王芝
- 作品数：8 被引量：8H指数：2
- 供职机构：第三军医大学西南医院更多>>
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- 大鼠肺毛细血管周细胞的培养
- 2013年
- 目的 建立可靠、简便的肺毛细血管周细胞的培养方法.方法 选择健康雄性SD大鼠6只,6～7周龄,体重200 ～ 220 g,采用Ⅰ型胶原酶消化法和微孔过滤法分离肺毛细血管片段,用含10％胎牛血清和0.5％青霉素链霉素混合液的高糖DMEM/F12 1∶1培养基选择性培养肺毛细血管周细胞.倒置相差显微镜下观察细胞形态和生长状态,采用免疫荧光法计数α-平滑肌肌动蛋白（α-SMA）、结蛋白、神经元-胶质抗原2（NG2）、分化抗原31（CD31）的阳性细胞,计算阳性细胞百分比.结果 镜下细胞呈梭型或星芒状,单核,偶见双核,核卵圆形,细胞浆丰富,漩涡或栅栏状生长,无接触性抑制.免疫荧光测定α-SMA阳性细胞百分比为（99.0±1.2）％,结蛋白阳性细胞百分比为（96.0±2.1）％,NG2阳性细胞百分比为（99.0±0.7）％,CD31阳性细胞百分比为0.结论 成功建立了一种可靠、简便的大鼠肺毛细血管周细胞的培养方法.
- 陈兵易斌杨勇王芝陈杨祖宝利鲁开智
- 关键词：周细胞细胞培养技术微脉管
- 肝肺综合征大鼠肺微血管内皮细胞肌样分化时转化生长因子β1表达的变化被引量：5
- 2011年
- 目的评价肝肺综合征（HPS）大鼠肺微血管内皮细胞（PMVECs）肌样分化时转化生长因子β1（TGF-β1）表达的变化。方法健康SD大鼠40只，雌雄不拘，3～4月龄。采用随机数字表法，随机取20只大鼠，采用慢性胆总管结扎法制备HPS模型，剩余大鼠行假手术，取腹主动脉血样4ml，离心后取血清。另取健康成年SD大鼠10只，原代培养、纯化及鉴定PMVECs。PMVECs接种于低糖DMEM培养基（10^6个／cm2），采用随机数字表法，将细胞随机分为2组：对照组（C组）和HPS组，每组24皿。C组给予正常大鼠血清，HPS组加入HPS大鼠血清，血清终浓度为10％。于细胞孵育24h（T1）、48h（T2）和72h（T1）时分别采用RT-PCR法和Westernblot法测定PMVECs内平滑肌肌球蛋白重链（SM—MHC）、平滑肌肌动蛋白a（SM-α-actin）、肌钙蛋白、TGF-β1 mRNA及其蛋白的表达。结果C组PMVECs内SM-α-actin、肌钙蛋白表达阴性，可见少量SM．MHC表达，HPS组PMVECs内SM-MHC、SM-α—actin、肌钙蛋白表达阳性。与C组比较，HPS组SM—MHC、TGF-β1mRNA及其蛋白的表达上调（P〈0．05）；与T1时比较，T2，3时HPS组SM-MHC、SM-α-actin、肌钙蛋白、TGF—p1mRNA及其蛋白的表达上调（P〈0．05）；与T2时比较，L时HPS组SM-MHC、SM-α-actin、肌钙蛋白、TGF-β1mRNA及其蛋白的表达上调（P〈0．05）。结论TGF-β1在HPS大鼠PMVECs肌样分化时可能起到重要的调控作用。
- 王芝易斌国斌鲁开智
- 关键词：肝肺综合征内皮细胞转化生长因子Β1细胞分化
- 膜联蛋白A1在低氧诱发人肺动脉平滑肌细胞增殖中的作用被引量：1
- 2011年
- 目的评价膜联蛋白A1（ANXA1）在低氧诱发人肺动脉平滑肌细胞（PASMCs）增殖中的作用。方法采用随机数字表法，将培养的人PASMCs随机分为5组（n=60）：常氧组（N组）和低氧2、8、12和24h组（H1组-H5组）。N组用21％0：处理24h，H1组～H4组用3％02分别处理2、8、12、24h。各组处理结束时分别用RT-PCR和Westemblot检测人PASMCs ANXA1mRNA及其蛋白的表达水平，采用甲基噻唑基四唑法和氚．胸腺嘧啶核苷掺入法检测PASMCs的增殖情况。结果与N组比较，H1组～H4组人PASMCsANXA1mRNA及其蛋白表达下调，增殖增强（P〈0．05）；H1组-H4组人PASMCsANXA1mRNA及其蛋白表达逐渐下调，增殖逐渐增强（P〈0．05）。结论低氧诱发人PASMCs增殖时ANXA1表达下调，该变化可能是低氧诱导人PASMCs增殖的机制之一。
- 曾静易斌王芝国斌鲁开智王晓斌
- 关键词：膜联蛋白A1细胞低氧肌细胞平滑肌肺动脉细胞增殖
- 右美托咪定对丙泊酚在腹腔镜胆囊手术恢复期脑电双频指数和血流动力学及术后寒颤发生率的影响
- 目的 右美托咪定对丙泊酚在腹腔镜胆囊手术恢复期脑电双频指数和血流动力学及术后寒颤发生率的影响.方法 30例择期行腹腔镜胆囊切除手术患者,ASA分级Ⅱ到Ⅲ级,年龄45～65岁,体重50～75kg.
- 王芝陈桂珍黄艰文欣荣
- 关键词：BIS
- 肝肺综合症大鼠血清诱导肺微血管周细胞增殖
- ＜正＞目的:评价肝肺综合症（HPS）大鼠血清对肺微血管周细胞（PCs）增殖的影响。方法:动物模型分为2组:假手术组（sham）、胆总管结扎组（CBDL）,sham组大鼠只分离胆总管不结扎,CBDL组大鼠结扎胆总管上段,第...
- 陈兵易斌王芝杨勇陈杨祖宝利鲁开智
- 关键词：肝肺综合症周细胞血清细胞增殖
- 文献传递
- 铁含量对小胶质细胞释放促炎因子的影响
- 目的:探索小胶质细胞内（microglia,MI）铁含量,对MI释放促炎因子的影响。方法:使用3,5,5-三甲基乙酰铁（3,5,5-trimethylhexanoyl,TMHF）或去铁胺（deferoxamine,DFO...
- 李文瑶易斌杨智勇王芝李蕾陶国才
- 关键词：小胶质细胞铁炎症
- 文献传递
- 4E-BP1和p70s6kz在CBDL大鼠血清诱导的肺微血管内皮细胞中的表达变化
- 目的通过观察PI3K/AKT-mTOR信号通路下游靶点4E-BP1（真核细胞启动因子4E结合蛋白）和p70s6k（70-kDaS6激酶）在胆总管结扎（CBDL）大鼠血清刺激的肺微血管内皮细胞（pulmonary micr...
- 王芝易斌国斌鲁开智
- 关键词：肺微血管内皮细胞MTORP70S6K
- 文献传递
- 肺微血管内皮细胞的信号通路在肝肺综合征发病机制中的研究进展被引量：2
- 2011年
- 肝肺综合征(hepatopulmonary syndrome,HPS)是慢性肝病的严重并发症,以肺微血管扩张(pulmonary vaso dilata-tion,PVD)引起的低氧血症为典型病理改变,主要发生于各型肝硬化及各种慢性肝病。由于肺微血管主要构成细胞为肺微血管内皮细胞(pulmonary microvascular endothelial cells,PMVECs),因此针对HPS发病机制的研究常以PMVECs的异常改变及其相关信号通路为切入点,文中就此方面近年的研究报道进行综述。
- 王芝易斌鲁开智
- 关键词：肝肺综合征肺微血管内皮细胞信号通路
