王树云
- 作品数：14 被引量：70H指数：3
- 供职机构：北京出入境检验检疫局更多>>
- 发文基金：国家科技支撑计划湖北省“十一五”科技攻关项目“十一五”国家科技支撑计划更多>>
- 相关领域：农业科学生物学更多>>
- 斑点叉尾鮰病毒ORF6和ORF10基因的原核表达及其功能的初步研究
- 斑点叉尾鮰病毒(CCV)是最早被发现的鱼类疱疹病毒,由Fijan等从驯养的斑点叉尾鮰病鱼体内分离得到,斑点叉尾鮰是其自然宿主。CCV是一种被膜的双链DNA病毒,给国内外的斑点叉尾鮰养殖业造成极其严重的经济损失。序列分析显...
- 王树云
- 关键词：ORF6原核表达多克隆抗体
- 文献传递
- 斑点叉尾鮰疱疹病毒PCR-ELISA检测方法的建立被引量：3
- 2009年
- 针对斑点叉尾鮰疱疹病毒(CCV)的ORF6基因设计引物和探针,PCR产物在扩增过程中标记地高辛,探针5′端用生物素标记,建立了CCV的敏感、快速、环保的PCR-ELISA检测方法。对反应条件进行了优化,并评估了该方法的特异性和敏感性。结果表明:该方法可特异性检测CCV DNA,与各对照均无交叉反应,具有高度特异性;该方法对CCV DNA的检测阈值为5 fg,敏感性是常规PCR检测方法的10倍。用此方法对人工感染样品进行检测,能够检测到感染组织中的CCV DNA。该方法能够定性和半定量检测CCV DNA,可用于斑点叉尾鮰疱疹病毒的检测、斑点叉尾鮰暴发性流行病的诊断。
- 杜玉东陈孝煊吴志新王敏刘迁夏君王树云李莉娟
- 关键词：PCR-ELISA敏感性特异性
- 草鱼受精卵菌群的研究
- 本文通过扫描电镜和细菌培养的方法,对草鱼受精卵好氧及兼性厌氧菌的数量和组成进行了研究,对其所处水体的好氧及兼性厌氧菌也进行了分析。其结果表明:①草鱼受精卵菌群的数量随受精卵的发育呈递增趋势,刚受精时1.24×101cfu...
- 祝东梅吴志新冯雪王艳庞素风周金敏王树云陈孝煊
- 关键词：草鱼受精卵菌群
- 文献传递
- 鲤春病毒血症病毒糖蛋白基因在毕赤酵母中的分泌表达被引量：2
- 2015年
- 根据Gen Bank中鲤春病毒血症病毒(SVCV)糖蛋白全基因序列设计特异性引物,以SVCV欧洲株病毒核酸为模板,通过RT-PCR方法获得欧洲株SVCV-G基因,克隆至p PICZαA,构建p PICZαASVCV1540表达质粒。以限制性内切酶Sac I线性化p PICZαASVCV1540后通过化学法转化毕赤酵母感受态细胞X33和GS115,添加1%甲醇进行诱导表达,SDS-PAGE电泳分析表达产物显示其分子质量为70 ku。Western Blot分析显示该蛋白可以被SVCV山羊多抗识别,表明目的蛋白具有反应原性。
- 王树云李江宇高志强谷强蒲静任彤张伟张旻江育林武勇张利峰
- 关键词：鲤春病毒血症病毒糖蛋白毕赤酵母
- 魔芋甘露寡糖对黄颡鱼非特异性免疫功能及生长的影响被引量：31
- 2010年
- 以健康黄颡鱼为试验鱼,按投喂饲料的不同分为5组,3个平行。对照组投喂基础饲料,试验组KM0.1、KM0.2、KM0.3、M0.3在基础饲料中分别添加0.1%、0.2%、0.3%的魔芋甘露寡糖及0.3%的酵母甘露寡糖,研究日粮中添加不同含量甘露寡糖对黄颡鱼非特异性免疫功能及生长的影响。结果表明：投喂0.2%魔芋甘露寡糖14~28 d,血液白细胞吞噬活性显著高于对照组,14 d吞噬百分率PP、吞噬指数PI达到最大值,分别为66.00%、5.24。在整个试验过程中,KM0.3、M0.3组与对照组之间PP、PI均无显著性差异。KM0.2组与对照组相比能显著增强血清溶菌酶、超氧化物歧化酶活性,在第35天时溶菌酶活性达到最大值（0.31）,第7天时SOD活性达到最大值（136.67）。除第42天外,KM0.3、M0.3组与对照组SOD活性无显著性差异。投喂不同含量魔芋甘露寡糖均能增加黄颡鱼头肾指数、后肾指数、脾体指数,促进生长、降低饵料系数。KM0.2组质量增加率最高（95.68%）、饵料系数最低（1.63）。0.3%酵母甘露寡糖组与对照组相比也能显著促进黄颡鱼的生长,降低饵料系数,其中质量增加率为64.91%、饵料系数为1.84。
- 于艳梅吴志新陈孝煊赵杨张朋周金敏岳刚毅王树云曲艺
- 关键词：黄颡鱼甘露寡糖非特异性免疫功能
- 斑点叉尾鮰病毒囊膜蛋白基因ORF6和ORF10的原核表达及抗体制备
- 2010年
- 为获得斑点叉尾鮰疱疹病毒ORF6和ORF10基因,设计特异性引物进行PCR扩增,成功构建pET-32a-ORF6和pET-32a-ORF10原核表达载体,经IPTG诱导后目的蛋白在大肠杆菌中成功表达并制备多抗,通过Western blot证明ORF10的抗体具有特异性,且ORF10为病毒的结构蛋白。
- 王树云陈孝煊王敏周金敏于艳梅岳刚毅李莉娟
- 关键词：囊膜蛋白原核表达多克隆抗体
- 斑点叉尾鮰病毒(Channel Catfish Virus)膜蛋白基因的表达及抗体制备
- 王树云陈孝煊李莉娟
- 关键词：CCV开放阅读框膜蛋白多克隆抗体
- 蛙病毒三重荧光PCR检测方法的建立被引量：4
- 2015年
- 根据GenBank中收录的蛙病毒属虹彩病毒主要衣壳蛋白（MCP）基因序列设计了一对通用引物和3条Taqman探针，通过PCR反应体系的优化以及反应的特异性、灵敏性和干扰性试验，建立了一种可检测蛙病毒属大部分成员并能进行初步分类的三重荧光PCR方法。通过鉴定分析将蛙病毒属成员分为三类，其中第一类包括蛙病毒3型（FV3）、饰纹汀蛙虹彩病毒（BIV）、流行性造血器官坏死病毒（EHNV）、欧洲鲴鱼病毒（ECV）、欧鲶病毒（ESV）、中华鳖虹彩病毒（STIV）、大鲵虹彩病毒（ADIV）、沼泽绿牛蛙虹彩病毒（RGV）和虎纹蛙病毒（TFV），第二类是Santee．Cooper蛙病毒（SCRV），由大口黑鲈虹彩病毒（LMBV）、裂唇鱼病毒（DFV）和孔雀鱼病毒（GV6）组成，而新加坡石斑鱼虹彩病毒（SGIV）则单独作为第三类。进一步分析发现各病毒的最低检测量均达到10^2拷贝，表明该方法除了具有良好的特异性和稳定性之外还具有高度灵敏性。建立的该蛙病毒三重荧光PCR方法可为蛙病毒的快速诊断和分子流行病学调查提供一种有效的技术手段。
- 李江宇王树云王姝任彤高志强谷强张伟刘艳华王娜张旻景宏丽江育林张利峰
- 关键词：虹彩病毒TAQMAN探针
- 黄颡鱼肠道及养殖水体中菌群的分析被引量：25
- 2010年
- 对黄颡鱼肠道及所处水体菌群的数量和组成进行了分析。结果显示,黄颡鱼各肠段中好氧和兼性厌氧菌数量的对数值分别为5.27±0.74、6.26±0.36、7.56±0.61。厌氧菌数量远大于好氧和兼性厌氧菌,相差约2～3个数量级,双歧杆菌为厌氧菌的优势菌。养殖水体中细菌数量的对数值为4.80±0.73,表明水体中营养盐浓度不高。黄颡鱼肠道与养殖水体中的优势菌基本相同,均为气单胞菌属、肠杆菌科和不动杆菌属。此外,对患细菌性出血病的黄颡鱼肠道菌群的研究结果显示,患病鱼肠道细菌数量显著增加,气单胞菌相比健康黄颡鱼增加18.3%～33.6%,细菌种类明显减少。表明气单胞菌等重要条件致病菌需要在一定条件下、达到一定的优势度才能体现其致病性。
- 周金敏吴志新曾令兵王树云毕鹏陈孝煊
- 关键词：黄颡鱼肠道水体菌群
- 金鱼心脏细胞系及其应用
- 本发明公开了一种金鱼心脏细胞系及其应用。该金鱼心脏细胞系已于2014年7月3日保存在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心(CGMCC)，其保藏登记编号为CGMCC No.9334。本发明所述的金鱼心脏细胞系特性稳定...
- 景宏丽张旻王娜高隆英张利峰林祥梅吴绍强王树云江育林
- 文献传递
