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王乐
作品数:
3
被引量:1
H指数:1
供职机构:
南京医科大学
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发文基金:
国家自然科学基金
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相关领域:
医药卫生
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合作作者
顾洛
南京医科大学
胡圳圳
南京医科大学基础医学院生理学系
杨郁
南京医科大学基础医学院生理学系
朱一超
南京医科大学
杜军
南京医科大学基础医学院生理学系
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顾洛
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南京医科大学...
年份
2篇
2010
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3
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稳定表达GFP-V12Rac1的NIH3T3细胞系的建立
2010年
目的:构建稳定表达GFP-V12Rac1(组成型活化Rac1的GFP融合蛋白)的NIH3T3细胞系。方法:构建表达GFP-V12Rac1和GFP的质粒和慢病毒载体,通过慢病毒感染和流式分选获取稳定表达目的基因的NIH3T3细胞系。通过铺展实验检测GFP-V12Rac1的功能,通过Boyden chamber迁移实验检测细胞的运动能力。结果:建立了稳定表达GFP-V12Rac1的NIH3T3细胞系及对照细胞系;稳定表达的GFP-V12Rac1可促进NIH3T3细胞的铺展,同时,构建的细胞系具备趋化运动能力。结论:用慢病毒载体可构建稳定表达GFP-V12Rac1的NIH3T3细胞系,外源基因表达产物功能正常且细胞系具备趋化能力。该细胞系可作为研究Rac1活性定位机制的可靠细胞模型。
王乐
朱一超
杜军
杨郁
胡圳圳
顾洛
关键词:
慢病毒载体
NIH3T3细胞
细胞迁移
稳定表达GFP-V12Rac1的NIH3T3细胞系的构建
Rac1的活性在运动细胞中往往呈现前端富集,这一定位模式对于细胞运动的实现有着重要作用,但此定位的机制尚未完全阐明,要对此定位的机制展开深入研究,首先需要建立稳定表达GFP-V12Rac1的NIH3T3细胞系。本研究在构...
王乐
关键词:
慢病毒载体
NIH3T3细胞
细胞迁移
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