熊喜峰
- 作品数：15 被引量：37H指数：5
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- EIF5A2基因在不同发育时期人胎盘绒毛膜中的定位表达及意义
- 2014年
- 目的探讨EIF5A2(eukaryotic transla-tion initiation factor 5A2)癌基因在人胎盘绒毛膜中表达及其定位。方法收集孕早期(8±周)绒毛膜、孕中期(20±周)及足月(38±周)胎盘组织,应用RT-PCR和Western blot及免疫组织化学等方法,从分子水平及蛋白水平检测EIF5A2在不同时段胎盘组织中的表达及定位。结果 RT-PCR及Western blot检测结果显示各期胎盘组织中均有EIF5A2 mRNA及蛋白表达,孕中期达峰值,足月胎盘EIF5A2表达显著下降(P<0.05);免疫组化结果显示孕早期绒毛膜中EIF5A2定位表达于合体滋养层及细胞滋养层细胞胞质,孕中期胎盘组织中EIF5A2主要表达于细胞滋养层,合体滋养层表达较弱,分娩期胎盘部分合体滋养层细胞内可见微弱的EIF5A2表达。结论 EIF5A2在不同时段人绒毛膜、胎盘组织中均有表达,定位于胎盘绒毛膜合体滋养层及细胞滋养层细胞胞质,其表达丰度及优势表达细胞类别在不同孕期存在差异。
- 杜宝玲潘继红邹文霞徐丽萍熊喜峰马宁芳
- 关键词：绒毛膜细胞滋养层胎盘
- 穗花杉双黄酮抑制人脐静脉内皮细胞血管形成的实验研究被引量：5
- 2016年
- 为探讨穗花杉双黄酮(Amentoflame,AF)对人脐静脉内皮细胞ECV304血管形成及机制的影响,从而为穗花杉双黄酮治疗肿瘤及其他血管增生性疾病提供理论基础,采用MTS检测AF对ECV304血管内皮细胞增殖的作用,细胞划痕实验观察AF对ECV304细胞迁移的影响,体外血管形成实验观察AF对ECV304血管形成的影响,Western blot检测AF对ECV304细胞血管形成相关信号通路及蛋白如磷酸化AKT(p-AKT)、金属基质蛋白酶9(Matrix metalloproteinase-9,MMP-9)、促血管生成素2(angiopoietin 2,Ang 2)表达影响。结果表明AF能够抑制ECV304细胞的增殖作用,并呈梯度依赖性;AF具有抑制ECV304细胞迁移的作用,并且能够抑制ECV304体外血管样结构的形成;Western blot结果显示100μmol/L的AF能够降低ECV304细胞p-AKT、MMP-9、Ang-2的蛋白表达。
- 张金丽曹文娟熊喜峰戴丽冰刘志河
- 关键词：血管生成内皮细胞穗花杉双黄酮
- 表皮干细胞仿生膜对毛囊细胞修复创面的影响被引量：1
- 2015年
- 目的 选择新生1d大鼠表皮干细胞（ESCs）接种在胶原修饰几丁质膜（C-CBM）,构建具有生物活性的覆盖物,评估其修复效果及应用前景.方法 将16只裸鼠随机分4组（n=4）：Ⅰ型胶原组（A组）、几丁质膜组（B组）、几丁质膜＋ ESCs组（C组）和Ⅰ型胶原修饰几丁质膜＋ESCs组（D组）,制备裸鼠背部全层皮肤缺损模型,术后定期取材,组织包埋切片,苏木素-伊红（HE）染色,免疫组织化学检测CD34和CD200表达,观察创面早期滤泡性毛囊增生情况.结果 6周创面愈合皮肤以D组修复较好,肉眼观察创面较厚、红润,有皮纹;A组和B组的修复则较薄、呈淡紫色,易出血;C组愈合较慢;并发现表皮巢形成有规律地增多,D组＞C组＞B组＞A组;D组CD34和CD200在手术后3d开始有毛囊干细胞增生,CD34表达延续到第4周,CD200表达延续到第6周,而C组CD34出现在第4周后,CD200出现在7d,D组是C组的2倍,A组和B组新生毛囊干细胞较少.结论 ESCs在C-CBM上生长良好,细胞可利用胶原的天然材料的黏附性,充分扩展,并参与创面修复,这些结果显示仿生膜有可能成为诱导性生物材料.
- 粱蓉沈雁戴丽冰李孝建刘志河熊喜峰
- 关键词：表皮干细胞几丁质仿生膜
- 慢病毒介导的RNA干扰HMGA2基因表达对HL-60细胞增殖及细胞周期素B2、A2表达的影响被引量：6
- 2012年
- 目的探讨慢病毒介导的RNA干扰沉默高迁移率族蛋白A2（HMGA2）基因表达对人急性白血病细胞系HL-60细胞增殖及细胞周期素（cyclin）B2、cyclinA2表达的影响。方法制备表达HMGA2基因短发夹RNA（shRNA）的重组慢病毒载体，转染HL-60细胞。通过半定量RT—PCR和West—elTlblot检测特异性shRNA转染后HL-60细胞HMGA2基因表达；CCK-8法检测细胞增殖抑制率；软琼脂克隆形成实验检测细胞增殖能力；流式细胞术（FCM）检测细胞周期；RT—PCR及Westernblot检测cyclinB2、cyclinA2mRNA和蛋白表达水平。结果RT—PCR和测序证实，成功构建了表达HMGA2shRNA的重组慢病毒载体；RT—PCR和Westernblot证实经嘌呤霉素筛选出的阳性克隆转染的HL-60细胞HMGA2mRNA和蛋白表达水平与空载体组相比明显受抑，抑制率分别达（80．66±7．98）％和（76．35±12．72）％；CCK-8比色结果显示，HMGA2表达受到稳定干扰的HL-60细胞增殖活力明显受到抑制，细胞增殖曲线低平，缺乏指数增殖特征。FCM检测显示，与对照组相比，转染特异性shRNA的HL-60细胞出现了明显的G2／M期阻滞，G2／M期细胞分别为（13．90±4．07）％和（30．00±5．78）％（P〈0．05）。HMGA2特异性shRNA转染的HL-60细胞cyclinB2mRNA和蛋白表达与未转染细胞相比，抑制率分别为（67．55±7．69）％和（51．77±4．81）％（P〈0．01）。而cyclinA2的表达无明显改变。结论HMGA2基因沉默可下调cyclinB2表达，从而使细胞出现明显的增殖抑制和G2／M期阻滞。
- 刘文丹谭丽熊喜峰梁叶萍谭获
- 关键词：RNA干扰细胞增殖
- ALC1在制备白血病耐药逆转剂及作为耐药性白血病诊断试剂方面的应用
- 本发明涉及白血病耐药性领域，公开了ALC1抑制剂在制备白血病耐药性逆转剂方面的应用，以及ALC1基因在制备耐药性白血病诊断试剂盒方面的应用。基于测定患者外周血或骨髓样本ALC1基因表达，基因的高表达与细胞对化疗药耐受性增...
- 马宁芳关新元黄振倩熊喜峰
- 文献传递
- E-selectin表达与小鼠胎肝发育及造血功能的关系
- 徐丽萍方芳熊喜峰马宁芳
- 应用声触诊量化技术诊断小鼠肝纤维化
- 2014年
- 目的:声触诊量化技术(virtual touch tissues quantifleation,VTQ)在小鼠肝纤维化诊断中的实验研究.方法:40只小鼠随机分成对照组、CCl4 1 wk组、CCl4 4 wk组和CCl4 8 wk组.于造模时间点测定VTQ测量值(Vs值);检测门冬氨酸氨基转移酶(aspartate aminotransferase,AST)、丙氨酸氨基转移酶(alanine aminotransferase,ALT)、Ⅳ型胶原(Ⅳcollagen,Ⅳ-C)、透明质酸(hyaluronic acid,HA)和层黏连蛋白(laminin,LN)的变化;制作肝组织石蜡切片,观察病理学变化.结果:HE染色显示对照组肝小叶结构正常;1wk时可见肝细胞少量坏死,炎症细胞少量浸润;4 wk时肝细胞气球样变明显,可见不同程度碎屑坏死;8 wk时正常肝小叶结构消失,大量炎症细胞浸润.Masson染色显示对照组仅在中央静脉壁上少量绿色胶原纤维;1 wk时中央静脉及汇管区可见绿色胶原纤维;4 wk时胶原纤维间隔较明显;8 wk时大量增生的胶原纤维包绕、分割成大小不等的假小叶.血清学AST、AST、Ⅳ-C、LN及HA检测比较:1 wk组与对照组无差别(P>0.05),4 wk组、8wk组与对照组差别具有显著性意义(P<0.01,P<0.001).VTQ测量值(VTQ value,Vs)显示1wk组与对照组无差别(P>0.05);4、8 wk组与对照组差别具有显著性意义(P<0.001).结论:与组织病理学及血清学检测一样,声触诊量化技术也可作为一种新手段在诊断肝纤维化动态变化中提供一定的参考价值.
- 熊喜峰刘志河刘志河刘文丹马宁芳
- 关键词：肝纤维化四氯化碳小鼠
- 小鼠肝纤维化病理微环境诱导的β-catenin激活及其细胞定位与分化
- 背景与目的： 研究证明各种原因所致的细胞死亡将引发组织细胞的再生与修复，此过程有赖于细胞与其微环境间的信息交流。当病理性的组织损伤与细胞丢失反复发生，组织持续性再生修复的结果则可能产生异常的组织结构如肝硬化、腺上皮增生...
- 熊喜峰
- 关键词：肝纤维化Α-平滑肌肌动蛋白细胞定位
- 文献传递
- β-catenin在四氯化碳诱导的小鼠肝纤维化过程中的定位、表达及意义被引量：1
- 2012年
- 目的探讨肝纤维化发生过程中β-连环蛋白(β-catenin)定位、表达及意义。方法健康雄性昆明小鼠(n=45)随机分为对照组(n=15)与实验组(n=30)。实验组小鼠皮下注射50%四氯化碳(CCl4)-粟米油混合液(6ml/kg),2次∕周,对照组皮下注射同等剂量的粟米油。各组分别于造模1周、4周和8周后取小鼠肝脏,常规制作石蜡切片,Masson染色及Desmin免疫组织化学法观察比较不同组别小鼠肝纤维化病理变化,RT-PCR及免疫组织化学方法检测不同时间点各组小鼠肝组织内β-catenin的表达及定位。结果 Masson染色结果显示,对照组肝汇管区结缔组织内及血管壁有少量细小纤维,实验组小鼠肝脏汇管区和中央静脉及其周围胶原纤维增多;随损伤时间延长纤维增生愈加明显。Desmin免疫组织化学结果显示,各组别均有阳性表达,但损伤组各时间点desmin阳性表达细胞数明显高于对照组(P<0.05或P<0.001)。RT-PCR结果显示,CCl4损伤1周后肝内β-cateninmRNA水平与对照组相比无明显差别(P>0.05),损伤4周及8周β-catenin mRNA水平则明显下降,与对照组相比差异均有显著性(P<0.01)。免疫组织化学结果显示,对照组β-catenin弱表达于肝细胞膜及胆管上皮细胞膜和胞质,而损伤组β-catenin阳性反应主要定位于肝内增生的细胞团及新生胆管上皮细胞质,各组间积分吸光度值差别有显著性(P<0.01)。结论 CCl4诱导的肝纤维化过程中β-catenin mRNA表达与蛋白表达不同步,阳性表达细胞主要为新生的细胞团及胆管上皮细胞。
- 熊喜峰何伟业谢湘梅匡芳梅刘玉荣马宁芳
- 关键词：Β-CATENIN胆管上皮细胞CCL4小鼠
- ALC1在制备白血病耐药逆转剂及作为耐药性白血病诊断试剂方面的应用
- 本发明涉及白血病耐药性领域，公开了ALC1抑制剂在制备白血病耐药性逆转剂方面的应用，以及ALC1基因在制备耐药性白血病诊断试剂盒方面的应用。基于测定患者外周血或骨髓样本ALC1基因表达，基因的高表达与细胞对化疗药耐受性增...
- 马宁芳关新元黄振倩熊喜峰
- 文献传递
