王忆琴
- 作品数：7 被引量：81H指数：4
- 供职机构：中国科学院微生物研究所更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：生物学更多>>
- 大肠杆菌海藻糖合成酶基因对提高烟草抗逆性能的研究被引量：45
- 2001年
- 编码大肠杆菌海藻糖合成酶的otsA基因由农杆菌介导引入野生型烟草植株并在花椰菜花叶病毒启动子序列 (CaMV35S)控制下获得表达。蒸发光散射高效液相层析法测定海藻糖实验表明 ,转基因烟草能够合成海藻糖 ,合成量达 1 4μg g叶片湿重 ;转基因烟草表现为耐盐性生长、干燥失重缓慢等抗逆表型。说明海藻糖合成酶otsA基因的引入 ,改变了烟草的糖代谢途径 ,同时也提高了植物的耐盐碱、耐干旱特性。
- 戴秀玉王忆琴杨波周坚
- 关键词：海藻糖转基因烟草抗逆性能
- otsA基因在大肠杆菌和转基因烟草中的表达研究
- 该实验不仅证明海藻糖合成中的磷酸酯酶完全可由生物体自身的磷酸酯酶类来代替,同时也证明海藻糖的积累可以提高生物体的耐干性和耐盐性.这些数据表明单独otsA基因的转化可以赋予生物体合成海藻糖的能力,海藻糖稳定蛋白质和生物膜的...
- 王忆琴
- 关键词：海藻糖大肠杆菌转基因烟草
- 文献传递
- 毕赤氏酵母醇氧化酶-2基因启动子突变体的分离和鉴定被引量：13
- 2000年
- 巴斯德毕赤氏酵母表达系统已被广泛用于生产外源蛋白的奇主菌。利用该系统将外源基因整合交换到染色体上时，AOX1基因被破坏，使表达菌的甲醇利用缓慢，给发酵生产造成一定影响。在不改变现有表达系统前提下，从AOX1功能缺陷菌株分离出Mut+自发突变体。通过突变体在甲醇培养基中生长曲线的测定，HSA表达产物的聚丙烯酰胺凝胶电泳检测，证明突变体的甲醇利用能力和蛋白表达比原始菌株大大提高；突变体AOX2基因上游区域经PCR扩增进行全序列测定，结果表明在PAOX2阻遏蛋白结合区域－255和－529两个碱基发生改变，该突变改善了AOX1基因缺陷功能，有利于外源基因的高表达。
- 戴秀玉王韫恂周坚王忆琴
- 关键词：毕赤氏酵母外源蛋白
- 大肠杆菌otsA基因的克隆和表达被引量：17
- 2000年
- 用PCR方法扩增了 1 5kb的otsA基因片段 ,将该片段连接到多拷贝克隆载体后转化otsBA缺失和otsA缺陷的大肠杆菌菌株 ,使转化株重新获得otsA基因功能。生长曲线表明转化株在高渗培养基中生长良好 ,薄层层析法 (TLC)检测海藻糖实验说明转化株细胞经诱导后合成海藻糖 ,otsA基因的克隆和表达为赋予转基因植物抗高渗、耐干旱能力提供了实验依据和材料。
- 王忆琴戴秀玉王韫恂周坚
- 关键词：海藻糖PCR扩增大肠杆菌
- 毕赤氏酵母P<,aox2>突变体的分离和鉴定
- 近年来巴斯德毕赤氏酵母(Pichia pastoris)已被广泛用于商业化生产外源蛋白的基因工程菌。与常用的酿酒酵母表达系统相比,该系统具有以下优点:1.有强有力的、受甲醇严格诱导调控的启动子;2.表达蛋白高分泌;3.表...
- 戴秀玉王韫恂周坚王忆琴李绍极
- 关键词：突变体基因工程菌酿酒酵母
- 毕赤氏酵母AOX2基因启动子突变体的分离和鉴定
- 1999年
- 戴秀玉王韫恂周坚王忆琴
- 关键词：毕赤氏酵母突变体外源蛋白基因表达蛋白表达
- 大肠杆菌海藻糖的代谢调控被引量：12
- 2000年
- 海藻糖是一种重要的抗逆物质。大肠杆菌中otsBA操纵子编码的两种酶负责海藻糖合成。otsBA基因的表达受渗透压诱导和σs 因子的调节。细胞的周质海藻糖酶 (treA)将外源海藻糖分解成两个葡萄糖分子。尽管大肠杆菌中渗透压诱导合成的海藻糖并不能保护细胞抗干燥 ,我们将otsA单个基因通过农杆菌转入烟草时 ,转基因株提高了耐盐和抗干燥特性 ,同时在转基因烟草提取物中检测到海藻糖 ,证明otsA基因在烟草中表达并合成海藻糖。我们认为若将otsA基因转入其它植物 ,可望改善这些植物的抗干旱。
- 戴秀玉王忆琴周坚杨波王连琴
- 关键词：大肠杆菌抗逆转基因植物
