒pGL3B-neo::apo,稳定转染人肝癌细胞株HepG2。通过细胞有限稀释法筛选稳定表达荧光素酶活性的细胞株SAPOA-I。经apoA-I转录调控因子PPARα激动剂的鉴定和细胞接种密度、溶剂使用浓度等条件的优化,成功建立了靶向apoA-I基因启动子转录活性的报告基因筛选体系。应用该体系对400多种降脂中药提取物进行筛选,泽泻、罗布麻叶、山楂等提取物显示出较好的上调活性,与文献报道采用动物模型研究的结果一致。
- 邓婷纪伟连霁虹郭雷胡蔚蓉龚邦强
- 关键词:荧光素酶报告基因药物筛选降脂中药
- 建立一个基于报告基因的靶标筛药系统筛选上调ABCA1基因转录的中药提取物
- 2007年
- ATP结合盒转运蛋白A1(ABCA1)具有催化外周细胞过量胆固醇和磷脂外向流出的功能。本实验将ABCA1启动子序列克隆到含有荧光素酶报告基因和新霉素抗性基因的pGL3B-neo载体中,并将得到的重组质粒pGL3B-neo/ABCA1转染入人肝癌细胞(hepG2)。通过稀释培养法最终得到含有重组质粒的稳定细胞系SABCA1。利用这个报告基因为基础的药物筛选系统,筛选了100多种中药提取物。通过荧光素酶活性测试,相对活性达到180%以上的有4种中药提取物,并最终挑选能明显激活ABCA1基因启动子的鬼箭羽水提组分进一步研究,得出半数有效浓度(EC50)为48.06 mg/L。此外,利用基于apoA1基因的药物筛选系统验证得出鬼箭羽水提组分也能促进apoA1基因的表达。
- 胡蔚蓉连霁虹纪伟郭雷龚邦强
- 关键词:高密度脂蛋白胆固醇逆向转运
- 建立abca1药物靶标筛选平台筛选中草药活性成分的研究
- 本研究以具有外向流出功能的atp结合盒转运蛋白a1的基因表达调节元件为靶点,通过将abca1启动子部分基因亚克隆进带有荧光素酶报告基因和neo基因的pgl3b-neo表达载体,随后将该重组报告基因载体pgl3bn/abc...
- 胡蔚蓉
- 关键词:中草药活性成分
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