王耕野 作品数:4 被引量:15 H指数:2 供职机构: 河北联合大学附属医院 更多>> 发文基金: 留学人员科技活动项目择优资助经费 教育部留学回国人员科研启动基金 博士科研启动基金 更多>> 相关领域: 医药卫生 更多>>
一氧化氮合酶在N-乙酰半胱氨酸调控大鼠心肌冷缺血-再灌注损伤中的变化 被引量:1 2015年 目的:观察一氧化氮合酶(NOS)在N-乙酰半胱氨酸(NAC)调控大鼠心肌冷缺血-再灌注损伤中的变化。方法:将健康雄性Lewis大鼠60只随机分为3组。(1)对照组:摘取供心前30 min,经供体大鼠下腔静脉注射生理盐水0.5 mL;(2)供体预处理组:摘取供心前30 min,经供体大鼠下腔静脉注射NAC300 mg/kg,受体大鼠不作预处理;(3)受体预处理组:移植前30 min,经受体大鼠下腔静脉注射NAC300 mg/kg,供体大鼠不作预处理。将冷藏于4℃HTK液18 h的供心移植至受体大鼠腹腔,建立同种异体心脏移植模型。于再灌注24 h后取供心采用免疫组化方法检测诱导型一氧化氮合酶/内皮型一氧化氮合酶(iNOS/eNOS)蛋白表达水平,以免疫组化评分(IHS)表示。采用Real time-PCR法检测iNOS/eNOS mRNA表达。结果:与对照组相比,供、受体预处理组的iNOS蛋白表达降低,IHS评分分别为3.00±0.15、1.50±0.22、1.63±0.26,P<0.05;而eNOS蛋白表达升高,IHS评分分别为2.00±0.21,3.60±0.16,3.40±0.26,P<0.05。与对照组相比,受体预处理组iNOS mRNA表达降低(0.43±0.17对1.00±0.41,P<0.05),供体预处理组eNOS mRNA表达升高(3.06±1.47对1.00±0.65,P<0.05)。结论:NOS参与了NAC预处理减轻移植大鼠心肌缺血-再灌注损伤的过程。 伊雪 崔翔宇 邬鹏宇 王帅 王耕野 杨学慧 郑素琴 李占清关键词:N-乙酰半胱氨酸 心脏移植 冷缺血再灌注损伤 一氧化氮合酶 褪黑素预处理受体对移植肾的保护作用及其机制探讨 2014年 目的 探讨褪黑素预处理受体对移植肾的保护作用及其可能的机制. 方法 40只Lewis大鼠应用随机数字表随机分为对照组和实验组,每组20只(供、受体各10只).实验组:50 mg/kg褪黑素+5 ml牛奶在移植前2h经胃管注入受体大鼠;对照组:5 ml牛奶在移植前2h经胃管注入受体大鼠.移植后0、6和24 h分别采血检测血尿素氮(BUN)和肌酐(Cr)及天冬氨酸转氨酶(AST)、丙氨酸转氨酶(ALT)、乳酸脱氢酶(lactate dehydrogenase,LDH);移植后24 h取移植肾检测肾组织中超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)及脂质过氧化物(lipid hydroperoxide,LPO);过碘酸-雪夫染色(PAS染色)观察组织学变化,免疫组化法检测肾移植物中核转录因子-κB (nuclear factor kappa B,NF-κB)和半胱氨酸蛋白酶-3(caspase-3)阳性肾小管数. 结果 实验组与对照组移植后6 h BUN分别为(36.26± 19.05)、(53.64± 16.57) mmol/L,移植后24 h血Cr分别为(144.09±76.91)、(259.01±132.60) μmol/L,组间比较差异均有统计学意义(P<0.05).移植后24 h,实验组血清AST、ALT、LDH均低于对照组,组间比较差异均有统计学意义(P<0.05).移植后24 h实验组和对照组移植肾组织中SOD分别为(8.91±4.38)、(2.21 ±0.45) U/mg,LPO分别为(9.5±5.8)、(60.8±23.7) pmol/mg,组间比较差异均有统计学意义(P<0.05).两组肾小管损伤指数分别为1.50±0.22、3.00±0.15,NF-κB阳性小管评分为2.00±0.21、3.60±0.16,caspase-3阳性小管评分为2.77±0.48、3.38±0.52,组间比较差异均有统计学意义(P<0.05). 结论 褪黑素预处理受体可能通过降低体内的氧化应激反应,提高抗氧化酶活性,增强清除自由基的能力,抑制脂质过氧化反应和凋亡的发生来减轻移植肾的缺血再灌注损伤,提高移植肾功能. 伊雪 邬鹏宇 杨学慧 王耕野 王耕银 崔翔宇 王帅 杨方 李占清关键词:肾移植 褪黑素 缺血再灌注损伤 莱菔硫烷抗凋亡对移植大鼠心脏的保护作用 被引量:10 2014年 目的莱菔硫烷(Sulforaphane,SFN)抗氧化作用减轻心肌的缺血再灌注损伤(ischemia/reperfusion injury,IRI)的研究已有报道,文中研究SFN抗细胞凋亡作用对移植心脏IRI的影响。方法健康雄性Lewis大鼠40只随机分成2组,每组20只。对照组受体大鼠于移植前24 h经鼠尾静脉注射等量的等渗盐水,实验组受体大鼠于移植前24 h经尾静脉注射SFN 2.5 mg/kg。实验组和对照组的供心均冷藏于4℃HTK液18 h,建立大鼠异体异位心脏移植模型。半定量方法分析评价移植心脏功能,免疫组织化学检测移植心脏心肌组织Caspase-3蛋白的表达,Tunel法检测心肌细胞凋亡,Kaplan-Meier分析移植心脏存活时间(BN→Lewis)。结果实验组移植心脏的中位生存期明显高于对照组(7 d vs 5 d,P<0.05),心脏功能评分实验组较对照组明显提高[(3.67±0.21)分vs(2.44±0.29)分,P<0.05],心肌组织Caspase-3蛋白的表达实验组较对照组明显降低[(1.38±0.14)分vs(2.03±0.21)分,P<0.05],心肌细胞凋亡指数较对照组明显降低(0.56±0.04 vs 0.78±0.01,P<0.05)。结论 SFN对移植心脏的保护作用可能与其抑制Caspase-3蛋白的表达、减少心肌细胞凋亡有关。 王帅 伊雪 邬鹏宇 崔翔宇 杨学慧 王耕野 郑素琴 杨方 李占清关键词:莱菔硫烷 缺血再灌注损伤 凋亡 心脏移植 N-乙酰半胱氨酸对大鼠心脏移植缺血再灌注损伤细胞凋亡的影响 被引量:6 2013年 目的观察N-乙酰半胱氨酸(N-acetylcysteine,NAC)对大鼠心脏移植后心肌缺血再灌注损伤导致的细胞凋亡的影响,并探讨其可能机制。 方法健康雄性Lewis大鼠60只,体重200~220 g,随机分为3组,每组20只,供、受体各10只。对照组:摘取供心前30 min经供体大鼠下腔静脉注射生理盐水1 mL;供体预处理组:摘取供心前30 min经供体大鼠下腔静脉注射NAC(300 mg/kg),受体不作处理;受体预处理组:于移植前30 min经受体大鼠下腔静脉注射NAC(300 mg/kg),供体不作处理。各组均建立同种异体异位心脏移植模型。术后观察受体大鼠存活情况;于移植后6、24 h取静脉血检测天冬氨酸转氨酶(aspartate aminotransferase,AST)、丙氨酸转氨酶(alanine aminotransferase,ALT)、乳酸脱氢酶(lactate dehydrogenase,LDH)含量;移植后24 h,取心肌组织检测超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)、脂质过氧化物(lipid hydroperoxide,LPO)活性,观察心肌组织学及超微结构,免疫组织化学染色检测活性半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3(active Caspase-3)蛋白表达,TUNEL法检测心肌细胞凋亡指数(apoptosis index,AI)。 结果各组心脏移植手术均成功,大鼠均存活至实验完成。移植后6 h,供、受体预处理组AST、ALT、LDH均显著低于对照组(P 〈 0.05),24 h时供体预处理组AST、ALT及受体预处理组AST、LDH低于对照组(P 〈 0.05);供、受体预处理组间各指标比较差异均无统计学意义(P 〉 0.05)。移植后6、24 h组内比较,除受体预处理组ALT差异无统计学意义外(P 〉 0.05)外,移植后24 h两组各指标均显著低于6 h(P 〈 0.05)。供、受体预处理组心肌组织中SOD含量及SOD/LPO均高于对照组(P 〈 0.05),供、受体预处理组比较差异无统计学意义(P 〉 0.05);各组LPO比较差异均无统计学意义(P 〉 0.05)。组织学及透射 伊雪 崔翔宇 邬鹏宇 王帅 王耕野 杨学慧 杨方 郑素琴 李占清关键词:心脏移植 N-乙酰半胱氨酸 缺血再灌注损伤 细胞凋亡