胡志明
- 作品数：3 被引量：3H指数：1
- 供职机构：广东省梅州市人民医院更多>>
- 发文基金：广东省科技计划工业攻关项目国家自然科学基金广东省自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 2型糖尿病性勃起功能障碍大鼠模型的构建被引量：2
- 2016年
- 目的探究2型糖尿病性勃起功能障碍(T2DED)大鼠模型的构建方法。方法 SD大鼠30只,随机分为两组:对照组10只,饲养普通饲料;实验组20只,饲养高脂饲料。饲养8周后,实验组腹腔注射小剂量链脲佐菌素(streptozotocin,STZ,30mg/kg),对照组注射同等剂量的柠檬酸钠-柠檬酸缓冲液。腹腔注射3d后采用剪尾法测定随机血糖,≥16.7mmol/L则认为2型糖尿病(T2DM)建模成功。糖尿病(DM)成模后于2、4、6、8周各测定一次随机血糖及体质量;于糖尿病成模后4、8周进行进行腹腔葡萄糖耐量试验(intraperitoneal glucose tolerance test,IPGTT),及腹腔胰岛素耐量试验(intraperitoneal insulin tolerance test,IPITT);于糖尿病成模后8周行阿扑吗啡(apomorphine,APO)实验,并测定每只大鼠的阴茎海绵体内压力(intracavemous pressure,ICP)。测压完成后,收集大鼠的血清,进行甘油三酯(triglyceride,TG),总胆固醇(total cholesterol,TC),高密度脂蛋白胆固醇(high density lipoprotein cholesterol,HDL-C)和低密度脂蛋白胆固醇(low density lipoprotein cholesterin,LDL-C)含量的测量。结果(1)高脂喂养及小剂量STZ注射后,实验组20只大鼠有17只血糖>16.7mmol/L,与对照组相比,在注射后第2、4、6、8周实验组大鼠血糖均明显升高(P<0.05)。(2)IPGTT试验提示糖尿病大鼠存在胰岛素抵抗;IPITT试验提示糖尿病大鼠对胰岛素的敏感性下降。与对照组相比,实验组血清中的TG、TC、HDL-C、LDL-C含量显著升高(P<0.05);(3)APO实验提示对照组大鼠勃起率为100%,实验组中STZ注射后2只大鼠死亡,余15只大鼠有2只可观察到勃起。行ICP测定,实验组大鼠的ICP最大值明显低于对照组大鼠(P<0.05)。结论高脂喂养联合小剂量STZ注射可成功构建T2DED的大鼠模型,APO实验可以有效可靠地筛选ED动物模型。
- 李浩黄展森胡志明齐涛陈地灵应颖张宇张滨陈俊
- 关键词：勃起功能障碍
- 大鼠PnNOS基因修饰脂肪源性干细胞的构建
- 2014年
- 目的构建过表达大鼠阴茎神经源性一氧化氮合酶(PnNOS)基因大鼠脂肪源性干细胞(ADSCs),为基因修饰ADSCs移植治疗勃起功能障碍(ED)大鼠模型提供种子细胞。方法获取大鼠PnNOS基因,并与线性化的腺病毒真核表达载体pDC315-EGFP定向克隆连接。构建正确的pDC315-PnNOS-EGFP穿梭质粒转染293 T细胞,采用Western Blot检测PnNOS基因在293 T细胞中的表达情况。利用AdMax腺病毒包装系统包装产生重组腺病毒,包装后扩增纯化并测定病毒滴度。PnNOS基因重组腺病毒转染大鼠ADSCs,观察GFP表达情况和Western Blot检测PnNOS基因表达情况。结果经PCR鉴定、限制性酶切分析、测序鉴定和目的质粒Western Blot表达检测鉴定,证实pDC315-PnNOS-EGFP重组腺病毒载体构建成功。重组腺病毒包装成功且病毒滴度为5.0×109 PFU/ml。Western Blot于大鼠ADSCs中检测到约161 KDa大小条带,其与PnNOS蛋白分子量大小基本相一致。结论大鼠PnNOS基因修饰的ADSCs构建成功,从而为基因修饰ADSCs移植治疗ED提供了良好的基因工程细胞。
- 陈俊胡志明转黎张滨肖恒军齐涛王博黄展森
- 关键词：脂肪源性干细胞重组腺病毒勃起功能障碍
- 糖尿病性勃起障碍大鼠阴茎海绵体平滑肌组织形态学及α-MA表达量的变化被引量：1
- 2013年
- 目的探讨糖尿病性勃起功能障碍（DED）大鼠阴茎海绵体组织形态学及平滑肌Q-SMA表达量的变化。方法建立DED大鼠模型，取阴茎海绵体组织，应用Masson三色法检测平滑肌／胶原纤维相对含量；用免疫荧光染色法检测Q平滑肌肌动蛋白（α-SMA）的表达情况。结果DED组大鼠平滑肌／胶原纤维比值（0．15±0．05）明显低于和对照组大鼠（0．21±0．06，P〈0．05）。DED组Q．SMA蛋白平均光密度值为0．24±0．20，明显低于对照组0．52±0．33，差异具统计学意义（P〈0．05）。结论DED大鼠阴茎海绵体平滑肌细胞数量减少、胶原纤维密度增加、海绵体平滑肌细胞由收缩型向合成型转化，可能是DED的发病机制之一。
- 陈俊胡志明张滨齐涛王博李晓明
- 关键词：勃起功能障碍平滑肌肌动蛋白类
