王淑玲
- 作品数：4 被引量：3H指数：1
- 供职机构：郑州大学公共卫生学院更多>>
- 发文基金：卫生部科学研究基金河南省医学科技攻关计划项目更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 志贺菌耐多药相关基因水平转移的验证及其耐药性研究被引量：1
- 2010年
- 目的对志贺菌耐多药相关基因(T1C4)水平转移进行验证,并对其与细菌耐药性的关系进行初步判定。方法培养已筛选出的包含T1C4基因片段的阳性克隆,提取其质粒,PCR扩增T1C4基因片段、纯化、制备探针,与志贺菌敏感株SS23、志贺菌耐多药转移株(ST11)、大肠埃希菌耐多药株(E667)的基因组DNA和质粒DNA进行斑点杂交。采用药敏纸片法研究含T1C4基因片段大肠埃希菌的耐药性。结果应用PCR方法可以从ST11和E667菌株基因组DNA中扩增出T1C4基因片段,而SS23菌株不含该基因片段;应用T1C4基因探针进行斑点杂交显示,ST11和E667菌株的全基因组和质粒DNA均可显示杂交信号,而SS23菌株的基因组和质粒DNA均不产生杂交信号;14种药物的药敏试验表明,含有T1C4基因的大肠埃希菌(DH5α)对四环素、先锋V、头孢噻吩、氟哌酸、复方新诺明等五种药物的抑菌环直径明显小于(相差3mm以上)不含T1C4基因的DH5α菌株。结论 T1C4基因片段为ST11菌株从E667菌株获得,且存在于两菌株的质粒上;T1C4基因可能介导细菌对多种药物的抗性。
- 王淑玲宋春花段广才张卫东郗园林朱静媛
- 关键词：志贺菌耐多药基因水平转移
- 幽门螺杆菌ahpC基因的克隆与原核表达被引量：1
- 2010年
- 目的构建幽门螺杆菌(Helicobacter pylori,Hp)ahpC基因的原核表达系统,表达并纯化Ahp蛋白。方法用PCR方法从中国分离株MEL-Hp27的染色体DNA中扩增出ahpC基因片段,将目的基因插入表达载体pET-30a中,构建重组质粒pET30a-ahpC。重组质粒经DNA测序鉴定后转化大肠杆菌E.coli BL21(DE3),IPTG诱导表达。采用镍离子亲和层析纯化蛋白,并用SDS-PAGE鉴定。结果PCR扩增的ahpC基因长度为594 bp,经酶切和测序分析,插入到载体的基因与GenBank公布的序列相似性达99%;SDS-PAGE显示,经IPTG诱导出分子质量为23 ku的目的蛋白,且产量较高。结论成功构建了ahpC表达载体pET30a-ahpC,并在大肠杆菌中高效表达。
- 李艳青段广才宋春花张建光王淑玲张卫东郗园林
- 关键词：幽门螺杆菌克隆基因表达
- 幽门螺杆菌超氧化物歧化酶基因克隆及表达
- 2010年
- 张建光段广才宋春花李艳青王淑玲张卫东郗园林
- 关键词：幽门螺杆菌超氧化物歧化酶基因克隆蛋白表达
- 志贺菌耐多药相关基因水平转移研究被引量：1
- 2009年
- 目的验证志贺菌耐多药相关基因水平转移及对该基因的位置进行初步判定。方法培养已筛选出的包含耐多药差异基因片段阳性克隆,提取其质粒,PCR扩增其耐多药差异基因片段、纯化、制备探针,与志贺菌敏感株Z23、耐多药大肠埃希菌E.667、转移株的基因组DNA、质粒进行斑点杂交。结果该耐多药差异基因片段制备的探针与耐多药大肠埃希菌、敏感株、转移株的基因组DNA、质粒进行杂交后,转移株、耐多药大肠埃希菌的全基因组及质粒均有杂交信号,与Z23的全基因组、质粒均没有杂交信号。结论此耐多药相关基因片段在液体结合实验中由耐多药大肠埃希菌水平转移给志贺菌敏感株,根据斑点杂交结果可判断其存在于耐多药大肠埃希菌和转移株的质粒中。
- 王淑玲宋春花段广才张卫东郗园林朱静媛
- 关键词：斑点杂交基因水平转移志贺菌耐多药
