公共文化服务平台

重组杆状病毒载体介导大鼠螺旋神经节细胞基因转染的研究: 2007年; 目的探讨重组杆状病毒(baculovirus,Bac)作为内耳螺旋神经节细胞基因转染载体的可行性及其转染特点。方法应用 Bac-to-Bac 杆状病毒表达系统制备携带绿色荧光蛋白(greenfluorescent protein,GFP)的杆状病毒载体(Bac-GFP),以不同感染复数(multiplicities of infection,MOI)的病毒和不同浓度的丁酸钠转染大鼠螺旋神经节细胞,通过激光共聚焦显微镜和流式细胞仪检测细胞转染率和绿色荧光蛋白表达强度,并观察杆状病毒和丁酸钠对螺旋神经节细胞的毒性。结果杆状病毒可以高效转染螺旋神经节细胞,转染效率达77.69%。Bac-GFP 转染率和表达强度随着 MOI和丁酸钠浓度的提高而提高。GFP 在转染后6 h 开始表达,第2天达到最高。重组杆状病毒 MOI 小于800以及丁酸钠终浓度小于或等于10 mmol/L 时,对螺旋神经节细胞没有明显细胞毒性。结论重组杆状病毒可以在体外高效安全转染内耳螺旋神经节细胞。; 王俊王士礼蔡昌枰李彪张一帆胡胜平田相龙张敏; 关键词：螺旋神经节转染

重组杆状病毒载体介导螺旋神经节细胞基因转染的实验研究: 目的探讨重组杆状病毒作为内耳螺旋神经节细胞基因转染载体的可行性及其转染特点。方法应用 Bac-to-Bac 杆状病毒表达系统制备重组杆状病毒 Bac—GFP,以不同 MOI 的病毒和不同浓度的丁酸钠转染螺旋神经节细胞,通...; 王俊蔡昌枰王士礼; 关键词：杆状病毒丁酸钠螺旋神经节细胞; 文献传递

一种用于耳内镜手术的可调节角度切吸多功能吸引器: 本发明涉及医疗辅助器械领域。一种用于耳内镜手术的可调节角度切吸多功能吸引器，包括一吸引管，吸引管包括沿着轴向依次设置的第一圆管部、弯折部以及第二圆管部，弯折部包括周向排布且呈波纹状的连接金属条，连接金属条的两端分别与第一...; 王俊向明亮王昊王士礼

钠碘转运体应用于人下咽鳞癌显像和诊断的可行性研究被引量：1: 2013年; 目的:探讨杆状病毒介导的人钠碘转运体(human sodium/iodine symporter,hNIS)应用于人下咽鳞癌显像和诊断的可行性。方法:通过Bac-to-Bac杆状病毒表达系统包装分别含GFP和hNIS的重组杆状病毒(Bac-GFP和Bac-hNIS),用流式细胞仪检测Bac-GFP对人下咽癌细胞(FaDu)的转导效率,并用间接免疫荧光检测hNIS在FaDu细胞中的定位。进行hNIS介导的碘摄取、动态摄碘和NaClO4碘摄取抑制实验,并检测共转染了Bac-GFP和Bac-hNIS的FaDu细胞中的荧光强度和放射性计数。结果:在丁酸钠的作用下,Bac-GFP在感染复数为400时,对FaDu细胞的转导效率可达95.16%;hNIS可准确定位于FaDu细胞膜上,具备摄碘功能;放射性计数与荧光强度间呈线性正相关(相关系数为0.943),可通过放射性计数的变化来反映荧光强度的变化。结论:杆状病毒对FaDu细胞具有高转导效率,Bac-hNIS可有效介导FaDu细胞的碘摄取,hNIS可用于人下咽鳞癌的显像和诊断。; 王建章刘帅王俊张美丽王安琪张一帆李彪蔡昌枰王士礼; 关键词：钠碘转运体杆状病毒显像

杆状病毒介导内耳基因治疗的实验研究被引量：3: 2007年; 目的探讨重组杆状病毒作为内耳基因治疗载体的可行性及其转染特点。方法应用Bac-to-Bac杆状病毒表达系统制备重组杆状病毒Bac-GFP,建立新生大鼠耳蜗Corti器体外模型,加入携带报告基因的病毒悬液,观察外源基因表达情况,并将其通过圆窗直接显微注射进入豚鼠内耳,观察杆状病毒在体内的转染特点。结果Bac-GFP联合丁酸钠可以高效转染毛细胞和螺旋神经节细胞,但并没有改变Corti器的正常结构。体内试验显示杆状病毒可以忠实和长效转染螺旋神经节细胞,而未被补体系统灭活。结论实验证实杆状病毒有希望成为内耳基因治疗的新型载体。; 王俊王士礼蔡昌枰李彪张一帆; 关键词：杆状病毒丁酸钠螺旋神经节细胞 CORTI器

重组杆状病毒载体介导新生大鼠耳蜗Corti器体外模型基因转染研究: 2007年; 目的建立新生大鼠耳蜗Corti器体外培养模型,探讨重组杆状病毒作为内耳基因转染载体的可行性及其转染特点。方法应用Bac-to-Bac杆状病毒表达系统制备重组杆状病毒Bac-GFP,建立新生大鼠耳蜗Corti器体外模型,加入携带报告基因的病毒悬液,观察外源基因表达情况。结果耳蜗Corti器体外培养48小时后,培养组织生长良好。Bac-GFP联合丁酸钠可以高效转染毛细胞和螺旋神经节细胞,同时并没有改变Corti器的正常结构。结论新生大鼠离体内耳组织转基因培养法是内耳基因治疗实验研究的一种可行方法。杆状病毒可以在体外高效、安全、快速的转染毛细胞和螺旋神经节细胞,有希望成为内耳基因治疗的新型载体。; 王俊李彪蔡昌枰张一帆王士礼胡胜平田相龙张敏; 关键词：杆状病毒丁酸钠 CORTI器

颈部巨大鳃裂囊肿1例: 2015年; 资料患者女性,27岁。因＂发现左侧颈部肿块1年余＂于2013年11月19日入院治疗。患者1年前无明显诱因发现左侧颈部肿块,于外科就诊。B超示：左侧颌下皮下软组织内实质性团块,约4.4 cm×1.5 cm,建议继续随访。近1年肿块进行性增大,本科诊断＂鳃裂囊肿＂收治入院,行手术治疗。术前检查：左颈部包块质硬、固定,边界清楚,无明显压痛,大小约11 cm×7 cm（图1A）。; 王俊王士礼蔡昌枰; 关键词：鳃裂囊肿皮下软组织腮裂囊肿超声图后方回声增强

NIS基因作为报告基因的可行性研究: 目的:探讨 NIS(钠碘同向转运体)基因作为报告基因检测目的基因表达的可行性。方法:分别构建含 NIS 基因和 GFP(绿色荧光蛋白)基因的杆状病毒载体质粒(pFB-NIS 和 pFB-GFP),并进行重组 NIS 和 ...; 张一帆王俊周翔李彪朱承谟; 文献传递

GDNF和EGFP双基因共表达重组杆状病毒载体的构建及鉴定: 2009年; 目的构建携带增强型绿色荧光蛋白(EGFP)和胶质细胞源性神经营养因子(GDNF)的重组杆状病毒载体。方法将目的基因(EGFP和GDNF)克隆入杆状病毒表达载体pFastBacDual中,构建重组质粒pFB-EGFP-GDNF并予酶切鉴定;将pFB-EGFP-GDNF转化到含杆状病毒穿梭载体Bacmid的DH10Bac感受态菌中,获得重组杆状病毒载体Bacmid-EGFP-GDNF,抽提质粒并行PCR鉴定;脂质体转染法将Bacmid-EGFP-GDNF转染Sf9细胞包装病毒;免疫荧光法检测Sf9细胞EGFP和GDNF蛋白表达。结果目的基因片段正确插入pFastBacDual载体中;重组Bacmid正确;Bacmid-EGFP-GDNF包装转染成功,获得较高病毒滴度;免疫荧光检测表明,Sf9细胞中GDNF和EGFP蛋白共表达。结论成功构建重组杆状病毒Bacmid-EGFP-GDNF,转染Sf9细胞共表达GDNF和EGFP蛋白,为进一步研究GDNF蛋白对内耳的保护作用奠定了实验基础。; 陈艳春王俊王士礼蔡昌枰李彪张一帆郭睿; 关键词：胶质细胞源性神经营养因子增强型绿色荧光蛋白杆状病毒

渝B2-20050021-1　渝公网安备 50019002500403号　违法和不良信息举报中心　互联网出版许可证　新出网证(渝)字10号

王俊