- 转醛糖还原酶相似基因细胞株对含醛基药物的耐药研究
- 目的:建立高表达醛糖还原酶相似(ARL-1)基因的细胞株,研究醛糖还原酶相似蛋白(ARL-1)在肝癌细胞中的功能及ARL-1基因高表达与肝癌耐药之间的关系,获得ARL-1转染后转基因组细胞和对照组细胞间的基因表达差异谱....
- 王建
- 关键词：细胞转染耐药机制基因表达差异
- 文献传递
- 转ARL-1基因HepG2细胞耐药相关基因的筛选被引量：7
- 2003年
- 背景与目的:醛糖还原酶相似基因1(aldose-reductaselikegene-1,ARL-1)在原发性肝癌中高表达,与肝癌细胞对化疗药物耐药有关。本研究拟建立转染ARL-1的人肝癌细胞株,观察转染ARL-1的HepG2细胞对含醛基抗肿瘤药物耐药性的改变,利用基因表达谱芯片筛选HepG2细胞转染ARL-1后差异表达耐药相关基因。方法:采用脂质体转染PBK/ARL-1质粒到HepG2细胞,获得高表达ARL-1的单克隆细胞株;RT-PCR、流式免疫荧光和免疫组化鉴定高表达ARL-1的HepG2细胞;应用MTT法和细胞凋亡分析研究HepG2细胞和转染ARL-1的HepG2细胞对含醛基抗肿瘤药物阿霉素(ADM)和丝裂霉素(MMC)的耐药性,以5-氟尿嘧啶(5-FU)(不含醛基)为对照;将Cy3和Cy5两种荧光染料分别标记两种细胞的cDNA探针,与人肝癌基因表达谱芯片进行杂交与扫描,观察转染ARL-1基因HepG2与对照组HepG2细胞在基因表达谱方面的差异,筛选耐药相关基因,并运用RT-PCR和Westernblot对部分差异表达相关基因进行初步证实。结果:与对照组HepG2细胞相比,转染ARL-1基因HepG2细胞高表达ARL-1蛋白,明显增强对含醛基的抗肿瘤药物如ADM、MMC的耐药性,分别提高2.6倍和3.47倍,用5-FU处理两组细胞,则未发现有明显的耐药差异(ADM组t=6.39,P<0.05;MMC组t=30.06,P<0.01;5-FU组t=0.684,P>0.05);芯片扫描结?
- 杨向东唐大年王建曹德良
- 关键词：HEPG2相关基因耐药性癌细胞
- 清道夫受体AI转基因小鼠对动脉粥样硬化具有易感性被引量：14
- 2002年
- 通过本室已建立的人清道夫受体AI转基因小鼠对动脉粥样硬化的易感性的研究 ,以阐明人清道夫受体在动脉粥样硬化中的作用。为此 ,用人清道夫受体转基因小鼠 (F3)的纯合子 (TghSR AI+ +)、杂合子 (TghSR AI+ )、聚合酶链反应阴性 (TghSR AI )和C57BL 6小鼠各 1 2只 ,喂高脂高胆固醇饲料 1 4周后 ,取动物心脏和主动脉 ,作连续石蜡切片或冰冻切片 ,HE染色或油红O染色 ,用图象分析系统测量和计算主动脉动脉粥样硬化病变面积。结果发现 ,喂高脂高胆固醇饲料 1 4周后 ,小鼠动脉粥样硬化病变主要位于主动脉窦至主动脉弓的区域内 ,但纯合子鼠的动脉粥样硬化病变除在整个主动脉根部外 ,病变已扩展到胸主动脉、冠状动脉和肾动脉。C57BL 6鼠和阴性小鼠的主动脉窦区瓣膜附着处仅有轻微损伤。计算机图象分析发现 ,纯合子鼠主动脉粥样硬化病变的平均面积为 1 4 4 864± 1 71 0 3μm2 ,与杂合子组 (1 1 1 32 2± 1 0 71 3μm2 )相比 ,差异有显著性统计学意义 (P <0 .0 5) ;与聚合酶链反应阴性 ( )小鼠或C57BL 6小鼠相比 ,差异有非常显著性统计学意义 (P <0 .0 1 )。提示纯合子鼠动脉粥样硬化病变最严重 ,其次是杂合子鼠 ,而非转基因小鼠主动脉动脉粥样硬化病变较轻。转基因小鼠肝、肾也可见明显的病变。
- 万腊香陈修Sookja Kim Chung吴孟津万载阳危当恒王建杨永宗
- 关键词：清道夫受体转基因动脉粥样硬化
- 醛糖还原酶相似基因转染细胞对含碳酰基抗癌药物耐药的研究被引量：1
- 2002年
- 目的 研究醛糖还原酶相似蛋白(aldose reductase like prptein,ARL-1)在肝癌细胞中的功能及ARL-1基因高表达与肝癌耐药之间的关系。方法 通过阳离子脂质体转染法将ARL-1基因导入HepG2细胞,建立稳定表达该基因的细胞株,采用MTT法检测细胞对含醛基药物的耐药变化情况。结果 转染细胞与未转染细胞相比,对含醛基的抗肿瘤药物如阿霉素、丝裂霉素的耐药性明显增强,其半数抑制浓度(IC50)分别提高到2.6倍和3.1倍,ADM组t=6.39,P<0.05,MMC组t=30.06,P<0.01。用不含醛基的5-氟尿嘧啶处理两组细胞,则未发现有明显的耐药差异(t=0.684,P>0.05)。结论 ARL-1的表达上调可能是肿瘤细胞对含醛基抗肿瘤药物耐药的主要原因之一。
- 王建万腊香吴孟津万载阳危当恒杨永宗
- 关键词：碳酰基耐药细胞转染
- 高表达醛糖还原酶相似基因细胞株的建立和鉴定
- 2002年
- 目的 建立高表达醛糖还原酶相似基因的细胞株。方法 通过阳离子脂质体转染法将醛糖还原酶相似基因导入HepG2细胞，建立稳定表达该基因的细胞株，采用PCR，RT-PCR等方法鉴定醛糖还原酶相似基因在HepG2中的表达情况。结果 成功建立了高表达醛糖还原酶相似的转染细胞株。
- 王建万腊香等
- 关键词：细胞转染肝癌PCRRT-PCR方法
