王秋华
- 作品数：2 被引量：1H指数：1
- 供职机构：华南农业大学兽医学院广东省兽药研制与安全评价重点实验室更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金广州市科技计划项目更多>>
- 相关领域：农业科学生物学更多>>
- 突变型猪表皮生长因子在毕赤酵母中的表达
- 猪表皮生长因子(porcine Epidermal Growth Factor，pEGF)是一种含有53个氨基酸的单链多肽类生长因子，与人、鼠等表皮生长因子类似，具有刺激细胞分裂、增殖与分化，促进离子交换和细胞外基质合成...
- 王秋华
- 关键词：猪表皮生长因子毕赤酵母硫酸铵沉淀
- 文献传递
- 突变型猪表皮生长因子在毕赤酵母中的表达被引量：1
- 2009年
- 使用α因子做为信号肽的酵母系统分泌表达猪表皮生长因子(pEGF)时,由于对信号肽末端Glu-Ala氨基酸残基切除不完全,表达产物是Glu-Ala-pEGF和pEGF的混合物。本研究为了获得单一表达的pEGF产物,对pEGF基因进行适当的突变修改,构建缺失Glu-Ala重复基因序列的重组载体。把重组载体pPIC9-pEGF1-48电转化毕赤酵母,用同位素标记随机引物斑点杂交法筛选多拷贝整合转化子,并诱导大量表达。用硫酸铵沉淀及超滤的方法浓缩和纯化蛋白,并用Bradford检测方法对蛋白浓度进行了初步测定。结果表明,构建的重组载体经过BglⅡ线性化后稳定转入毕赤酵母中,转化子表型主要为MutS型;筛选的多拷贝MutS型转化子经诱导后成功表达约6000的pEGF1-48蛋白,经检测蛋白表达水平约为34mg/L。
- 王秋华杨桂香汪洋于文刚蒋红霞
- 关键词：猪表皮生长因子毕赤酵母硫酸铵沉淀
