祝欣刚
- 作品数:2 被引量:4H指数:1
- 供职机构:复旦大学生命科学学院生物化学与分子生物学系更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金更多>>
- 相关领域:医药卫生更多>>
- 人结肠腺癌细胞系Caco-2单细胞层短期培养法及其评价被引量:3
- 2012年
- 目的利用丁酸建立一种短期培养人结肠腺癌细胞系Caco-2(human colon adenocarcinoma cell line)单细胞层的方法。方法使用不同成分的含丁酸培养基培养Caco-2单细胞层,通过显微镜观察细胞形态学特点、测定跨膜电阻(transepithelial electrical resistance,TEER)和荧光黄通透量等指标,评价其完整性;通过检测碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,AKP)活性,评价其细胞极化程度;通过RT-PCR评价其对主要药物转运蛋白表达的影响。结果使用短期培养法获得的Caco-2单细胞层形态完整,TEER>500Ω.cm2,漏出标志物荧光黄表观分配系数(apparent permeability,Papp)<5×10-5 cm/s,表明单细胞层的完整性良好。同时肠腔侧(apical,AP)AKP活性显著升高,表明单细胞层出现明显的极性分化。短期培养与21天培养所得的Caco-2单细胞层中,药物转运蛋白P-糖蛋白(P-glycoprotein,P-gp)和多药耐药相关蛋白2(multidrug resistance-associated protein 2,MRP2)的RNA表达水平基本一致。结论含丁酸的无血清培养基可促进Caco-2单细胞层的快速形成,利用该法建立的Caco-2细胞模型符合各项指标的要求,可用于研究口服药物转运的吸收机制。
- 祝欣刚杨青
- 关键词:CACO-2丁酸药物转运分化
- 色胺酮在Caco-2细胞模型上的吸收转运研究及Caco-2模型短期培养法的建立
- 色胺酮属吲哚喹唑啉类生物碱,具有抗细菌、抗真菌、抗肿瘤等多种生物学活性,目前作为抗结核病及抗肿瘤候选药物已经进入临床前研究阶段。现有研究多集中在其药效及药理学研究,但是其药代动力学方面的研究几乎没有。本课题第一部分的研究...
- 祝欣刚
- 关键词:色胺酮P-糖蛋白多药耐药相关蛋白2丁酸
- 文献传递