肖红利
- 作品数：24 被引量：53H指数：4
- 供职机构：中国农业科学院农产品加工研究所更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家重点基础研究发展计划转基因生物新品种培育专项更多>>
- 相关领域：农业科学生物学环境科学与工程化学工程更多>>
- 鉴定大丽轮枝菌致病型的方法和试剂盒及含有的核酸和引物对
- 本发明提供了一种核酸，该核酸具有SEQ？ID？NO：1所示的序列。本发明还提供了扩增如上所述的核酸的引物对。本发明还提供了一种鉴定真菌菌株致病型的方法，所述真菌菌株为大丽轮枝菌，该方法包括以下步骤：（1）制备含有大丽轮枝...
- 戴小枫李蕾陈捷胤马雪峰孔志强包郁明肖红利桂月晶徐明
- 文献传递
- 核酸和引物对以及鉴定大丽轮枝菌致病型的方法和试剂盒
- 本发明提供了一种核酸，该核酸具有SEQ ID NO：1所示的序列。本发明还提供了扩增如上所述的核酸的引物对。本发明还提供了一种鉴定真菌菌株致病型的方法，所述真菌菌株为大丽轮枝菌，该方法包括以下步骤：（1）制备含有大丽轮枝...
- 戴小枫李蕾陈捷胤包郁明孔志强马雪峰桂月晶肖红利王新艳
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- 大丽轮枝菌分泌蛋白提取方法比较被引量：3
- 2014年
- 【目的】采用超滤法(UF)、三氯乙酸沉淀法(TCA)、离子交换富集法(IEX)分别从大丽轮枝菌(Verticillium dahliae)高致病性菌株VdG1培养上清液中提取分泌蛋白,对提取样品进行质谱鉴定。寻找适合大丽轮枝菌分泌蛋白的提取方法,为大丽轮枝菌分泌蛋白组深入研究奠定基础。挖掘大丽轮枝菌分泌蛋白中潜在的致病相关蛋白,为其深入功能验证及致病机理研究提供平台。【方法】3种方法提取大丽轮枝菌VdG1分泌蛋白,shot-gun方法进行质谱鉴定。利用生物信息学软件WoLFPSORT、SignalP、TMHMM、PHOBIUS对其中经典分泌蛋白进行预测。通过CAZy和PHI数据库进行经典分泌蛋白中碳水化合物水解酶(CAZy)和病原菌寄主互作因子(PHI)注释,BLASTp软件进行RxLx、LysM、Cys Pattern等模体蛋白比对分析。提取的蛋白样品接种感病棉种(军棉1号)进行样品生物学活性及致病性检测。【结果】TCA法、IEX法和UF法制备大丽轮枝菌分泌蛋白,其提取效率分别为1.18、0.96和0.56 mg·L-1。SDS-PAGE电泳检测显示UF法提取的蛋白样品条带少而模糊。而TCA法和IEX法提取的蛋白样品条带较多,样品的纯度也较高;经生物信息学软件预测分析,提取的蛋白样品中含有经典分泌蛋白分别为124、112和75个;质谱鉴定的分泌蛋白中含有潜在致病因子分别为98、85和57个;另外,IEX法制备大丽轮枝菌分泌蛋白效果较好,具有小分子偏好性,且能够保持样品的生物学活性,该蛋白样品接种棉花叶片能够引起萎蔫、坏死的症状。【结论】3种方法提取大丽轮枝菌分泌蛋白,UF法提取效率最低,纯度最差,蛋白数量最少,蛋白样品中含有潜在的毒素蛋白数量也最少,而且对于大体积处理相当耗时。TCA法和IEX法都适合大丽轮枝菌分泌蛋白的制备,但是TCA法制备过程中不能保持样品的生物学活性,后续适合于2-D电泳检测等试验。IEX法首次应用于病原菌分泌蛋白�
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- 关键词：大丽轮枝菌分泌蛋白LC-MS/MS
- 大丽轮枝菌培养基及其制备方法和培养大丽轮枝菌的方法
- 本发明公开了一种大丽轮枝菌培养基，该大丽轮枝菌培养基含有1-3g/L的NaNO<Sub>3</Sub>、0.3-0.7g/L的KCl、0.5-2g/L的K<Sub>2</Sub>HPO<Sub>4</Sub>、0.005...
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- 大丽轮枝菌侵染抗感棉种的组织学过程观察被引量：6
- 2014年
- 棉花黄萎病是一种极难防治的土传性真菌病害，研究病原菌侵染棉花的组织学过程对致病机理解析和抗病资源利用具有重要意义。本研究利用绿色荧光蛋白标记的大丽轮枝菌系统研究了其对抗病棉种海岛棉7124和三裂棉、感病棉种军棉1号和戴维逊棉的侵染过程。结果表明，大丽轮枝菌对抗/感棉种的初始侵染没有明显差异，接菌5 h后，分生孢子均能吸附在感病和抗病棉种的根表面。但侵染过程存在显著差异，侵染感病棉种中病原菌3～5 d到达皮层，5～7 d达到维管束，随后迅速扩展繁殖，侵染14 d后即完成系统侵染，并开始产生黄萎病症状;而病原菌侵染抗病棉种，5～7 d才侵入皮层，7～10 d到达维管束，14 d后仍无法扩展，病原菌的定殖与发展受到限制，无法形成系统侵染，较少形成黄萎病症状。本研究通过绿色荧光蛋白标记大丽轮枝菌对抗/感棉种的侵染过程研究，为大丽轮枝菌致病机理研究和抗性资源利用提供了强有力的理论依据。
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- 关键词：黄萎病大丽轮枝菌绿色荧光蛋白侵染过程
- 防治棉花黄萎病的菌剂及其制备方法和它们的应用
- 本发明提供了一种防治棉花黄萎病菌剂，该菌剂包括培养基和菌体，其中，所述菌体包括枯草芽孢杆菌（Bacillus subtilis）、短小芽孢杆菌（Bacillus pumilus）、蜡样芽孢杆菌（Bacillus cere...
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- 鉴定大丽轮枝菌致病型的试剂盒和基因及其方法
- 本发明提供了一种高致病性大丽轮枝菌(Verticillium dahliae)基因，其中，该基因具有SEQ ID NO：1所示的核苷酸序列。本发明还提供了一种鉴定大丽轮枝菌致病型的方法，该方法包括以下步骤：（1）制备含有...
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- 利用特异基因鉴定高致病型大丽轮枝菌的方法及其应用
- 本发明提供了一种高致病型大丽轮枝菌(Verticillium dahliae)基因，其中，该基因具有SEQ ID NO：1所示的核苷酸序列。本发明还提供了一种鉴定大丽轮枝菌致病型的方法，该方法包括以下步骤：（1）制备含有...
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- 一种制备大丽轮枝菌分泌蛋白的装置
- 本实用新型提供了一种制备大丽轮枝菌分泌蛋白的装置，该装置包括：离子交换柱、超滤器、脱盐柱和干燥器；其中，在从上游至下游的方向上，所述离子交换柱与所述超滤器之间连接有带阀门的液体管路，所述离子交换柱与所述脱盐柱之间连接有带...
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- 一种多座式圆底烧瓶瓶托
- 本实用新型公开了一种多座式圆底烧瓶瓶托，为解决现有圆底烧瓶瓶托通用性差等问题而设计。该多座式圆底烧瓶瓶托包括瓶托本体，所述瓶托本体上开设有多个贯通的容置孔，所述容置孔为孔径自上而下逐渐减小的阶梯孔。所述阶梯孔由多个阶梯孔...
- 戴小枫包郁明孔志强陈捷胤李蕾马雪峰肖红利徐明王新艳
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